Arashkia A, Rouhvand F, Memarnejadian A, Alizadeh S, Motevalli F, Ebrahimi M. Immunoinformatics modeling, construction of DNA plasmids Carrying CTL epitopes of hepatitis C virus and their preliminary immunological analysis. Iran J Med Microbiol 2011; 4 (4) :30-40
URL:
http://ijmm.ir/article-1-25-fa.html
آرش کیا آرش، روحوند فرزین، معمارنژادیان آرش، علیزاده شهاده، متولی فاطمه، ابراهیمی ملانیا. مدلسازی ایمونوانفورماتیکی، ساخت پلاسمیدهای حامل اپیتوپهای CTL ویروس هپاتیت C و بررسی اولیه ایمنیزایی آنها . مجله میکروب شناسی پزشکی ایران. 1389; 4 (4) :30-40
URL: http://ijmm.ir/article-1-25-fa.html
1- بخش هپاتیت و ایدز، بانک ژن نوترکیب، انستیتو پاستور ایران
2- فرزین روحوند، انستیتو پاستور ایران، بخش هپاتیت و ایدز، بانک ژن نوترکیب
چکیده: (18464 مشاهده)
زمینه و اهداف: تاثیرات سرکوب کنندگی برخی از کلیدی ترین پروتئینهای ویروس هپاتیت c بر سیستم ایمنی و جهش سریع ویروس، توجه را به واحدهای ایمونوژن کوچک و پایدار جلب نمود. لذا، واکسن های مولتی اپی توپ به منظور تمرکز پاسخ ایمنی بر این واحدها معرفی شدند. ولی، به دلیل پاسخ ایمنی نسبتاً ضعیف علیه این واکسن ها، افزایش ایمنی زایی نیازمند تمهیدات بیشتری است. این مطالعه با هدف ساخت پلاسمیدهای حامل
اپیتوپهای CTL ویروس هپاتیت C بهروش مدل سازی ایمونوانفورماتیک و تعیین اولیه ایمنی زایی آنها انجام شد.
روش بررسی: یک اپی توپ H-2Dd و دو اپیتوپ HLA-A*0201 از نواحی E2، E1 و core در HCV انتخاب شد و با ابزارهای ایمونوانفورماتیک برای بهترین ترادف آنالیز شد. توالی مولتی اپی توپ به روش SOEing-PCR ساخته شد و در ناقل pcDNA3.1+ کلون گردید. توالی های ارتقاء دهنده PADRE، سیگنال رتیکولوم آندوپلاسمیک (ER signal sequence: ERss) و HBsAg به انتهای '5 توالی مولتی اپی توپ متصل شد و بیان پلاسمیدها
به صورت in-vitro به روش های RT-PCR، دات-بلات، وسترن-بلات و ایمونوفلورسانس بررسی شد. ارزیابی اولیه ایمنیزایی به صورت in-vivo با آزمایش ازدیاد حساسیت تاخیری (Delayed type hypersensitivity: DTH) انجام شد. نتایج با آزمونهای Non parametric Mann-Whitney و ANOVA ارزیابی شدند.
یافته ها: نتایج آزمایشهای in-vitro، بیان پلاسمیدها را تائید کرد و ارزیابیهای اولیه in-vivo، پردازش و عرضه اپیتوپ H-2Dd را در موش BALB/c نشان داد. همچنین در حالیکه اثرات ارتقاء پاسخ برای ERss و PADRE نشان داده شدند، اتصال HBsAg تاثیری در افزایش پاسخ نداشت.
نتیجه گیری: این مطالعه ارزش پیش بینی های ایمونوانفورماتیک و آزمایش DTH را، برای آنالیز اولیه واکسن-های داوطلب مولتی اپیتوپی در موشهای BALB/c، نشان داد. نتایج، تائید کافی برای بررسی بیشتر سازه های طراحی شده را در موش ترانس ژنیک (تراریخته) HLA-A2 فراهم می کند.
نوع مطالعه:
مقاله پژوهشی |
موضوع مقاله:
ویروس شناسی پزشکی دریافت: 1392/8/3 | پذیرش: 1392/8/19 | انتشار الکترونیک: 1392/8/19