fa شناسائی و تعیین ژنوتیپ مولکولی مایکوپلاسما ژنیتالیوم با روش PCR- RFLP در زنان مبتلا به عفونت های ژنیتال باکتری شناسی پزشکی Medical Bacteriology مقاله پژوهشی Original Research Article <div align="right" style="direction: rtl"> <b>زمینه و اهداف:</b> به‌دلیل مشکلات زیاد جهت کشت <i>مایکوپلاسما ژنیتالیوم</i>، هیچ روش فنوتیپی برای تیپ بندی آن وجود ندارد. ولی قابل دسترس بودن سکانس ژنوم کامل آن فرصتی برای اهداف تیپ بندی ایجاد کرده است. این مطالعه جهت شناسائی و تعیین ژنوتیپ مولکولی مایکوپلاسما ژنیتالیوم با PCR- RFLP در زنان مبتلا به‌عفونت‌های ژنیتال انجام گرفت.<br><b> روش بررسی:</b> از 210 بیمار مراجعه کننده به‌درمانگاه زنان بیمارستان حضرت رسول(ص) طی سال‌های 88-1387 نمونه سواب از ناحیه ژنیتال (واژن و سرویکس) تهیه شد. نمونه در بافر (PBS) به‌آزمایشگاه ارسال شد. برای انجام PCR- RFLP از یک جفت پرایمر اختصاصی مایکوپلاسما ژنیتالیوم برای تکثیر ناحیه bp465 ژن 16S rRNA استفاده شد. بعد از انجام PCR و سکانس کردن محصول آن، نمونه‌های مثبت تحت اثر آنزیم‌های محدودالاثر ,AluI ,Taq I, CacI8, BbsI EcoRI قرار گرفتند. در نهایت ژنوتیپ <i>مایکوپلاسما ژنیتالیوم</i> مشخص گردید. <br> <b>یافته‌ها:</b> از 210 نمونه ژنیتال، 11 نمونه (2/5%) به‌روش PCR حاوی <i>مایکوپلاسما ژنیتالیوم</i> بود. نتایج PCR- RFLP نشان داد که همگی از یک ژنوتیپ بودند و سکانس تمام آنها با سکانس ژنوم سویه G37 <i>مایکوپلاسما ژنیتالیوم</i> یکسان بود. از بین آنزیم‌های فوق تنها آنزیم محدودالاثر CacI8 توانایی تایپینگ و شناسائی <i>مایکوپلاسما ژنیتالیوم </i>را داشت.<br> <b>نتیجه‌گیری:</b> مطالعه حاضر نشان داد که <i>مایکوپلاسما ژنیتالیوم</i> از نمونه ژنیتال جدا می‌شود. تمام ایزوله‌ها یکسان هستند و در الگوهای آنزیمی آنها تفاوتی مشاهده نشد. لذا، در بین آنها هتروژنسیتی ژنتیکی وجود ندارد و عفونت در افراد مختلف می‌تواند ناشی از انتشار یک سویه منحصر بفرد باشد. </div> <b>Background and Objectives:</b> <i>Mycoplasma genitalium</i> is extremely difficult to be isolated from clinical specimens thus, it may not be possible to type them on the base on phenotype techniques. However, the availability of complete genome sequence of bacteria has offered an opportunity to approach these goals. The aim of this study was molecular identification and genotyping of Mycoplasma using PCR-RFLP in women with genital infections. <br><b><i>Materials & Methods:</i></b> Genital swabs were taken from 210 patients, who referred to gynecology clinic of Rasool hospital between years 2007 and 2008. Samples were transported to laboratory in PBS buffer. The PCR assays were performed, using a genus specific primer pair and amplified a 465 bp fragment of 16S rRNA. Samples containing bands were subjected to digestion with restriction enzymes (AluI,Taq I, CacI8, BbsI, EcoRI). <br><b>Results:</b> Of the 210 genital swabs tested, 11 samples (5.2%) showed positive reactions in PCR for <i>M. genitalium</i>, that all showed the same genotype and sequence as strain <i>Mycoplasma genitalium</i> G37. It was also understood that only the restriction enzyme CacI8 can cut M. genitalium genome and so it can be used as a marker to identify and type the organism. <br><b>Conclusion:</b> This study showed that <i>M. genitalium</i> can be isolated from genital tracts. It also suggested that there is no heterogeneity between the isolates as genomic enzyme patterns of isolates were the same. This probably means that all infections in individuals were originated from the same ancestor. مایکوپلاسما ژنیتالیوم، ژنوتایپینگ، PCR-RFLP Mycoplasma genitalium, genotyping, PCR-RFLP 14 20 http://ijmm.ir/browse.php?a_code=A-10-1-11&slc_lang=fa&sid=1 Reza Mirnejad رضا میرنژاد 1003194753284600611 1003194753284600611 Yes Molecular Biology Research Center, Baqiyatallah(a.s.) University of Medical Sciences, Tehran, Iran. مرکز تحقیقات بیولوژی مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله(عج) Noor Amirmozafari نور امیرمظفری 1003194753284600612 1003194753284600612 No Department of Microbiology, School of Medicine, Iran University of Medical Sciences, Tehran, Iran. گروه میکرب شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی تهران Bahram Kazemi بهرام کاظمی 1003194753284600613 1003194753284600613 No Cell and Molecular Biology Research Center, Shahid Beheshti University of Medical Science, Tehran, Iran. مرکز تحقیقات سلولی و مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی