fa شناسایی و خالص‌سازی همولیزین گروهی از باسیلوس‌ها به روش زایموگرافی بیوتکنولوژی میکروبی Microbial Biotechnology مقاله پژوهشی Original Research Article <p style="text-align: justify"><strong>زمینه و اهداف:</strong> همولیزین یک پروتئین خارج سلولی است که توسط بسیاری از باکتری های بیماری<span dir="LTR">­</span>زا و غیر بیماری زا ترشح می شود. سطح فعالیت همولیزین غشای پلاسمایی گلبول های قرمز خون می باشد. در این مطالعه استخراج همولیزین از سویه های باسیلوس تولید کننده آن، تعیین وزن مولکولی و بررسی خصوصیات عملکردی این آنزیم مورد بررسی قرار گرفته شده است.</p> <p style="text-align: justify"><strong>مواد و روش کار: </strong>باسیلوس­های تولیدکننده­ی همولیزین شناسایی شدند، سپس قویترین سویه تولید کننده جداسازی گردید و همولیزین تولیدی توسط این باکتری استخراج شد<span dir="LTR">.</span> با استفاده از روش زایموگرافی اثر لیز این سم بر محیط بلاد آگار مشخص شد. در نهایت با استفاده از روش <span dir="LTR">SDS-PAGE</span> وزن مولکولی آن تعیین گردید. در این مطالعه روش جدیدی برای خالص­سازی و بررسی خاصیت همولیزین به کارگرفته شده­است.</p> <p style="text-align: justify"><strong>یافته‌ها: </strong>از میان 8 سویه مطالعه شده، سویه <em><span dir="LTR">M3</span></em> با شماره دسترسی <em><span dir="LTR">KC577596.1</span></em>  بهترین و قوی­ترین سویه تجزیه کننده­ی خون در محیط آگار خون­دار بود. همولیزین تولیدی توسط این باکتری استخراج  شد و خصوصیات لیز کنندگی آن بررسی گردید روش <em><span dir="LTR">SDS-PAGE</span></em> نشان داد این سویه قادر به تولید دو همولیزین با وزن مولکولی 13 و 23 کیلو دالتون می­باشد.</p> <p style="text-align: justify"><strong>نتیجه‌گیری</strong>: این سویه اولین بار در آزمایشگاه­های میکروبیولوژی دانشگاه اصفهان جداسازی شده است. این باکتری دارای همولیزین قوی با قدرت لیز کنندگی بالایی می­باشد. با توجه به قدرت بالا ی لیز این همولیزین و عدم بیماری­زایی سویه <em><span dir="LTR"> M3</span></em>این پروتئین می­تواند به اهداف گوناگون در زمینه­های صنعتی و درمانی مورد استفاده قرار گیرد.</p> <p dir="ltr" style="text-align: justify"><strong>Background and Aim: </strong>Hemolysin is an extracellular protein which is secreted by many pathogenic and non-pathogenic bacteria. This protein is mostly active on plasma membrane of red blood cells. The objective of this study was to extract hemolysin from <em>bacillus</em> strains producing it, measure the molecular weight, and identify the functional characteristics of this enzyme.</p> <p dir="ltr" style="text-align: justify"><strong>Materials and Methods: </strong>At first, hemolysin-producing <em>bacillus</em> strains were identified and then the strongest one was isolated. The hemolysin produced by this bacterium was extracted using Zymography and the effect of lysing it on blood agar medium was studied. Finally, SDS-PAGE method was used to measure the molecular weight of hemolysin. A new method was applied for purification and analysis of properties of the produced hemolysin.</p> <p dir="ltr" style="text-align: justify"><strong>Results: </strong>Among the 8 studied strains, M3, with the access number of KC577596.1, was the best and strongest strain degrading blood on blood agar medium. The hemolysin produced by this strain was extracted and its lysis properties were studied. SDS-PAGE method showed that this strain of <em>bacillus</em> is able to produce two types of hemolysin with molecular weights of 13 and 23 kDa.</p> <p dir="ltr" style="text-align: justify"><strong>Conclusions: </strong>According to the results, the studied strain, which was firstly isolated at Microbiology laboratories of University of Isfahan, contains a strong type of hemolysin with a high lysis power. Given the high power of lysis of this hemolysin and as M3 strain of <em>bacillus</em> is non-pathogenic, various applications of this protein can be used in industrial and medical sectors.</p> باسیلوس, همولیزین, زایموگرافی Bacillus, Hemolysin, Zymography 63 68 http://ijmm.ir/browse.php?a_code=A-10-347-1&slc_lang=fa&sid=1 Niloofar Sasani نیلوفر ساسانی sasaniniloofar@gmail.com 10031947532846004465 10031947532846004465 No Department of Biotechnology, Faculty of advanced Sciences and Technologies, University of Isfahan, Isfahan, Iran. گروه زیست فناوری، دانشکده علوم و فناوری‌های نوین، دانشگاه اصفهان، اصفهان، ایران Hassan Mohabatkar حسن محبت کار h.mohabatkar@ast.ui.ac.ir 10031947532846004466 10031947532846004466 No Department of Biotechnology, Faculty of advanced Sciences and Technologies, University of Isfahan, Isfahan, Iran. گروه زیست فناوری، دانشکده علوم و فناوری‌های نوین، دانشگاه اصفهان، اصفهان، ایران گیتی امتیازی emtiazi@yahoo.com 10031947532846004467 10031947532846004467 Yes Department of Biology, Faculty of Sciences, University of Isfahan, Isfahan, Iran گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم، دانشگاه اصفهان، اصفهان، ایران.