fa جداسازی و تشخیص استافیلوکوکوس اورئوس مقاوم به متی‌سیلین بر پایۀ بیان ژن‌های بیماری-زایی hla ، lukED، sei و hlg از عفونت پای بیماران دیابتی در استان مازندران میکروب شناسی مولکولی Molecular Microbiology مقاله پژوهشی Original Research Article <div style="text-align: justify;"><span style="font-size:12px;"><span style="font-family:iransans;"><strong>زمینه و هدف:</strong> <em>استافیلوکوکوس اورئوس </em>مقاوم به متی&shy;سیلین شایع&shy;ترین عامل باکتریائی عفونت زخم پای بیماران دیابتی (<span dir="LTR">DFI</span>) است. فاکتورهای بیماری &shy;زایی این باکتری شدت درجۀ عفونت زخم را افزایش می&shy;دهد و درصورت درمان نشدن به &shy;موقع منجر به قطع عضو اندام &shy;های تحتانی و مرگ بیماران مبتلا می&shy;شود. هدف این پژوهش، جداسازی باکتری <em>استافیلوکوکوس اورئوس </em>مقاوم به متی&shy;سیلین حامل ژن <em><span dir="LTR">mecA</span></em> &nbsp;و شناسایی ۴ ژن ویرولانس <em><span dir="LTR">hla</span></em> ، <em><span dir="LTR">lukED</span></em>، <em><span dir="LTR">sei</span></em> و <em><span dir="LTR">hlg</span></em> از جدایه&shy; های عفونت پای بیماران دیابتی به&shy; منظور ارزیابی نقش آن&shy; ها در میزان شدت عفونت است.<br> <strong>مواد و روش کار</strong><strong>:</strong> از ترشحات چرک ۳۰ بیمار مبتلا به عفونت پای دیابتی در استان مازندران نمونه&shy; گیری شد و <em>استافیلوکوکوس اورئوس</em> براساس ویژگی &shy;های کشت و تست&shy; های بیوشیمیائی خالص &shy;سازی شد. ارزیابی مولکولی جدایه&shy; ها پس از استخراج <span dir="LTR">DNA</span>، با ۵ جفت پرایمر اختصاصی ژن&shy;های مقصود به روش <span dir="LTR">PCR</span> صورت گرفت.<br> <strong>یافته‌ها</strong><strong>:</strong> از مجموع ۳۰ بیمار ۱۴ ایزوله (۴۶/۶%) <em>استافیلوکوکوس اورئوس</em> جداسازی و شناسایی شد. هر ۱۴ نمونه حامل ژن <em><span dir="LTR">mecA</span></em> &nbsp;بودند و فراوانی ژن&shy;های <em><span dir="LTR">hla</span></em> &nbsp;، <em><span dir="LTR">lukED</span></em> ، <em><span dir="LTR">sei</span></em> و <em><span dir="LTR">hlg</span></em> در جدایه&shy;ها به&shy; ترتیب ۱۰۰%، ۱۰۰%، ۷۱/۴% و ۶۴/۲% به &shy;دست آمد.<br> <strong>نتیجه‌گیری</strong><strong>:</strong> شناسایی این ۴ ژن به همراه ژن <em><span dir="LTR">mecA</span></em> در <em>استافیلوکوکوس اورئوس </em>جداسازی شده از زخم پای دیابتی می&shy;تواند مارکر ژنتیکی مؤثر و قابل اعتمادی در تشخیص درجه&shy; بندی عفونت پای بیماران دیابتی باشد. تشخیص عامل عفونت با روش <span dir="LTR">PCR</span> و درمان آنتی&shy;بیوتیکی مناسب و به&shy; موقع، در جلوگیری از قطع عضو بیماران دیابتی ضروری است.</span></span><br> &nbsp;</div> <pre style="text-align: justify;"> <span style="font-family:times new roman;">&nbsp; <strong>Background and Aims: </strong>Methicillin-resistant <em>Staphylococcus aureus</em> is the most common bacterial agent of diabetic foot Infection (DFI).The Virulence factors of this bacterium increases the severity of the degree of wound infection, and if not treated promptly, results in lower limb amputation and death of the affected patients. The aim of this study was to isolate methicillin resistant <em>Staphylococcus aureus</em> carries the <em>mecA</em> gene and to detect 4 Virulence genes <em>hla</em>, <em>lukED</em>, sei and hlg from patients with diabetic foot infection in order to evaluate their role in severity of infection.<span dir="RTL"></span> <strong>Materials and Methods: </strong>30 cases of diabetic foot infections in Mazandaran province were collected from pus drainage and <em>Staphylococcus aureus</em> was purified according to culture characteristics and biochemical tests. The molecular evaluation of the isolates after DNA extraction was performed with five pairs of specific primers of intended genes, by PCR method. &nbsp;<strong>Results: </strong>Of the 30 patients, 14 isolates (46.6%) of <em>S. aureus</em> were isolated and identified. Each 14 samples contained <em>mecA </em>gene and the frequency of <em>hla</em>, <em>lukED</em>, sei and hlg genes in isolates was 100%, 100%, 71.4% and 64.2%, respectively. <strong> Conclusions: </strong>Identification of these 4 genes with the <em>mecA </em>gene in <em>S. aureus</em> isolated from diabetic foot Infection can be an effective and reliable genetic marker for diagnosis of foot infection in diabetic patients. To prevent amputation, diagnosis of infection by PCR method and appropriate timely antibiotic therapy are required for Diabetic patients. </span><span style="font-family:times new roman;"> </span></pre> <div style="text-align: justify;"></div> استافیلوکوکوس اورئوس, مقاومت به متی‌سیلین, ژن‌های بیماری‌زایی, عفونت پای دیابتی Staphylococcus aureus, Methicillin Resistance, Virulence Genes, Diabetic Foot Infection 192 202 http://ijmm.ir/browse.php?a_code=A-10-172-3&slc_lang=fa&sid=1 Hossein Rasooli حسین رسولی hossein.1355@yahoo.com 100319475328460010704 100319475328460010704 No Department of Microbiology, School of Biology Sciences, Islamic Azad University of Tonekabon branch, Tonekabon, Iran گروه میکروبیولوژی، دانشکدۀ علوم زیستی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد تنکابن، تنکابن، ایران Esmaeil Ghorbanalinezhad اسمعیل قربانعلی نژاد essmamir@yahoo.com 100319475328460010705 100319475328460010705 Yes Department of Microbiology, School of Biology Sciences, Islamic Azad University of Tonekabon Branch, Tonekabon, Iran گروه میکروبیولوژی، دانشکدۀ علوم زیستی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد تنکابن، تنکابن، ایران