fa شناسایی مولکولی باکتری پروبیوتیک کشته شده با حرارت و بررسی آپوپتوز القا شده توسط باکتری بر رده سلول HT-29 سرطان کلون میکروب شناسی مولکولی Molecular Microbiology مقاله پژوهشی Original Research Article <p dir="RTL"><strong>زمینه و هدف</strong>: با توجه به شیوع بالایی سرطان کلون در جوامع انسانی و از جمله ایران، هدف این مطالعه شناسایی مولکولی و بررسی اثر سایتوتاکسیک باکتری پروبیوتیک کشته شده توسط حرارت و القا آپوپتوز بر رده سلولی <span dir="LTR">HT-29</span> سرطان کلون و مقایسه آن با رده سلولی نرمال می‌باشد.</p> <p dir="RTL"><strong>مواد و روش ها:</strong> شناسایی مولکولی باکتری بومی جدا شده از دوغ ترخینه (<span dir="LTR">TD4</span>) انجام شد. دو رده سلولی <span dir="LTR">HT-29</span> و <span dir="LTR">HEK-293</span> تحت تاثیررقت‌های 00/01، 0/1، 1، 10، 100 و 1000میکروگرم بر میلی‌لیتر از باکتری کشته شده با حرارت، در 3 زمان 24،48،72 ساعت قرار گرفتند. درصد زیستایی سلول‌ها توسط آزمون <span dir="LTR">MTT</span> سنجیده شد. آزمون قطعه قطعه شدن <span dir="LTR">DNA</span> در غلظت <span dir="LTR">IC50</span> از باکتری کشته شده با حرارت انجام شد.</p> <p dir="RTL"><strong>یافته‌ها:</strong> باکتری <span dir="LTR">TD4</span> به عنوان <em>لاکتوباسیلوس برویس</em> در بانک ژنی ثبت گردید. <em>لاکتوباسیلوس برویس</em> (<span dir="LTR">TD4</span>) در الگوی وابسته به زمان و دوز، بقا و تکثیر سلول‌های سرطانی کلون رده <span dir="LTR">HT-29</span> را کاهش داد که بیشترین اثر سایتوتوکسیتی مربوط به رقت 1000 میکروگرم بر میلی لیتر در زمان 72 ساعت بود. درصد زیستایی در دوز و زمان فوق الذکر، در سلول‌های <span dir="LTR">HT-29</span> و <span dir="LTR">HEK-293</span>، به ترتیب 23% و 50% برآورد شد. آزمون قطعه قطعه شدن <span dir="LTR">DNA</span> هم، القا آپوپتوز توسط باکتری کشته شده با حرارت را تأیید کرد.</p> <p dir="RTL"><strong>نتیجه‌گیری:</strong> <em>لاکتوباسیلوس برویس</em>، اثر سایتوتوکسیک و القا آپوپتوز بر روی رده سلولی <span dir="LTR">HT-29</span> نشان داد و اثر سایتوتوکسیک کمتری در رده سلولی <span dir="LTR">HEK- 293</span> نسبت به رده <span dir="LTR">HT-29</span> مشاهده شد. بطوریکه با انجام مطالعات بیشتر می‌توان از این باکتری‌ها به عنوان یک محصول بیولوژیک ضد سرطانی در درمان و پیشگیری بهره جست.</p> <p><strong>Background and Aim: </strong>Due to the high prevalence of colon cancer in human societies such as Iran, the aim of this study is the molecular identification and assesses cytotoxic effects of heat-killed probiotic bacteria and induced apoptosis in HT-29 cell lines of colon cancer compared with normal cells.</p> <p><strong>Materials and Methods: </strong>Molecular detection was performed on local probiotic bacteria isolated (TD4) from Tarkhineh dough. Both cell lines HT-29 colon cancer and HEK-293 were affected by 0.01, 0.1, 1, 10, 100, and 1000 &micro;g/ml of heat-killed TD4 isolate for periods of 24, 48, and 72 hours. Cell viability was measured using MTT assay. DNA fragmentation assay was performed after 48 and 72 hours base on the IC50 concentration of heat-killed bacteria.</p> <p><strong>Results: </strong>TD4 isolate was submitteded <em>lactobacillus berevis</em> in GenBank. According to MTT assay, <em>lactobacillus berevis </em>depended on time and dose reduced survival and proliferation of colon cancer of HT-29 cell line, with the highest cytotoxic effect in 1000 &micro;g/ml for 72 hours. At this dose and time, viability was 23% and 50% in HT-29 and HEK-239 cell lines, respectively. DNA fragmentation assay showed apoptosis induction by heat-killed bacteria in the HT-29 cell line.</p> <p><strong>Conclusions: </strong><em>L.berevis</em> showed cytotoxic effects and induced apoptosis on HT-29 colon cancer cell line while the cytotoxic effect was slight on HEK-239 compared to HT-29. Future studies are still required to confirm these bacteria as a biological anti-cancer product in treatment and prevention.</p> پروبیوتیک, لاکتوباسیلوس برویس, سرطان کولون, آپوپتوز, رده سلولی HT-29 Probiotic, Lactobacillus brevis, colon cancer, apoptosis, HT-29 cell line 42 52 http://ijmm.ir/browse.php?a_code=A-10-645-2&slc_lang=fa&sid=1 Sepideh Karimi Ardestani سپیده کریمی اردستانی sepidehkarimi1347@gmail.com 10031947532846008229 10031947532846008229 No Department of Biology, Parand Branch, Islamic Azad University, parand, Iran گروه زیست شناسی، واحد پرند، دانشگاه آزاد اسلامی، پرند، ایران Farzaneh Tafvizi فرزانه تفویضی farzanehtafvizi54@gmail.com 10031947532846008230 10031947532846008230 Yes Department of Biology, Parand Branch, Islamic Azad University, parand, Iran گروه زیست شناسی، واحد پرند، دانشگاه آزاد اسلامی، پرند، ایران Maryam Tajabadi Ebrahimi مریم تاج آبادی ابراهیمی ebrahimi_mt@yahoo.com 10031947532846008231 10031947532846008231 No Department of Biology, Central Tehran Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran گروه زیست شناسی، واحد تهران مرکزی، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران