fa بررسی فراوانی ژن‌های exoY،exoS ، exoT و exoU از سودوموناس آئروژینوزا جداشده از بیماران بیمارستان‌های تهران با روش Multiplex-PCR میکروب شناسی مولکولی Molecular Microbiology مقاله پژوهشی Original Research Article <p dir="RTL"><strong>زمینه و اهداف:</strong> <em>سودوموناس آئروژینوزا</em> یک پاتوژن گرم منفی است که باعث انواع عفونت‌های جدی عمدتاً در بیماران نقص ایمنی می‌شود. جهت افزایش شدت بیماری<em>، سودوموناس</em> از یک نوع سیستم ترشحی نوع سه برای تزریق پروتئین افکتور سمی به سیتوپلاسم سلول‌های یوکاریوتی استفاده می‌کند. چهار پروتئین افکتور در <em>سودوموناس</em> شرح داده‌شده است: <span dir="LTR">ExoU</span>، <span dir="LTR">ExoS</span>،<span dir="LTR">ExoT</span> و <span dir="LTR">ExoY</span>. هدف از این مطالعه بررسی شیوع ژن‌های کد کننده توکسین سیستم ترشحی نوع سه میان جدایه‌های <em>سودوموناس</em> جمع‌آوری‌شده از نمونه‌های بالینی مختلف مانند ادرار، زخم، خون و ترشحات تنفسی بیماران بود.</p> <p dir="RTL"><strong>مواد و روش کار: </strong>55 جدایه <em>سودوموناس آئروژینوزا</em> از بیماران بستری در تهران در سال 1395-1394 با استفاده از آزمون میکروبیولوژی متداول مشخص شدند. حساسیت جدایه‌ها به آنتی‌بیوتیک‌ها با استفاده از آزمون دیسک دیفیوژن بررسی شد. پس از استخراج <span dir="LTR">DNA</span>، <span dir="LTR">PCR</span> چندگانه در جدایه های <em>سودوموناس</em> برای تشخیص ژن‌های کد کننده توکسین ترشحی انجام شد.</p> <p dir="RTL"><strong>یافته‌ها: </strong>میزان مقاومت بالا برای سفپیم (89%)، سفتازیدیم (85/45%)، آزترونام (83/63%)، توبرامایسین (78/18%) و جنتامایسین (60%) مشاهده شد. شیوع ژن‌ها در میان تمام نمونه‌های جداشده به شرح زیر بود؛ (76/32%)<em><span dir="LTR">exoT</span></em>، (30/90%)<em><span dir="LTR">exoS</span></em>، (14/54%) <em><span dir="LTR">exoY</span></em>و (67/27%)<em><span dir="LTR">exoU</span></em>. <em><span dir="LTR">exoU</span></em> در میان گونه‌های <em><span dir="LTR">MDR</span></em> نسبت به بخش غیر <em><span dir="LTR">MDR</span></em> بالاتر (81/3% در مقابل 16/6%) بود. جدایه‌های ⁺<em><span dir="LTR">exoU</span></em> مقاوم به فلوروکینولون نسبت به نمونه‌های ⁺<em><span dir="LTR">exoS</span></em> مقاوم به فلوروکینولون (32% در مقابل 17%) بود.</p> <p><strong><span dir="RTL">نتیجه‌گیری</span>:</strong> <span dir="RTL">ژن‌های کد کننده سیستم ترشحی نوع سه موجود در جدایه‌های <em>سودوموناس</em>، که در آن ژن‌های </span>&nbsp;<em>exoT</em><span dir="RTL">،</span><em>exoU</em><span dir="RTL"> و </span><em>exoS</em><span dir="RTL"> در اغلب جدایه‌ها</span> <span dir="RTL">شناسایی شد درحالی‌که ژن</span> <em>exoY</em> <span dir="RTL">در تعداد کمی از سویه‌ها تشخیص داده شد.</span></p> <p><strong>Background and Aim: </strong><em>Pseudomonas aeruginosa </em>is a gram-negative pathogen that causes a variety of serious infections predominantly in immunocompromised patients. To promote severe illness, <em>P</em>. <em>aeruginosa</em> uses a type III secretion system to inject toxic effector proteins into the cytoplasm of eukaryotic cells. Four effector proteins have been described in <em>P</em>. <em>aeruginosa</em>: ExoU, ExoS, ExoT, and ExoY. The aim of the study was to determine the prevalence of the type III secretion system toxins-encoding genes among <em>P. aeruginosa </em>isolates collected from different clinical specimens such as urine, wound, blood and respiratory secretions from patients.</p> <p><strong>Materials and Methods: </strong>55 <em>Pseudomonas aeruginosa</em> isolates were identified from hospitalized patients in Tehran during 2015 &ndash; 2016, using conventional microbiological tests. The susceptibility of isolates to antibiotics were assessed using disk diffusion test. After DNA extraction, Multiplex PCR was performed on the <em>P. aeruginosa</em> isolates to detect the secretion toxins-encoding genes.</p> <p><strong>Results: </strong>High resistance rates were seen for cefipime (89%), ceftazidime (85.45%), aztreonam (83.63%), tobramycin (78.18%) and gentamicin (60%). The prevalence of the genes among all isolates was as follows; <em>exoT</em> (76.32%), <em>exoS</em> (30.90%), <em>exoY</em> (14.54%) and <em>exoU</em> (67.27%). <em>exoU</em> was more prevalent among MDR than in non-MDR strains (81.3% versus16.6%). <em>exoU</em>⁺ isolates were more likely to be fluoroquinolone-resistant than <em>exoS</em>⁺ isolates (32% versus 17%).</p> <p><strong>Conclusions: </strong>Type III secretion system toxins-encoding genes found in isolated <em>P.aeruginosa</em>, in which <em>exoT, exoU</em> and <em>exoS</em> gene detected in most isolates while <em>exoY</em> gene was detected in minaroty of the isolates<strong><span dir="RTL">.</span></strong></p> <p></p> سودوموناس آئروژینوزا, سیستم ترشحی نوع سه, PCR چندگانه Pseudomonas aeruginosa, Type III secretion system, Multiplex PCR 9 17 http://ijmm.ir/browse.php?a_code=A-10-573-3&slc_lang=fa&sid=1 Maryam Mahdavi مریم مهدوی Dr_kumarss_amini@yahoo.com 10031947532846008477 10031947532846008477 No Department of Microbiology, Faculty of Basic Science, Saveh Branch, Islamic Azad University, Saveh, Iran گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه آزاد اسلامی واحد ساوه، ساوه، ایران Taghi Zahraei Salehi تقی زهرایی صالحی tsalehi@ut.ac.ir 10031947532846008478 10031947532846008478 Yes Department of Microbiology, Faculty of Veterinary medicine, Tehran University, Tehran, Iran گروه میکروبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه تهران، تهران، ایران Kumarss Amini کیومرث امینی 10031947532846008479 10031947532846008479 No Department of Microbiology, Faculty of Basic Science, Saveh Branch, Islamic Azad University, Saveh, Iran گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه آزاد اسلامی واحد ساوه، ساوه، ایران Parisa Mobasseri پریسا مبصری p.mobasseri2011@gmail.com 10031947532846008480 10031947532846008480 No Department of Microbiology, Faculty of Biology sciences, Tehran North Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد تهران شمال، تهران، ایران