fa بررسی مولکولی PBP2b در ایزوله های بالینی استرپتوکوکوس پنمونیه میکروب شناسی مولکولی Molecular Microbiology مقاله پژوهشی Original Research Article <b>زمینه و هدف:</b><i> استرپتوکوکوس پنمونیه</i> از مهم ترین عوامل ایجاد کننده پنمونی، مننژیت، سینوزیت و اوتیت میانی است. مقاومت این باکتری به بتالاکتام وابسته به تغییر در پروتئین های متصل شونده به پنی سیلین (Penicillin binding protein PBP) است. هدف از این مطالعه تعیین میزان شیوع مقاومت به آنتی بیوتیک های رایج در درمان عفونت های پنوموکوکی در ایزوله های جمع آوری شده از بیماران در تهران و تغییرات صورت گرفته در PBP2b بود. <br><b>روش بررسی:</b> 54 ایزوله ی بالینی <i>استرپتوکوکوس پنمونیه</i> ( از 1379 الی 1387) از مراکز درمانی مختلف در تهران از جمله بیمارستان های امام خمینی، حضرت رسول اکرم ص، سینا، شهدای تجریش، حضرت علی اصغر، مرکز طبی کودکان و آزمایشگاه بهار، جمع آوری شد و با آزمایش بیوشیمیایی تعیین هویت گردید. تست حساسیت به سفوتاکسیم، اریترومایسین، تتراسایکلین، آمپی سیلین، ونکومایسین و تری-متوپریم سولفومتوکسازول به روش انتشار از دیسک انجام گرفت. MIC برای پنی سیلین به روش broth microdilution تعیین شد. ژن <i>pbp2b</i> از طریق PCR تکثیر و تعیین توالی گردید <br><b>یافته ها: </b>از 54 ایزوله، 24 ایزوله ( 44.4 %) مقاومت حدواسط به پنی سیلین و 14 ایزوله ( 25.9 %) مقاوم به پنی سیلین بودند. 2 ایزوله ( 3.7 %) به سفوتاکسین، 9 ایزوله ( 16.6 %) به اریترومایسین، 10 ایزوله ( 18.51 %) به تتراسایکلین 28 ایزوله ( 51.9 %) به تری متوپریم سولفامتوسازول مقاوم بودند. 9 ایزوله ( 16.6 %) مقاومت چندگانه داشتند. تمام ایزوله های مقاوم به پنی سلین و اغلب ایزوله ها با مقاومت جد واسط دارای موتاسیون در نواحی کاتالیتیکی <i>pbp2b</i> بودند.<br> <b>نتیجه گیری:</b> نتایج بیانگر شیوع سویه های <i>استرپتوکوکوس پنمونیه</i> مقاوم به پنی سیلین است. سویه های دارای مقاومت چندگانه، نشان دهنده بحران در درمان عفونت های پنموککی است. تغییرات در توالی اسید آمینه pbp2b عمدتاَ با کاهش حساسیت به پنی سیلین همخوانی نشان داد. نتایج نشان می دهد که حساسیت یا مقاومت این باکتری به پنی سیلین می تواند با تعیین تغییرات صورت گرفته در ژن pbp2b ارزیابی شود. <b>Background and Objectives:</b> <i>Streptococcus pneumoniae</i> remains one of the most important bacterial pathogens associated with pneumonia, meningitis, sinusitis, and otitis media. β-Lactam resistance in clinical pneumococci is mediated by altered PBPs, specifically <i>PBP2b</i>. The purpose of this study was to determine the rates of penicillin and other antibiotics resistance in clinical strains of <i>Streptococcus pneumoniae</i> which were isolated from patients in Tehran and to analyze possible mutations in <i>pbp2b</i>. <br><b>Material and Methods:</b> A total of 54 <i>S. pneumoniae</i> strains were isolated from a number of different clinical centers in Tehran (2000-2008) which included Imam Khomeini hospital, Hazrat Rasoul hospital, Sina hospital, Shohada Tajrish hospital, Ali Asger hospital, Children Health Center, and Bahar pathobiology laboratory. After biochemical testing of all the 54 S. pneumoniae isolates, susceptibility testings were done by disc diffusion method for oxacillin, erythromycin, cefotaxime, trimethoprim /sulfamethoxazole, ampicillin, vancomycin and tetracycline. MIC values were determined by broth microdilution method for penicillin. Pbp2b gene was amplified by PCR and sequenced. <br><b>Results:</b> From all the 54 isolates, 44.4% (24 isolates) were penicillin intermediate, 25.9% (14 isolates) were penicillin resistant, 51.9% (28 isolates) were ‎ trimethoprim /sulfamethoxazole resistant, 16.6% (9 isolates) were erythromycin resistant, 3.7% (2 isolates) were ‎cefotaxime resistant, and 18.51% (10 isolates) were tetracycline resistantَ. All of the penicillin resistant and most of the intermediate isolates carried mutations in the catalytic region of the in <i>pbp2b</i> gene. <br><b>Conclusion: </b>Our results showed that penicillin resistance in <i>Streptococcus pneumoniae</i> is widespread. However, the prevalence of multiple resistant strains revealed a crisis in treatment of pneumococcal infections. Our investigation demonstrates that alterations in PBP2b tended to parallel with reduced susceptibility to penicillin. We have shown that susceptibility of <i>Streptococcus pneumoniae</i> to β-Lactam antibiotics can generally be estimated by determining alterations in <i>pbp2b</i> gene. استرپتوکوکوس پنمونیه، مقاومت به پنی سیلین، مقاومت چندگانه، PBP2b Streptococcus pneumoniae, penicillin resistance, multiresistance, PBP2b 9 16 http://ijmm.ir/browse.php?a_code=A-10-1-30&slc_lang=fa&sid=1 Mahvash Oskoui مهوش اسکوئی oskoui1@yahoo.com 1003194753284600155 1003194753284600155 Yes Department of Microbiology, Pasteur Institute of Iran یخش میکروب شناسی، انستیتو پاستور ایران Saman Nobari سامان نوبری 1003194753284600156 1003194753284600156 No Department of Microbiology, Pasteur Institute of Iran یخش میکروب شناسی، انستیتو پاستور ایران Fatemeh Rahmati Ghezelgeh فاطمه نوبری 1003194753284600157 1003194753284600157 No Department of Microbiology, Pasteur Institute of Iran یخش میکروب شناسی، انستیتو پاستور ایران Bahareh Shaghaghi بهاره شقاقی 1003194753284600158 1003194753284600158 No Department of Microbiology, Pasteur Institute of Iran یخش میکروب شناسی، انستیتو پاستور ایران Noor Amirmozafari نور امیرمظفری 1003194753284600159 1003194753284600159 No Department of Microbiology, School of Medicine, Tehran University of Medical Sciences گروه میکروب شناسی، دانشگاه علوم پزشکی ایران