fa بررسی اثر حفاظت‌بخش کاندیدای واکسن دوجزئی شامل فلاژلین تیپ A و پیلین در برابر عفونت جلدی سودوموناس آئروژینوزا در مدل موش سوخته باکتری شناسی پزشکی Medical Bacteriology مقاله پژوهشی Original Research Article <div><span style="font-family:iransans;"><strong><span style="font-size:9.0pt;">زمینه و هدف:</span></strong> <span style="font-size:9.0pt;">سودوموناس آئروژینوزا عامل بیماری‌زای فرصت‌طلبی است که باعث عفونت‌های جدی و مرگ‌ومیر زیاد در بیماران سوختگی می‌شود</span><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">.</span></span></strong><span style="font-size:9.0pt;"> هدف این مطالعه، ارزیابی اثرات حفاظت‌بخش کاندیدای واکسن دوگانه</span> <span style="font-size:9.0pt;">شامل فلاژلین<em> تیپ </em></span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">A</span></span></em><span style="font-size:9.0pt;"> و پیلین سودوموناس آئروژینوزا در مدل موشی عفونت زخم سوختگی است.</span><br> <strong><span style="font-size:9.0pt;">مواد و روش‌ کار:</span></strong><span style="font-size:9.0pt;"> ژن‌های <em>فلاژلین </em></span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">A</span></span></em><span style="font-size:9.0pt;"> (</span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">fliC</span></span></em><span style="font-size:9.0pt;">) و <em>پیلین</em> (</span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">pilA</span></span></em><span style="font-size:9.0pt;">) به‌ترتیب در وکتورهای </span><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">pET-۲۸a</span></span><span style="font-size:9.0pt;"> و </span><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">pET-۲۲b</span></span><span style="font-size:9.0pt;"> کلون‌شده و پروتئین‌های نوترکیب در باکتری </span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">E. coli BL-۲۱</span></span></em><span style="font-size:9.0pt;"> بیان گردیدند. موش‌ها با تزریق زیر جلدی ۱۰ میکروگرم از مخلوط <em>فلاژلین </em></span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">A</span></span></em><span style="font-size:9.0pt;"> و پیلین، یا </span><em><span style="font-size:9.0pt;">فلاژلین</span></em> <em><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">A</span></span></em><span style="font-size:9.0pt;">، یا پیلین ایمن شدند. تیتر </span><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">IgG</span></span><span style="font-size:9.0pt;"> اختصاصی به‌وسیله الیزای غیرمستقیم و فعالیت عملکردی آنتی‌بادی‌ها با تست <em>اپسونوفاگوسیتوز</em> بررسی شد. در پایان میزان مرگ‌ومیر و بار باکتریایی در موش‌ها سنجیده شد.</span><span style="font-size:9.0pt;"></span><br> <strong><span style="font-size:9.0pt;">یافته‌ها:</span></strong> <span style="font-size:9.0pt;">ایمن‌سازی با مخلوط <em>فلاژلین </em></span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">A</span></span></em><span style="font-size:9.0pt;"> و پیلین به‌طور معنی‌داری باعث افزایش تیتر آنتی‌بادی </span><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">IgG</span></span><span style="font-size:9.0pt;"> اختصاصی و <em>اپسونوفاگوسیتوز </em>نسبت به آنتی‌ژن‌های تک‌جزئی شد ( ۰/۰۵</span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">P</span></span></em><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;"><</span></span><span style="font-size:9.0pt;">). همچنین ایمن‌‌سازی با مخلوط فلاژلین </span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">A</span></span></em><span style="font-size:9.0pt;"> و پیلین باعث کاهش بار باکتریایی و افزایش بقای موش‌های در چالش با سودوموناس آئروژینوزا نسبت به آنتی‌ژن‌های تک‌جزئی شد (۰/۰۵</span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">P</span></span></em><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;"> <</span></span><span style="font-size:9.0pt;">).</span><br> <strong><span style="font-size:9.0pt;">نتیجه‌گیری: </span></strong><span style="font-size:9.0pt;">ایمن‌سازی با مخلوط فلاژلین </span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">A</span></span></em> <span style="font-size:9.0pt;">و پیلین باعث حفاظت موش‌های سوخته در برابر عفونت زخم سودوموناس آئروژینوزا می‌شود. کاهش بار باکتری و افزایش بقای موش ایمن‌شده نشان می‌دهد مخلوط فلاژلین </span><em><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">A</span></span></em><span style="font-size:9.0pt;"> و پیلین پتانسیل کاربرد درمانی را علیه سودوموناس آئروژینوزا در بیماران سوخته دارد.</span></span></div> <div><span style="font-family:times new roman;"><strong>Background and Aims:</strong> <em>Pseudomonas aeruginosa </em>is an opportunistic pathogen that causes serious infections and high mortality among burn patients. The aim of this study is to evaluate the protective effects of a candidate divalent vaccine containing type A flagellin and pilin of <em>P. aeruginosa </em>in a burn wound mouse model.<br> <strong>Materials and Methods: </strong>Recombinant flagellin A and pilin proteins were generated by expressing <em>fliC and pilA</em> genes (cloned in pET-28a and pET-22b vectors, respectively) in <em>E. coli</em> BL-21<span dir="RTL">.</span> Groups of mice were immunized by injection of 10 &micro;g of either flagellin A and pilin, or flagellin A, or pilin. Specific IgG titer was measured by ELISA. The functional activity of antibodies was evaluated by opsonophagocytosis assay. The protective effects of the vaccine were evaluated by measuring mortality and bacterial load in mice.<br> <strong>Results: </strong>Immunization with flagellin A and pilin mixture significantly increased the specific IgG antibody titer as well as opsonophagocytosis compared to monovalent antigens (<em>P</em><0.05). Immunization with flagellin A and pilin mixture significantly reduced the bacterial load, and increased the survival of mice challenged with <em>P. aeruginosa,</em> as compared to the monovalent antigens (<em>P</em><0.05).<br> <strong>&nbsp;Conclusions: </strong>Immunization with flagellin A and pilin mixture provides effective protection against <em>P. aeruginosa</em> wound infection in burned mice. Reduced bacterial load, and high survival rates among immunized mice suggest that flagellin A and pilin candidate vaccine shows therapeutic potential against <em>P. aeruginosa</em> infections among burn patients.</span></div> سودوموناس آئروژینوزا, فلاژلین A, پیلین, اوپسونوفاگوسیتوز Pseudomonas aeruginosa, Flagellin a, Pilin, Opsonophagocytosis 248 259 http://ijmm.ir/browse.php?a_code=A-10-242-2&slc_lang=fa&sid=1 Bahador Behrouz بهادر بهروز bahador.behroz3@gmail.com 100319475328460013195 100319475328460013195 No Department of Microbiology, Tehran University of Medical Sciences, Tehran, Iran گروه میکروبشناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران Farhad B. Hashemi فرهاد بنکدار هاشمی farhadb.hashemi@gmail.com 100319475328460013194 100319475328460013194 Yes Department of Microbiology, Tehran University of Medical Sciences, Tehran, Iran گروه میکروبشناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران