fa جداسازی و شناسایی آسپرژیلوس فومیگاتوس در نمونه‌های لاواژ برونکوآلوئولار (BAL) مشکوک به سل به روش Nested-PCR قارچ شناسی پزشکی Medical Mycology مقاله پژوهشی Original Research Article <div align="right" style="direction: rtl"> <b>زمینه و اهداف:</b> <i>آسپرژیلوس فومیگاتوس</i> عامل بیش از 90% آسپرژیلوزیس مهاجم حاد ریوی است. هدف از مطالعه حاضر شناسایی و ردیابی <i>آسپرژیلوس فومیگاتوس </i>در نمونه‌های لاواژ برونکوآلوئولار (BAL) مشکوک به سل به روش Nested-PCR است. <br><b>مواد و روش کار:</b> در این بررسی، در طی 9 ماه در طول سال های 92-91 تعداد 100 نمونه BAL از بیماران بستری و مراجعه کننده به بیمارستان آموزشی در شمال تهران جمع آوری گردید، آزمایش مستقیم، کشت و PCR بر روی نمونه های مورد مطالعه صورت گرفت، به منظور استخراج DNA از روش دستی فنل –کلروفرم استفاده گردید. جهت انجام Duplex PCR از پرایمرهای اختصاصی جنس آسپرژیلوس و پرایمرهای بتااکتین استفاده شد. به منظور شناسایی گونه <i>آسپرژیلوس فومیگاتوس</i> از یک جفت پرایمر داخلی(روش Nested-PCR ) و جهت تایید، تعدادی از محصولات PCR تعیین توالی گردید. <br><b>یافته‌ها:</b> به روش PCR آسپرژیلوس در 12 نمونه(12%) تشخیص داده شد، موارد مثبت در روش مستقیم و کشت به ترتیب 11% و 10% بود. حساسیت و اختصاصیت روش مولکولی PCR در مقایسه با آزمایش مستقیم به ترتیب 100% و 8/98% بود. همچنین حساسیت و اختصاصیت این روش در مقایسه با کشت به ترتیب 100% و 7/97% محاسبه گردید. نتایج تعیین توالی تعدادی از محصولات PCR وجود<i> آسپرژیلوس فومیگاتوس</i> را تایید نمود. <br><b>نتیجه‌گیری:</b> این مطالعه نشان داد که روش PCR، در مقایسه با روش مستقیم و کشت، حساسیت بالاتری در شناسایی و ردیابی آسپرژیلوس دارا می‌باشد، همچنین در نمونه های BAL مشکوک به سل می‌توان آسپرژیلوس ها و به ویژه <i>آسپرژیلوس فومیگاتوس</i> را مدنظر قرار داد. </div> <b>Background and Aim:</b> <i>Aspergillus fumigatus</i> is the cause of more than 90% of invasive pulmonary aspergillosis. The aim of this study is identification and detection of <i>A.fumigatus</i> in bronchoalveolar lavage (BAL) samples patients suspected to have tuberculosis by using of Nested-PCR. <br><b>Materials and Methods:</b> In this assay, a set of 100 BAL samples which were collected in 9 month, between the years 2012-2013, from patients with suspected tuberculosis in Tehran hospital, were examined by direct, culture and molecular tests. Manual phenol-chloroform method was used in order to extract DNA. Specific primers of Aspergillus genus and beta-actin primers were used for duplex-PCR. A pairs of internal primers were utilized in order to identification of<i> A.fumigatus</i> (Nested-PCR method). Finally, some of the PCR-products were sequenced for confirming results. <br><b>Results:</b> Overall, 12 samples (12%) were aspergillus-positive by molecular test while 11% and 10% samples were positive by direct and culture test, respectively. The sensitivities and specificities of PCR method compare with direct examination was 100% and 98.8%, respectively. The study also showed that sensitivities and specificities of PCR method compare with culture was 100% and 97.7%, respectively. After sequencing PCR product sample, isolated species were recognized as <i>A. fumigatus</i>. <br><b>Conclusions:</b> This study showed that PCR method in compare with the direct method and the culture has a higher sensitivity in the detection of Aspergillus species, also Present study displayed that can be consider Aspergillus species and <i>A. fumigatus</i> in suspicious to tuberculosis BAL samples آسپرژیلوس فومیگاتوس , لاواژ برونکوآلوئولار , واکنش زنجیره پلیمرازی Aspergillus fumigatus, Bronchoalveolar lavage (BAL), PCR 14 21 http://ijmm.ir/browse.php?a_code=A-10-37-2&slc_lang=fa&sid=1 Farzaneh Amini فرزانه امینی amini@yahoo.com 10031947532846003149 10031947532846003149 No 1. Depatment of Biology, Islamic Azad University, Varamin-pishva Branch, Tehran, Iran. گروه زیست شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد پیشوا ورامین، تهران، ایران Hossein Mirhendi سید حسین میرهندی mirhend@tums.ac.ir 10031947532846003150 10031947532846003150 No 2. Department of Medical Parasitology and Mycology, School of Public Health, Tehran University of Medical Sciences, Tehran گروه انگل شناسی و قارچ شناسی پزشکی، دانشکده بهداشت، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران Reza Kachuei رضا کچوئی kachueiz@yahoo.com 10031947532846003151 10031947532846003151 Yes Molecular Biology Research Center,Baqiyatallah University of Medical Sciences, Tehran, Iran مرکز تحقیقات بیولوژی مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه ا… (عج (، تهران، ایران Fatemeh Noorbakhsh فاطمه نوربخش norbakhsh@yahoo.com 10031947532846003152 10031947532846003152 No 1. Depatment of Biology, Islamic Azad University, Varamin-pishva Branch, Tehran, Iran. گروه زیست شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد پیشوا ورامین، تهران، ایران