Iranian Journal of Medical Microbiology

fa بررسی وجود ژن aac(6')-le-aph(2'')-la در سویه های انتروکوکوس فکالیس و انتروکوکوس فیسیوم چند مقاومتی و مقاوم به مقادیر بالای جنتامایسین An investigation of aac(6')-le-aph(2")-lagene in MDR and HLGR Enterococcus faecalisand E. faeciumstrains isolated from clinical samples میکروب شناسی مولکولی Molecular Microbiology مقاله پژوهشی Original Research Article <div align="right" style="direction: rtl">زمینه و اهداف: انتروککها نقش مهمی را در ایجاد عفونت های بیمارستانی دارند و وجود سویه های چند مقاومتی در بین آنها، درمان این نوع عفونتها را به یک معضل بهداشتی تبدیل کرده است. انتروککها می توانند برخی ژنهای مقاومت به آمینوگلیکوزیدها را بصورت اکتسابی بدست آورند. محصول این ژنها آنزیمهایی هستند که باعث تغییر در ساختار آمینوگلیکوزیدها شده و در نهایت این امر منجر به حذف اثر سینرژیسم باکتریسیدال خواهد شد. یکی از مهمترین ژنهای ایجاد کننده مقاومت به مقادیر بالای جنتامایسین aac(6')-le-aph(2'')la است. هدف از این مطالعه بررسی شیوع سویه های آنتروکوکوس فکالیس و آنتروکوکوس فسیوم چند مقاومتی و همچنین مقاوم به مقادیر بالای جنتامایسین در نمونه های کلینیکی با تاکید بر روی وجود ژن aac(6')-le-aph(2'')-la می باشد. روش بررسی: بدنبال کشت اولیه 437 نمونه بالینی ارجاع شده به 5 بیمارستان و 3 آزمایشگاه خصوصی در شهر تهران، جمعا 300 سویه انتروکک جداسازی گردید و پس از انجام آزمایشات بیوشیمیایی و تعیین جنس و گونه باکتری، با استفاده از روش دیسک دیفوزیون تست سنجش حساسیت آنتی بیوتیکی برای 11 آنتی بیوتیک آمپی سیلین، تتراسیکلین، اریترومایسین، سیپروفلوکسازین، جنتامایسین دوز بالا، ونکومایسین، کوتریموکسازول، کوئینو پریستین – دالفو پریستین (سینرسید)، لینه زولید، تیکوپلانین و نیتروفورانتوئین انجام شد. مکانیزم مولکولی مقاومت به جنتامایسین با دوز بالا در دو گونه ذکر شده توسط تشخیص ژن aac(6')-le-aph(2'')-la با روش PCR بررسی گردید. یافته ها: در مجموع کل سویه های بدست آمده، درصد گونه فکالیس در مقایسه با گونه فیسیوم به ترتیب %81.3 و %18.7 بود. گونه های فیسیوم مقاومت نسبتا بالاتری به آنتی بیوتیک های مورد مطالعه در مقایسه با گونه های فکالیس نشان دادند. درصد سویه های چند مقاومتی در گونه فکالیس %50 و در گونه فیسیوم %95 بدست آمد. این ارقام در خصوص سویه های مقاوم به مقادیر بالای جنتامایسین به ترتیب 19.5 و 23.5 درصد بودند و کلیه این سویه ها دارای MIC بالاتر از 1024 میکروگرم در میلی لیتر بودند. 83 درصد از سویه های فکالیس و 100 درصد از سویه های فیسیوم دارای ژن aac(6')-le-aph(2'')-la بودند. نتیجه گیری: با توجه به درصد بالای سویه های چند مقاومتی و HLGR در بین جمعیت انتروککی مورد مطالعه و همچنین شیوع بالای ژن aac(6')-le-aph(2'')-la در بین سویه های HLGR، نشان دهنده ارتباط قوی این ژن با ایجاد مقاومت به مقادیر بالای جنتامایسین است که این خود بیانگر این نگرانی است که چنانچه در طول زمان، انتقال این ژن به سویه های حساس به جنتامایسین با روندی فزاینده اتفاق بیفتد، با مشکلات اساسی در درمان این نوع عفونتها مواجه خواهیم شد و این قضیه در دراز مدت نیاز به پیدایش نسل های تازه از آمینوگلیکوزیدها و یا آنتی بیوتیکهای جدید را می طلبد.</div> Background & objectives: Enterococci are important nosocomial pathogens. Multiple drug resistance (MDR) is common among Enterococci and presents difficulties for treatment. High level gentamicin resistance (HLGR) in enterococci, is a significant therapeutic problem. Bactericidal antimicrobial activity usually is obtained by the synergistic combination of a cell wall active agent such as penicillin or glycopeptide with an aminoglycoside. Enterococci can acquire aminoglycoside resistance genes that mediate production of aminoglycoside – modifying enzymes, which eliminate this synergistic bactericidal effect. The most clinically important HLGR genes is aac(6')-le-aph(2")-la. Material and methods: In the present study , a total of 437 clinical samples from 5 hospital and 3 private laboratory in Tehran , from azar 1384to Tir 1385 , were collected and 300 enterococcal isolates recovered all of the strains were identified to the species level by conventional biochemical tests and assayed for their susceptibility to 11 antibiotics, ampicillin, tetracycline, erythromycin,ciprofloxacin, high dose gentamicin, vancomycin, cotrimoxazole, quinopristin –daifopristin (synercid), linezolid , teicoplanin and nitrofurantoin by disk diffusion method. Gentamicin MIC was accomplished for HLGR strains. Results: The most frequent species was E. faecalis (81.3%) and then E. faecium (18.7%). MDR strains were detected in 50% and 95% of E.faecalis and E.faecium, respectively. The number of HLGR strains for E.faecalis and E.faecium were found to be 19.5% and 23.5% , respectively. All HLGR strains showed MIC>1024 µg/mL The PCR results showed that 83% and 100% of E.faecalisand E.faecium strains carried aac(6')-le-aph(2")-la gene as detected by PCR. Conclusion: The present study indicates high rate dissemination of aac(6')-le-aph(2")-la gene, suggesting the possible mechanism of transfer of gentamicin resistant genes within the enterococcal population and in this case probable need to new aminoglycosides orother antibiotics would be predictable انتروکوکوس، چند مقاومتی، مقاوم به مقادیر بالای جنتامایسین Pseudomonas aeruginosa, antibiotic resistance, metallo-beta-lactamase 33 38 http://ijmm.ir/browse.php?a_code=A-10-1-47&slc_lang=fa&sid=1 Mahnaz Saifi مهناز سیفی 1003194753284600232 1003194753284600232 No Soltandallal M.M, Department of Pathobiology, School of Public Health, Medical Sciences بخش باکتری شناسی، گروه پاتوبیولوژی،دانشکده بهداشت دانشگاه تهران Mohammadreza Pourshafie محمدرضا پورشفیع 1003194753284600233 1003194753284600233 No Soltandallal M.M, Department of Pathobiology, School of Public Health, Medical Sciences بخش باکتری شناسی، گروه پاتوبیولوژی،دانشکده بهداشت دانشگاه تهران Kataun Borhani کتایون برهانی 1003194753284600234 1003194753284600234 No Soltandallal M.M, Department of Pathobiology, School of Public Health, Medical Sciences بخش باکتری شناسی، گروه پاتوبیولوژی،دانشکده بهداشت دانشگاه تهران Fateh Rahimi فاتح رحیمی 1003194753284600235 1003194753284600235 No Iran Pasteur Institute بخش باکتری شناسی ،دانشگاه پاستورایران Mohammad Soltandallal محمدمهدی سلطان دلال soltanda@tums.ac.ir 1003194753284600236 1003194753284600236 Yes Soltandallal M.M, Department of Pathobiology, School of Public Health, Medical Sciences بخش باکتری شناسی، گروه پاتوبیولوژی،دانشکده بهداشت دانشگاه تهران