Iranian Journal of Medical Microbiology

fa بررسی امکان ورود باکتری Listeria monocytogenes به حالت زنده اما غیرقابل کشت و بیان ژن های بیماری زایی آن طی دوره انجماد (ºC18-) ناگت ماهی قزل آلای رنگین‌کمان (Oncorhynchus Mykiss) Investigating the Possibility of the Listeria Monocytogenes Entering Into a Viable But Non-Culturable (VBNC) Form and Expression of the Pathogenic Genes During the Frozen Storage of (-18ºC) Rainbow Trout Fish Nugget میکروب شناسی مواد غذایی Food Microbiology مقاله پژوهشی Original Research Article زمینه و هدف: هدف از این پژوهش بررسی امکان ورود باکتری Listeria monocytogenes طی فرایند انجماد به حالت Viable But Non Culturable (VBNC) و بیان ژن ها بیماری زایی آن بود. مواد و روش کار: برای این منظور ۱۰۶ باکتری در اواسط رشد لگاریتمی به سه محیط سرم فیزیولوژی (NS)، BHI براث و آبگوشت ماهی قزل‌آلای رنگین‌کمان (FB) تلقیح شد و طی ۲ ماه در دمای ºC۱۸- نگهداری و بررسی شدند. سپس باکتری‌ها با روش‌های کشت (شمارش کلنی) روی محیط BHI آگار غنی‌شده در زمانهای ۴ و ۸ ساعت، ۲، ۴، ۸، ۲۰، ۳۰ و ۶۰ روز پس از شوک انجماد (ºC۱۸-) و همچنین با روش RT-PCR به منظور بررسی بیان ژن های ۱۶S rRNA، hly و inlA قبل و بعد از شوک انجماد ارزیابی شدند. یافته ها: این باکتری تا انتهای شوک توانایی کشت‌پذیری خود را حفظ کرد، اما از تعداد آنها کاسته شد. نتایج بررسی بیان ژن نشان داد انجماد موجب توقف بیان ژنهای بیماریزای hly و inlA میشود. به طوری که این ژن ها در محیط کشت غنی نیز بیان نشدند. با افزودن خون به محیط کشت غنی این باکتری فقط ژن بیماری زایی همولایزین O مجدداً بیان شد. نتیجه گیری: اگرچه انجماد موجب ورود این باکتری به حالت VBNC نمی شود، اما به عنوان یک عامل نامساعدکننده محیطی بر سطح بیان برخی از ژن های بیماری زایی باکتری مؤثر است. همچنین خون و عوامل آن می تواند به عنوان یک عامل القاکننده بیان ژن hly عمل کند؛ هر چند روی دیگر ژن‌های مطالعه‌شده تأثیرگذار نیست. بنابراین بیان ژن های بیماری زایی باکتری از یکدیگر مستقل است. Background and Aims: The purpose of this study was to investigate the possibility of Listeria monocytogenes entering the VBNC state during the frozen storage and the expression of its pathogenic genes Materials and Methods: Bacteria in 106 Colony counts of in mid log phase were inoculated into three Culture medium including Normal Saline (NS), BHI Broth and Fish Broth (FB) and kept at -18ºCfor 2 months and examined. Then, bacteria were evaluated on enriched medium BHI agar using culture methods (colony count) over times 4 and 8 hours, 2, 4, 8, 20, 30 and 60 days after the freezing shock using the method of RT-PCR for investigating the expression of 16S rRNA, hly and inlA genes; they were evaluated before and after the freezing shock. Results: This bacterium retained its ability to cultivate until the end of the shock, but reduced its number. Freezing stopped the expression of genes of hly and inlA, as these genes were not expressed in a rich culture medium either. By adding blood to the rich culture medium of this bacterium, only the hemolysin O pathogen gene was expressed. Conclusion: Although freezing does not lead to the introduction of this bacterium into the VBNC state, it is effective as an adverse environmental factor for the bacteria in the expression of its pathogenic genes. Blood and its agents can act as an agent for the induction and clarification of the hly gene, and the expression of pathogenic bacterial genes are independent of each other. Listeria monocytogenes , VBNC, hly, inlA, انجماد Listeria monocytogenes, VBNC, hly, inlA, Freezing 69 79 http://ijmm.ir/browse.php?a_code=A-10-1176-1&slc_lang=fa&sid=1 Sona Kalteh صونا کلته kalte67.s@gmail.com 100319475328460013485 100319475328460013485 No Department of Fishieries, Faculty of Fishieries and Environment, University of Agricultural Sciences and Natual Resources of Gorgan, Gorgan, Iran گروه شیلات، دانشکده شیلات و محیط زیست، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی گرگان، گرگان، ایران Seyyed Mahdi Ojagh سید مهدی اجاق Mahdi_ojagh@yahoo.com 100319475328460013486 100319475328460013486 Yes Department of Fishieries, Faculty of Fishieries and Environment, University of Agricultural Sciences and Natual Resources of Gorgan, Gorgan, Iran گروه شیلات، دانشکده شیلات و محیط زیست، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی گرگان، گرگان، ایران Alijan Tabarrayi علیجان تبرائی alijant@yahoo.com 100319475328460013487 100319475328460013487 No Department of Microbiology, Faculty of Medicine, Golestan University of Medical Sciences, Gorgan, Iran گروه میکروب شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی گلستان، گرگان، ایران Mahdi Zolfaghari مهدی ذوالفقاری zolfaghari.mz@gmail.com 100319475328460013488 100319475328460013488 No Department of Fishieries, Faculty of Fishieries and Environment, University of Agricultural Sciences and Natual Resources of Gorgan, Gorgan, Iran گروه شیلات، دانشکده شیلات و محیط زیست، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی گرگان، گرگان، ایران