Iranian Journal of Medical Microbiology

fa جدا سازی سویه های سودوموناس آئروژینوزا تولید کننده متالوبتالاکتاماز از بیماران مبتلا به عفونت های سوختگی و شناسایی ژن های bla vim وbbla imp با روش PCR Isolation of Pseudomonas aeruginosastrains producing metallo beta lactamases from infections in burned patients and identification of blaIMP and blaVIMgenes by PCR میکروب شناسی مولکولی Molecular Microbiology مقاله پژوهشی Original Research Article <div align="right" style="direction: rtl">زمینه و اهداف: سودوموناس آئروژینوزا یکی از عوامل مهم عفونت های بیمارستانی خصوصا در بیماران مبتلا به نقص سیستم ایمنی می باشد. برای درمان عفونت های شدید ناشی از این میکروارگانیسم آنتی بیوتیکهای متعددی از جمله بتالاکتامها به کار می روند. شیوع بیمارستانی سویه های مقاوم به آنتی بیوتیک های بتالاکتام بسیار گزارش شده است که از مهمترین عوامل دخیل در این مقاومت ها، تولید آنزیم های بتالاکتاماز می باشد. از جمله این آنزیم ها می توان به متالوبتالاکتامازها اشاره نمود که این آنزیم ها طیف سوبسترای وسیعی داشته و همه بتالاکتامها را، به جز مونوباکتام آزترئونام، هیدرولیز می کنند. در تحقیق حاضر فراوانی تولید متالوبتالاکتاماز در ایزوله های سودوموناس آئروژینوزا مقاوم به ایمیپنم مورد ارزیابی قرار گرفت. روش بررسی: در ابتدا الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی 100 ایزوله بالینی سودوموناس آئروژینوزا، که از همین تعداد بیمار مبتلا به عفونت های سوختگی بستری در بیمارستان طالقانی اهواز جدا شده بودند، با تست دیسک دیفیوژن به روش کربی - بائر تعیین شد. تمام ایزوله های کلینیکی سودوموناس آئروژینوزا مقاوم به ایمیپنم توسط Etest ایمیپنم / ایمیپنم به اضافه (Etest Metallo-b- Lactamase) EDTA برای تولید متالوبتالاکتاماز غربالگری شدند. استخراج DNA از کلنی های کشت خالص توسط روش جوشانیدن ساده انجام گرفت. DNA های استخراج شده با استفاده از پرایمرهای اختصاصی برای ژن های VIM و IMP متالوبتالاکتاماز توسط روش PCR مورد بررسی قرار گرفتند. یافته ها: بر اساس نتایج حاصله درصد مقاومت ایزوله ها به شرح زیر بود: سفپیم %100، سفتازیدیم %81، تیکارسیلین %70، ایمیپنم %41، مروپنم %23 و پیپراسیلین %20. در بررسی تولید متالوبتالاکتاماز با روش Etest MBL در ایزوله های مقاوم به ایمیپنم، مشخص شد که 8 ایزوله از 41 ایزوله مقاوم (%19.51) متالوبتالاکتاماز مثبت بودند. از 41 ایزوله سودوموناس آئروژینوزا مقاوم به ایمیپنم جدا شده در طول این دوره تحقیق 8 ایزوله ای که با روش Etest MBL مثبت شده بودند دارای ژن VIM بودند و ایزوله ای که ژن IMP را داشته باشد شناسایی نشد و 33 ایزوله باقیمانده (%80.49) برای هر دو ژنهای VIM و IMP منفی شدند. نتیجه گیری: نتایج این تحقیق نشان می دهد که همانند سایر تحقیقات انجام شده در دیگر نقاط جهان میزان سویه های مقاوم به آنتی بیوتیک سودوموناس آئروژینوزا رو به افزایش است و تولید متالوبتالاکتاماز می تواند یکی از دلایل این امر باشد.</div> Background & objectives: Pseudomonas aeruginosais one of the most important causes of nosocomial infections particularly in immunodeficient patients. Several antibiotics such as betalactams, aminoglycosides and quinolones are used for the treatment of infections caused by this organism, but the prevalence of multidrug resistant strains has been reported frequently. Beta lactamase production is one of the most important resistant factors. Metallo-beta-lactamase (MBLs) have a broad-substrate spectrum, they hydrolyse all beta-lactams except for the monobsctam aztreonam. In this study, the metallo-beta-lactamase production in Pseudomonas aeruginosastrains were investigated. Material and Methods: Initially, the antibiotic resistance pattern of 100 clinical strains isolated from infections in burned patients in Ahwaz Taleghani hospital was determined by disc diffusion method. All the clinical Pseudomonas aeruginosaisolates nonsusceptible to imipenem were screened for production of MBLs by Etest with imipenem/ imipenem plus EDTA (Etest MBL).DNA was extracted from colonies by simple boiling method. The extracted DNAs were then examined by PCR involving specific primers for blaVIM and blaIMP MBL genes. Results: Based on the obtained results, the percentage of resistance was as below: Cefepime100%, Ceftazidime81%, Ticarcillin70%, Imipenem41%, Meropenem23% and Piperacillin20%. The investigation for MBL production in the strains resistant to IPM by Etest MBL showed that 8 out of 41(19/51%) Imipenem resistant isolates were MBL producers. All the clinical P. aeruginosaisolates that were nonsusceptible to IPM were then examined by PCR for the presence of the blaVIM and bla IMP genes. Of the 41 P.aeruginosastrains isolated during the study period, 8(19/51%) were positive for blaVIM gene.The results from PCR assay represented thet 8 isolates among 41 IPM resistant strains of Pseudomonas aeruginosa were positive for blaVIM gene. The remaining 33(80/49%) were negative for VIM and IMP MBLs. Conclusion:The results of this investigation in agreement with shows that, the antibiotic resistance of Pseudomonas aeruginosais increasing in burn hospitals and the MBLs production can be the cause of this issue. Pseudomonas aeruginosa, antibiotic resistance, metallo-beta-lactamase 23 31 http://ijmm.ir/browse.php?a_code=A-10-1-46&slc_lang=fa&sid=1 Fatemeh Mihani فاطمه میهنی 1003194753284600230 1003194753284600230 No Dept. of Microbiology, School of Medicine, Ahwaz Jondishapour University of Medical Sciences, Ahwaz گروه میکروب شناسی و مرکز تحقیقات بیماریهای عفونی و گرمسیری،دانشکده پزشکی،دانشگاه علوم پزشکی جندی شاپور اهواز Azardokht Khosravi اذردخت خسروی khosraviaz@yahoo.com 1003194753284600231 1003194753284600231 Yes Dept. of Microbiology, School of Medicine, Ahwaz Jondishapour University of Medical Sciences, Ahwaz گروه میکروب شناسی و مرکز تحقیقات بیماریهای عفونی و گرمسیری دانشگاه، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی جندی شاپور اهواز