fa مقاومت به فلورکینولون ها و موتاسیون ژن gyrA در جدایه های بالینی کلبسیلا پنومونیه میکروب شناسی مولکولی Molecular Microbiology مقاله پژوهشی Original Research Article <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><strong>زمینه و اهداف:</strong> مقاومت باکتری‌های گرم منفی به فلورکینولون ها اغلب درنتیجه موتاسیون کروموزومی و جابجایی اسیدهای آمینه خاصی در ژن‌های <em><span dir="LTR">gyr</span></em> و <em><span dir="LTR">par</span></em> می‌باشد. در مطالعه حاضر مقاومت <em>کلبسیلا پنومونیه</em> های جداشده از عفونت ادراری به آنتی‌بیوتیک‌های فلورکینولونی و موتاسیون های ژن <em><span dir="LTR">gyrA</span></em> در جدایه های مقاوم به سیپروفلوکساسین بررسی گردید.</p> <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><strong>مواد و روش کار: </strong>در سال 1393، مقاومت 46 جدایه <em>کلبسیلا پنومونیه</em> به فلورکینولون با روش انتشار از دیسک و <span dir="LTR">MIC</span> سیپروفلوکساسین، به روش براث ماکرودایلوشن تعیین گردید. موتاسیون در ناحیه تعیین‌کننده مقاومت به کینولون ها در ژن <em><span dir="LTR">gyrA</span></em> <em>کلبسیلا پنومونیه</em> های مقاوم، از طریق تکثیر این ژن در واکنش <span dir="LTR">PCR</span> و بررسی توالی نوکلئوتیدی محصول بررسی گردید.</p> <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><strong>یافته‌ها: </strong>از 46 جدایه مورد بررسی، تعداد 10 جدایه (21/7%) مقاوم به فلورکینولون ها بودند. میزان <em><span dir="LTR">MIC</span></em> سیپروفلوکساسین در این جدایه ها از 64 تا 2048 میکروگرم بر میلی‌لیتر متغیر بود. در 8 جدایه از 10 جدایه مقاوم، موتاسیون منجر به جابجایی اسیدهای آمینه مشاهده گردید. در 6 جدایه در کدون شماره 87 موتاسیون منجر به‌جایگزینی آلانین و آسپارژین به‌جای آسپارتیک اسید گردید. همچنین در یک مورد در کدون شماره 83 جایگزینی سرین به ایزولوسین مشاهده گردید.</p> <p dir="RTL" style="text-align: justify;"><strong>نتیجه‌گیری</strong>: نتایج به‌دست‌آمده نشان می‌دهد جهش در ژن <em><span dir="LTR">gyrA</span></em> یکی از مهم‌ترین مکانیسم‌های مقاومت به سیپروفلوکساسین در جدایه های بالینی <em>کلبسیلا پنومونیه</em> در رشت می‌باشد.</p> <p style="text-align: justify;"><strong>Background and Aim: </strong>Fluoroquinolone resistance has been mainly associated with mutation in <em>gyr</em> and <em>par</em> genes bacteria and specific amino acids alteration in gram negative bacteria. In the present study, urinary tract infection isolates of <em>Klebsiella pneumonia</em> were investigated for fluoroquinolone resistance and mutation patterns of <em>gyrA</em> gene in ciprofloxacin resistant isolates.</p> <p style="text-align: justify;"><strong>Materials and Methods: </strong>In 2014, Susceptibility to fluoroquinolones in 46 isolates of<br> <em>K. pneumoniae</em> was tested by the disc diffusion method whereas broth macrodilution method was used to investigate ciprofloxacin minimum inhibitory concentration. Mutations in the quinolone resistance-determining regions (QRDR) was investigated in chromosomal <em>gyrA</em> gene in quinolone-resistant <em>K. pnemoniae</em> isolates, by PCR amplification of <em>gyrA</em> gene and sequencing.</p> <p style="text-align: justify;"><strong>Results: </strong>Out of 46 tested bacteria, ten (21.7%) isolates recognized as fluoroquinolones resistant. Minimum inhibitory concentration of ciprofloxacin for resistant isolates ranged between 64 to 2048 &micro;g/mL. In <em>gyrA </em>gene sequence analyses, 8 (80%) isolates had an amino acid substitution. In six isolates mutation occurred in Asp87 that amino acid alters with Alanine and asparagine. Also Ser83Ile substitution was found in one isolate.</p> <p style="text-align: justify;"><strong>Conclusions: </strong>The obtained results demonstrated that <em>gyrA </em>mutation is one of the most important mechanisms of resistance to ciprofloxacin in clinical isolates of <em>K. pneumonia</em> in Rasht.</p> کلبسیلا پنومونیه, مقاومت به فلورکینولون, ژن gyrA Klebsiella pnemoniae, Fluoroquinolone resistance, gyrA 31 37 http://ijmm.ir/browse.php?a_code=A-10-621-1&slc_lang=fa&sid=1 Zahra MohammadAlipour زهرا محمدعلیپور mohammadalipour@yahoo.com 10031947532846008327 10031947532846008327 No Department of Microbiology, Faculty of Science, Islamic Azad University of Rasht, Rasht, Iran گروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد رشت، رشت، ایران Leila Asadpour لیلا اسدپور Asadpour@iaurasht.ac.ir 10031947532846008328 10031947532846008328 Yes Department of Microbiology, Faculty of Science, Islamic Azad University of Rasht, Rasht, Iran گروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد رشت، رشت، ایران Najmeh Ranji نجمه رنجی najmeranji@yahoo.com 10031947532846008329 10031947532846008329 No Department of Genetic, Faculty of Science, Islamic Azad University of Rasht, Rasht, Iran گروه ژنتیک، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد رشت، رشت، ایران