سال 7، شماره 4 - ( زمستان 1392 )
جلد 7 شماره 4 صفحات 29-24 |
برگشت به فهرست نسخه ها
Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
Mirzaie A, Fallah Mehrabadi J, Amirmozafari N, Nejadsattari T. Cloning, Expression and Characterization of PprI gene in Escherichia coli. Iran J Med Microbiol 2014; 7 (4) :24-29
URL: http://ijmm.ir/article-1-248-fa.html
URL: http://ijmm.ir/article-1-248-fa.html
میرزایی امیر، فلاح مهرآبادی جلیل، امیرمظفری نور، نژادستاری طاهر. کلونینگ، بیان و ارزیابی عملکرد ژن PprI داینوکوکوس رادیودورانس در اشریشیا کلی. مجله میکروب شناسی پزشکی ایران. 1392; 7 (4) :24-29
1- 1. گروه زیست‌شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات تهران، تهران ایران.
2- 2. گروه علوم زیستی و فن‌آوری تکنولوژی، دانشگاه صنعتی مالک اشتر، تهران، ایران. ،jalil.fallah@gmail.com
3- 3. گروه میکروب‌شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی ایران.
2- 2. گروه علوم زیستی و فن‌آوری تکنولوژی، دانشگاه صنعتی مالک اشتر، تهران، ایران. ،
3- 3. گروه میکروب‌شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی ایران.
چکیده: (15607 مشاهده)
زمینه و اهداف: ژن PprI یکی از ژن‌های جدید شناخته‌شده در باکتری داینوکوکوس رادیودورانس می‌باشد که نقش اساسی در ترمیم DNA و مقاومت این باکتری نسبت به اشعه ماورای بنفش دارد. هدف این مطالعه کلون، بیان و بررسی خصوصیات ژن PprI در اشریشیاکلی می‌باشد.
مواد و روش کار: ژن PprI باکتری داینوکوکوس رادیودورانس در حامل کلونینگ pGEM به‌صورت سنتتیک ساخته‌شده و در وکتور pET21a ساب کلون گردید. حامل پلاسمید بیانی pET21a حاوی ژن PprI در اشریشیاکلی سویه Origami ترانسفورم گردید و بیان پروتئین با استفاده از SDS-PAGE و وسترن بلات بررسی شد. هم چنین میزان مقاومت به اشعه UV-C در باکتری اشریشیا کلی نوترکیب تعیین شد.
یافته‌ها: در این مطالعه وکتور pET21a حاوی ژن PprI به همراه دم انتهایی هیستیدینی ساخته شد و شرایط بهینه برای بیان پروتئین نوترکیب PprI تعیین گردید. همچنین اشریشیا کلی نوترکیب نسبت به سویه فاقد ژن PprI به اشعه UV-C مقاوم‌تر شده بود.
نتیجه‌گیری: نتایج این مطالعه نشان می‌دهد که پروتئین نوترکیب PprI می‌تواند گزینه مناسبی به‌عنوان پروتئین مقاوم به پرتو باشد. همچنین می‌توان پروتئین تولیدشده را خالص‌سازی کرده و میزان مقاومت به اشعه UV-C را در سیستم‌های پروکاریوتی و یوکاریوتی نیز بررسی نمود.
مواد و روش کار: ژن PprI باکتری داینوکوکوس رادیودورانس در حامل کلونینگ pGEM به‌صورت سنتتیک ساخته‌شده و در وکتور pET21a ساب کلون گردید. حامل پلاسمید بیانی pET21a حاوی ژن PprI در اشریشیاکلی سویه Origami ترانسفورم گردید و بیان پروتئین با استفاده از SDS-PAGE و وسترن بلات بررسی شد. هم چنین میزان مقاومت به اشعه UV-C در باکتری اشریشیا کلی نوترکیب تعیین شد.
یافته‌ها: در این مطالعه وکتور pET21a حاوی ژن PprI به همراه دم انتهایی هیستیدینی ساخته شد و شرایط بهینه برای بیان پروتئین نوترکیب PprI تعیین گردید. همچنین اشریشیا کلی نوترکیب نسبت به سویه فاقد ژن PprI به اشعه UV-C مقاوم‌تر شده بود.
نتیجه‌گیری: نتایج این مطالعه نشان می‌دهد که پروتئین نوترکیب PprI می‌تواند گزینه مناسبی به‌عنوان پروتئین مقاوم به پرتو باشد. همچنین می‌توان پروتئین تولیدشده را خالص‌سازی کرده و میزان مقاومت به اشعه UV-C را در سیستم‌های پروکاریوتی و یوکاریوتی نیز بررسی نمود.
نوع مطالعه: مقاله پژوهشی |
موضوع مقاله:
بیوتکنولوژی میکروبی
دریافت: 1392/12/5 | پذیرش: 1393/1/24 | انتشار الکترونیک: 1393/3/6
دریافت: 1392/12/5 | پذیرش: 1393/1/24 | انتشار الکترونیک: 1393/3/6
ارسال پیام به نویسنده مسئول
| بازنشر اطلاعات | |
 |
این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است. |
