سال 14، شماره 6 - ( آذر - دی 1399 )
جلد 14 شماره 6 صفحات 659-643 |
برگشت به فهرست نسخه ها
Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
Khademi Sayed Bonadaki Z S, Madani R, Pakzad P, Golchinfar F, Emami T. Evaluating the Immunogenicity of Avian Influenza Virus Nucleoprotein. Iran J Med Microbiol 2020; 14 (6) :643-659
URL: http://ijmm.ir/article-1-1149-fa.html
URL: http://ijmm.ir/article-1-1149-fa.html
خادمی سید بنادکی زهرا سادات، مدنی رسول، پاکزاد پرویز، گلچین فر فریبا، امامی تارا. ایمونوژنیسیتی نوکلئوپروتئین ویروس آنفلوانزای طیور. مجله میکروب شناسی پزشکی ایران. 1399; 14 (6) :643-659
1- دانشگاه آزاد اسلامی
2- موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی ،madanirasool@gmail.com
3- دانشگاه آراد اسلامی
4- موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی
2- موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی ،
3- دانشگاه آراد اسلامی
4- موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی
چکیده: (3175 مشاهده)
زمینه و اهداف: ویروس آنفلوانزا، بیماری عفونی جدی آنفلوانزای مرغی (طیور) را ایجاد می‌کند که این ویروس متعلق به خانواده ارتومیکیسوویریده نوع A است. سنتز RNA ویروسی A با توجه به میان‌کنش نوکلئوپروتئین (NP) با پلیمراز ویروسی صورت می‌گیرد. در مطالعه حاضر، ایمنوژنسیتی نوکلئوپروتئین ویروس آنفلوانزای مرغی بررسی شد.
مواد و روش کار: نمونه ویروسی آنفلوانزی مرغی سویه N2H9 A/Chicken/Iran/259/2014/ انتخاب گردید. به‌‌منظور انجام الکتروفورز و خالص‌سازی نوکلئوپروتئین، غلظت پروتئین نمونه‌ها مشخص شد. الکتروفورز SDS-PAGE و Native-PAGE بر روی ژل پلی‌آکریل‌آمید انجام گرفت و تفاوت بین باند ژل در دو روش ارزیابی شد. خالص‌سازی نوکلئوپروتئین ویروس با روش الکتروالوشن صورت گرفت و نوکلئوپروتئین خالص‌شده با استفاده از روش الایزا برای به‌دست آوردن تیترهای آنتی‌بادی تولیدشده ارزیابی گردید. برای تأیید نهایی از آزمون اوچترلونی و وسترن بلات استفاده شد.
یافته‌ها: با تعیین وزن مولکولی هر یک از پلی‌پپتیدها، وزن مولکولی پروتئین‌های H9N2 بین 30 تا 140 کیلو دالتون و وزن مولکولی نوکلئوپروتئین 60 کیلو دالتون بود. نوکلوپروتئین با روش الکتروالوشن خالص شد. اوچترلونی نشان داد که در رقت‌های سرم خام، 1:4 و 1:2، خطوط رسوبی بین سرم و آنتی ژن NP ایجاد شده است. NP-الایزا تشخیص سرولوژی سریع را در رقت 1:20 امکان پذیر کرد. در نهایت، با آزمون وسترن بلات، باند 60 کیلو دالتونی نوکلئوپروتئین تایید شد.
نتیجه‌گیری: نوکلئوپروتئین خالص شده با روش الکترولوشن قابلیت تحریک سیستم ایمنی را دارد که می‌توان از آن جهت ساخت کیت‌های تشخیصی استفاده نمود.
مواد و روش کار: نمونه ویروسی آنفلوانزی مرغی سویه N2H9 A/Chicken/Iran/259/2014/ انتخاب گردید. به‌‌منظور انجام الکتروفورز و خالص‌سازی نوکلئوپروتئین، غلظت پروتئین نمونه‌ها مشخص شد. الکتروفورز SDS-PAGE و Native-PAGE بر روی ژل پلی‌آکریل‌آمید انجام گرفت و تفاوت بین باند ژل در دو روش ارزیابی شد. خالص‌سازی نوکلئوپروتئین ویروس با روش الکتروالوشن صورت گرفت و نوکلئوپروتئین خالص‌شده با استفاده از روش الایزا برای به‌دست آوردن تیترهای آنتی‌بادی تولیدشده ارزیابی گردید. برای تأیید نهایی از آزمون اوچترلونی و وسترن بلات استفاده شد.
یافته‌ها: با تعیین وزن مولکولی هر یک از پلی‌پپتیدها، وزن مولکولی پروتئین‌های H9N2 بین 30 تا 140 کیلو دالتون و وزن مولکولی نوکلئوپروتئین 60 کیلو دالتون بود. نوکلوپروتئین با روش الکتروالوشن خالص شد. اوچترلونی نشان داد که در رقت‌های سرم خام، 1:4 و 1:2، خطوط رسوبی بین سرم و آنتی ژن NP ایجاد شده است. NP-الایزا تشخیص سرولوژی سریع را در رقت 1:20 امکان پذیر کرد. در نهایت، با آزمون وسترن بلات، باند 60 کیلو دالتونی نوکلئوپروتئین تایید شد.
نتیجه‌گیری: نوکلئوپروتئین خالص شده با روش الکترولوشن قابلیت تحریک سیستم ایمنی را دارد که می‌توان از آن جهت ساخت کیت‌های تشخیصی استفاده نمود.
نوع مطالعه: مقاله پژوهشی |
موضوع مقاله:
ویروس شناسی پزشکی
دریافت: 1399/3/5 | پذیرش: 1399/6/30 | انتشار الکترونیک: 1399/8/20
دریافت: 1399/3/5 | پذیرش: 1399/6/30 | انتشار الکترونیک: 1399/8/20
ارسال پیام به نویسنده مسئول
| بازنشر اطلاعات | |
 |
این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است. |
