fa فناوری PCR برای شناسائی ژن‌های vanAو vanB در حاملین روده‌ای انتروکوک مقاوم به ونکومایسین در سه بیمارستان آموزشی دانشگاه علوم پزشکی تبریز عفونت های بیمارستانی Nosocomial infections مقاله پژوهشی Original Research Article <b>زمینه و اهداف: </b>انتروکوک به‌صورت فزاینده‌ عامل عفونت‌های شدید بیمارستانی است. مقاومت به آنتی بیوتیک‌ها، به‌ویژه ونکومایسین، آمپی سیلین و غلظت‌های زیاد آمینوگلیکوزیدها در آن شایع است. شناسائی سریع و درست انتروکوک مقاوم به ونکومایسین (Vancomycin resistant enterococci : VRE)، در مدیریت و درمان بیماران کلنیزه شده یا دچار عفونت انتروکوکی، بسیار حیاتی است و اجرای برنامه‌های درمانی مناسب برای پیشگیری از انتشارآن را فراهم می‌کند. هدف این مطالعه بکارگیری فناوری PCR، جهت شناسائی ژن‌های vanA و vanB در حاملین روده‌ای انتروکوک مقاوم به ونکومایسین بود. <br><b>روش بررسی:</b> 432 نمونه مدفوع یا رکتال سوآب از بیمارانی که حداقل 72 ساعت در بخش‌های پرخطر ( ICU، هماتولوژی/انکولوژی، عفونی و سوختگی) در سه بیمارستان آموزشی درمانی تبریز (سینا، کودکان و شهید قاضی طباطبائی) بستری بودند و همچنین بیماران سرپائی (مراجعه کننده به درمانگاه انکولوژی، درمانگاه عفونی و بخش همودیالیز) جمع آوری شد (87-1386). نمونه‌ها در محیط‌های اختصاصی کشت داده شد و سویه‌های انتروکوک جداسازی گردید. تعیین حداقل غلظت مهارکنندگی (MIC) ونکومایسین ، با روش Agar dilution انجام شد و سویه‌های مقاوم با E-test تایید گردید. فناوری PCR جهت شناسائی ژن‌های vanA/vanB ، اجراء شد. <br> <b>یافته‌ها:</b> از 432 نمونه 291 (3/67%) سویه انتروکوک ایزوله شد. 189 سویه (9/64%) انتروکوکوس فکالیس و 86 سویه (5/29%) انتروکوکوس فسیوم تعیین هویت شدند. تعیین MIC ، مقاومت کامل به ونکومایسین را در 15 (1/5%) سویه اثبات کرد که همگی انتروکوکوس فسیوم بودند. فناوری PCR ، حضور ژن‌های vanA یا vanB با مقاومت حد واسط (MICs, 8-16 μg/ml) یا مقاومت سطح بالا≥ 256 μg/ml) (MICs, به ونکومایسین را در 54 (5/18% ) سویه نشان داد. در مجموع 42 (6/66%) سویه‌ مقاوم، <i>انتروکوکوس فسیوم</i> و 15 ( 8/23% ) سویه <i>انتروکوکوس فکالیس</i> بودند. 54 (7/85%) سویه مقاوم به ونکومایسین از بیماران بستری و 9 (2/14%) سویه ازبیماران سرپائی بدست آمد. <br> <b>نتیجه گیری:</b> مقاومت کامل به ونکومایسین در <i>انتروکوکوس فسیوم</i> و در بیماران بستری یافت شد. مقاومت متوسط یا سطح بالای انتروکوک به ونکومایسین در بیماران بستری و سرپائی وجود دارد. فراوانی ژن vanB بیشتر از vanA است. <b>Background and Objectives:</b> Enterococci are increasingly the causative agents of nosocomial infections. Resistance to antibiotics, especially to vancomycin, ampicillin and high levels of aminoglycosides, is typical in these isolates. Rapid and accurate identification of vancomycin-resistant enterococci (VRE) is crucial in the management and treatment of infected patients, which allows for selection of appropriate treatment programs to prevent the spread of VRE. Using a PCR assay for detection of <i>vanA</i> and <i>vanB</i> genes in VRE isolated from intestinal carriers was the aim of this study. <br><b>Materials and Methods:</b> A total of 432 rectal swabs or stool specimens were collected from patients hospitalized at high risk wards (ICU, Hematology/Oncology, Infectious and Burn) with a hospital stay of longer than 72 hours or attending out-patient clinics (Hematology/Oncology and Infectious clinics and Hemodialysis) of three university teaching hospitals in Tabriz (sina, children and Shahid Ghazi Tabatabaee hospitals). Specimens were inoculated into specific media and enterococci species were isolated. Determination of minimum inhibitory concentration (MIC) of vancomycin was performed by agar dilution and confirmed by E-test for resistant species. PCR assay was carried out for detection of <i>vanA/vanB</i> genes. <br><b>Results:</b> From the 432 stool specimens, 291(67.3%) enterococci species were isolated. 189 (64.9%) were identified as Enterococcus feacalis and 86 (29.5%) as <i>Enterococcus feacium</i>. MIC determination confirmed resistance to vancomycin in 15 (5.1%) strains and all of them were <i>E. faecium</i>. PCR confirmed vanA or vanB genes with moderate (MICs, 8-16 µg/ml) or high level (MICs, ≥256 µg/ml) resistance to vancomycin in 54 (18.5%) of enterococcal species. Finally, 42 (66.6%) of the resistant isolates were <i>E. faecium</i> and 15 (23.8%) were identified to be <i>E. faecalis</i>. Additionally, 54 (85.7%) of the resistant species were isolated from in-patients and 9 (14.2%) from out-patients. <br><b>Conclusion:</b> Moderate to high resistance of enterococcal isolates against vancomycin among in-patients and out-patients is a medical concern proposing improvement in treatment policies. انتروکوک، ونکومایسین، کلنیزاسیون، vanA، vanB Enterococci, Vancomycin, Colonization, vanA, vanB 58 65 http://ijmm.ir/browse.php?a_code=A-10-1-36&slc_lang=fa&sid=1 Abolfazl Vahhabi ابوالفضل وهابی a.vahhabi@yahoo.com 1003194753284600183 1003194753284600183 Yes Department of Clinical Bacteriology and Virology, Tabriz University of Medical Sciences, Iran گروه باکتری شناسی و ویروس شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تبریز Alka Hasani آلکا حسنی 1003194753284600184 1003194753284600184 No Department of Clinical Bacteriology and Viro logy, Research Center of Infectious Diseases and Tropical Medicine, Tabriz University of Medical Sciences, Iran گروه باکتری شناسی و ویروس شناسی، مرکز بیماری‌های عفونی و طب گرمسیری، دانشگاه علوم پزشکی تبریز Mohammadreza Nahaei محمدرضا نهائی 1003194753284600185 1003194753284600185 No Department of Clinical Bacteriology and Virology, Tabriz University of Medical Sciences, Iran گروه باکتری شناسی و ویروس شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تبریز ُSafar Frajnia صفر فرج نیا 1003194753284600186 1003194753284600186 No Applied and Drug Research Center, Tabriz University of Medical Sciences, Iran مرکز تحقیقات کاربردی و داروئی، دانشگاه علوم پزشکی تبریز