[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: درباره نشريه :: آخرين شماره :: آرشیو مجله :: ارسال مقاله :: ثبت نام :: جستجو :: تماس با ما ::
:: سال 12، شماره 6 - ( بهمن-اسفند 1397 ) ::
جلد 12 شماره 6 صفحات 390-398 برگشت به فهرست نسخه ها
شناسایی حالت زنده اما غیرقابل‌کشت باکتری اشریشیا کلی (Escherichia coli O157:H7) با استفاده از وارونویسی واکنش زنجیره‌ای پلیمراز (RT-PCR)
محمد خضری1، مسعود رضائی 2، اشرف محبتی مبارز3، مهدی ذوالفقاری4
1- گروه فرآوری محصولات شیلاتی، دانشکدۀ علوم دریایی، دانشگاه تربیت مدرس، نور، ایران
2- گروه فرآوری محصولات شیلاتی، دانشکدۀ علوم دریایی، دانشگاه تربیت مدرس، نور، ایران ، rezai_ma@modares.ac.ir
3- گروه باکتری‌شناسی پزشکی، دانشکدۀ پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
4- گروه فرآوری محصولات شیلاتی، دانشکدۀ شیلات و محیط زیست، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی، گرگان، ایران
چکیده:   (440 مشاهده)
زمینه و هدف: باکتری‌های متعددی همانند اشریشیا کلی تحت شرایط نامساعد می‌توانند وارد حالت زنده اما غیرقابل کشت (VBNC) شوند که با روش‌های تشخیص بر پایه کشت باکتری قادر به شناسایی نیستند. در تحقیق حاضر، وارونویسی واکنش زنجیره‌ای پلیمراز (RT-PCR) برای تشخیص باکتری Escherichia coli O۱۵۷:H۷ در حالت VBNC بررسی شد.
مواد و روش‌کار: باکتری E. coli O۱۵۷:H۷ به تیمارهای آب‌مقطر و آب‌نمک ۳۰درصد تلقیح و در دمای اتاق نگهداری شد. کشت‌پذیری باکتری‌ها روی محیط کشت مک کانکی آگار تعیین شد. RT-PCR ژن ۱۶S rRNA شامل استخراج و تخلیص RNA، تیمار DNase I برای حذف آلودگی DNA و سپس سنتز cDNA و الکتروفورز محصول PCR نمونه‌های cDNA برای تشخیص زنده‌مانی باکتری E. coli O۱۵۷:H۷ تحت تیمارهای مورد مطالعه به کار رفت و با نتایج RT-PCR ژن ۱۶S rRNA در باکتری‌های کشته‌شده به‌وسیلۀ حرارت مقایسه شد.
یافته‌ها: کشت‌پذیری باکتری‌ها در تیمار آب‌مقطر طی مدت مطالعه حفظ شد؛ اما تیمار آب‌نمک ۳۰ درصد باعث کشت‌ناپذیری باکتری در روز چهارم مطالعه شد. نتایج RT-PCR ژن ۱۶S rRNA بیانگر حفظ بیان این ژن در باکتری‌های کشت‌پذیر و غیرقابل‌کشت طی مدت مطالعه بود، در حالی که در باکتری‌های کشته‌شده به‌وسیلۀ حرارت بیان این ژن منفی بود که نشان‌دهندۀ کارایی RT-PCR ژن ۱۶S rRNA در تشخیص باکتری‌های زنده از غیرزنده بود.
نتیجه‌گیری: باکتری E. coli O۱۵۷:H۷ تحت استرس شوری ۳۰ درصد وارد حالت VBNC شد که می‌تواند باعث مخاطراتی جدی برای سلامت انسان شود. وارونویسی واکنش زنجیره‌ای پلیمراز (RT-PCR) می‌تواند برای تشخیص باکتری‌های VBNC به کار رود.

 
واژه‌های کلیدی: اشریشیا کلی، زنده‌مانی باکتری، وارونویسی واکنش زنجیره‌ای پلیمراز
متن کامل [PDF 748 kb]   (65 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي | موضوع مقاله: میکروبیولوژی مواد غذایی
ارسال پیام به نویسنده مسئول

ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

CAPTCHA code


XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Khezri M, Rezaei M, Mohabbati Mobarez A, zolfaghari M. Detection of Viable But Non-Culturable State of Escherichia coli O157:H7 Using Reverse Transcription PCR. Iran J Med Microbiol. 2019; 12 (6) :390-398
URL: http://ijmm.ir/article-1-889-fa.html

خضری محمد، رضائی مسعود، محبتی مبارز اشرف، ذوالفقاری مهدی. شناسایی حالت زنده اما غیرقابل‌کشت باکتری اشریشیا کلی (Escherichia coli O157:H7) با استفاده از وارونویسی واکنش زنجیره‌ای پلیمراز (RT-PCR). مجله میکروب شناسی پزشکی ایران. 1397; 12 (6) :390-398

URL: http://ijmm.ir/article-1-889-fa.html



سال 12، شماره 6 - ( بهمن-اسفند 1397 ) برگشت به فهرست نسخه ها
مجله میکروب شناسی پزشکی ایران Iranian Journal of Medical Microbiology
Persian site map - English site map - Created in 0.07 seconds with 32 queries by YEKTAWEB 3862