سال 7، شماره 4 - ( زمستان 1392 )
جلد 7 شماره 4 صفحات 35-30 |
برگشت به فهرست نسخه ها
Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
Hojati Z, Givi S, Kay M. Recombinant Streptomyces clavuligerus strain including cas2 gene production and analysis its antibiotic overproduction by bioassay. Iran J Med Microbiol 2014; 7 (4) :30-35
URL: http://ijmm.ir/article-1-193-fa.html
URL: http://ijmm.ir/article-1-193-fa.html
حجتی نجف آبادی زهره، گیوی صدیقه، کی مریم. تولید گونه‌ی تراریخت استرپتومایسس کلاولی‌جروس واجد ژن cas2 و بررسی افزایش تولید پادزیست در آن با روش بیواسی. مجله میکروب شناسی پزشکی ایران. 1392; 7 (4) :30-35
زهره حجتی نجف آبادی 
1، صدیقه گیوی2 ، مریم کی2
1، صدیقه گیوی2 ، مریم کی2
1- دانشگاه اصفهان ، Z.hojati@sci.ui.ac.ir
2- دانشگاه اصفهان
2- دانشگاه اصفهان
چکیده: (12379 مشاهده)
زمینه و اهداف: استرپتومایسس کلاولی‌جروس تولیدکننده‌ی پادزیست کلاولانیک اسید است که به‌طور گسترده‌ای همراه با سایر پادزیست‌های قوی و حساس به β لاکتاماز استفاده می‌گردد. ژن cas2 در دسته ژنی کلاولانیک اسید قرارگرفته و در تنظیم بیوسنتز کلاولانیک اسید نقش دارد.
مواد و روش کار: سازه (کانسترکت) نوترکیب pMTcas2 حاوی ژن cas2 از دانشگاه اصفهان تهیه گردید. با استفاده از روش لیز قلیایی پلاسمید نوترکیب از سویه‌ی استرپتومایسس لیویدنس استخراج گردید. کانسترکت نوترکیب با استفاده از روش پلی‌اتیلن گلیکول به پروتوپلاست‌های تهیه‌شده از باکتری استرپتومایسس کلاولی‌جروس ترانسفورم گردید. به‌منظور تأیید ترانسفورماسیون از روش‌های استخراج پلاسمید و PCR با استفاده از پرایمر های اختصاصی cas2 استفاده شد. درنهایت به‌منظور بررسی نحوه‌ی تأثیر ژن cas2 اضافه‌شده در تولید پادزیست از روش بیواسی استفاده گردید.
یافته‌ها: ساختار پلاسمید نوترکیب پس از استخراج با روش هضم آنزیمی تأیید شد. پس از ترانسفورماسیون کلنی‌های تک بر روی محیط بازیابی پروتوپلاست حاوی پادزیست اسپورهای خاکستری‌رنگ بر روی آن شکل گرفت. استخراج پلاسمید از سویه‌ی ترانسفورم شده انجام‌شده و ترانسفورماسیون با انجام PCR تأیید گردید. مطالعات بایواسی نشان داد که حضور پلاسمید نوترکیب سبب افزایش 1/4 برابری تولید کلاولانیک اسید در سویه‌ی استرپتومایسس کلاولی‌جروس گردیده است.
نتیجه‌گیری: با انجام روش بیواسی و تجزیه‌وتحلیل یافته‌ها مشخص شد که حضور پلاسمید نوترکیب واجد ژن cas2 سبب افزایش تولید کلاولانیک اسید در سویه‌ی استرپتومایسس کلاولی‌جروس گردیده است. افزایش تولید کلاولانیک اسید می‌تواند گامی مؤثر در روند کاهش هزینه‌های تولید داروهای پرمصرف وابسته به آن گردد.
مواد و روش کار: سازه (کانسترکت) نوترکیب pMTcas2 حاوی ژن cas2 از دانشگاه اصفهان تهیه گردید. با استفاده از روش لیز قلیایی پلاسمید نوترکیب از سویه‌ی استرپتومایسس لیویدنس استخراج گردید. کانسترکت نوترکیب با استفاده از روش پلی‌اتیلن گلیکول به پروتوپلاست‌های تهیه‌شده از باکتری استرپتومایسس کلاولی‌جروس ترانسفورم گردید. به‌منظور تأیید ترانسفورماسیون از روش‌های استخراج پلاسمید و PCR با استفاده از پرایمر های اختصاصی cas2 استفاده شد. درنهایت به‌منظور بررسی نحوه‌ی تأثیر ژن cas2 اضافه‌شده در تولید پادزیست از روش بیواسی استفاده گردید.
یافته‌ها: ساختار پلاسمید نوترکیب پس از استخراج با روش هضم آنزیمی تأیید شد. پس از ترانسفورماسیون کلنی‌های تک بر روی محیط بازیابی پروتوپلاست حاوی پادزیست اسپورهای خاکستری‌رنگ بر روی آن شکل گرفت. استخراج پلاسمید از سویه‌ی ترانسفورم شده انجام‌شده و ترانسفورماسیون با انجام PCR تأیید گردید. مطالعات بایواسی نشان داد که حضور پلاسمید نوترکیب سبب افزایش 1/4 برابری تولید کلاولانیک اسید در سویه‌ی استرپتومایسس کلاولی‌جروس گردیده است.
نتیجه‌گیری: با انجام روش بیواسی و تجزیه‌وتحلیل یافته‌ها مشخص شد که حضور پلاسمید نوترکیب واجد ژن cas2 سبب افزایش تولید کلاولانیک اسید در سویه‌ی استرپتومایسس کلاولی‌جروس گردیده است. افزایش تولید کلاولانیک اسید می‌تواند گامی مؤثر در روند کاهش هزینه‌های تولید داروهای پرمصرف وابسته به آن گردد.
نوع مطالعه: مقاله پژوهشی |
موضوع مقاله:
بیوتکنولوژی میکروبی
دریافت: 1392/10/6 | پذیرش: 1392/12/13 | انتشار الکترونیک: 1393/3/6
دریافت: 1392/10/6 | پذیرش: 1392/12/13 | انتشار الکترونیک: 1393/3/6
ارسال پیام به نویسنده مسئول
| بازنشر اطلاعات | |
 |
این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است. |
