fa تشخیص HBV DNA در سرومن و ارتباط آن با برخی از عوامل ایمنولوژیک ویروس شناسی پزشکی Medical Virology مقاله پژوهشی Original Research Article <b>زمینه و اهداف:</b> عفونت ویروس هپاتیت B هنوز یکی از مشکلات بزرگ تهدیدکننده سلامت در بیش از دو میلیارد نفر از مردم دنیا است. تعداد قابل‌توجهی از جمعیت جهانی به عنوان حاملین مزمن این ویروس کشنده از ابتلای به آن رنج می‌برند. متأسفانه اکثر این حاملین در جنوب شرقی آسیا زندگی می‌کنند. حاملین این ویروس در ایران حدود 3% می‌باشند. حتی با وجود منفی بودن HBsAg حضور ویروس با استفاده از روش های مولکولی در سرم تأیید شده است. این مطالعه به منظور تعیین میزان کپیHBV-DNA سرومن بیماران و ارتباط با برخی متغیرهای ایمنولوژیک انجام شد. <br><b>مواد و روش کار: </b>در این مطالعه 70 بیمار مزمن هپاتیت بی (CHB)  که بیش از یک سال از ابتلایشان به هپاتیت B گذشته بود و در گروه سنی 20-40 سال قرار داشتند. نمونه‌های سرومن تهیه گردید و در 20- درجه سلسیوس نگه‌داری شد. برای تشخیص برخی از عوامل ایمنولوژیک مانند HBsAg، HBeAg، Anti HBeاز آزمایش الیزا استفاده گردید. به منظور تعیین مقدار کپی HBV-DNA سرومن و سرم بیماران از روش مولکولی کمی Real-Time PCR و کیت تشخیصی aj Roboscreen Germany استفاده شد. پارامترهای کیفی و کمی با آزمون آماری ارزیابی شد. <br><b>یافته‌ها: </b>نتایج مطالعه نشان داد که از 70 بیمار CHB 22 نفر (4/31%) HBeAg مثبت و 48 نفر (6/68%) HBeAg منفی، 37 نفر (53%) Anti HBeمثبت و 11 نفر (6/15%) همزمان از نظر Anti HBe& HBeAg منفی بودند. با روش مولکولی Real-time PCR مقدار کپی HBV-DNA سرومن و سرم بیماران CHB با ویژگی های مختلف ایمنولوژیک مورد بررسی قرار گرفتند. مشخص گردید گروه بیماران با ویژگی Anti HBe HBeAg & منفی بیش‌ترین میانگین کپی HBV-DNA را نسبت به دو گروه بیماران با ویژگی های ایمونولوژیک HBeAg مثبت، AntiHBe منفی و HBeAg منفی، AntiHBe مثبت داشتند؛ که میانگین کپی سرومن و سرم آنها به ترتیب108 × 37/2 و 107 × 83/2 بود.<br><b>نتیجه‌گیری:</b> ویژگی برخی از متغیرهای ایمنولوژیک مانند HBeAg مثبت و یا منفی، AntiHBe مثبت و یا منفی و هم زمان منفی بودن هر دو در بیماران CHB می‌تواند در مقدار کپی HBV-DNA آنها اثر گذاشته و به کمک سایر عوامل، این بیماران را در فازهای مختلف بیماری قرار دهد؛ بنابراین، استفاده از روش های مولکولی کمی در تشخیص با به‌کارگیری بعضی مایعات بیولوژیک نظیر سرومن، به همراه نشانگرهای ایمنولوژیک می‌تواند در مدیریت بیماری بیماران CHBبسیار موثر و رهگشا باشد. <b>Background and Aim:</b> Infection with hepatitis B virus is a major life threatening situation for more than two billion people throughout the world. Many people are chronic carriers and suffer from this fatal infection. The majority of these carriers live in South East of Asia. In Iran, 3 percentages of the people are carriers of this virus. Molecular methods can detect the virus in serum even though the HBsAg is negative. The current study was designed to evaluate the number of copy of the HBV DNA in serum and cerumen and its relation to some immunological parameters. <br> <b>Materials and Methods:</b> Seventy chronic hepatitis B patients with at least one year history of the disease and aged 20-40 years were enrolled in this study. Serum and cerumen samples were taken from each participant and kept at -20 C. Diaplus Spine ELISA kit was used to measure some immunological parameters such as HBsAg, HBeAg and Anti HBe. In order to measure the copy number of HBV DNA, a quantitative Real Time PCR assay was performed using the BioRad detection PCR /USA)Tm CFX96system. Quantitative and qualitative parameters were compared using the Mann-Whitney U test and Pearson chi squared tests or Fisher's exact test, respectively. <br><b>Results:</b> All cases were HBsAg positive. 22 out of the 70 patients (31.4%) were HBeAg positive. 48 (68.8%) were HBsAg negative, 37(53%) anti-HBe positive and 11(15.6%) were both anti-HBe and HBeAg negative. Patients who immunologically were Anti-HBe and HBeAg negative had the highest copy of HBV DNA among all CHB patients with different immunological properties compared to those who were either HBeAg positive, anti-HBe negative or HBeAg negative, anti-HBe positive with mean DNA copy of Mc=2.83 x107and 3.37x 10⁸, respectively. <br><b>Conclusion: </b>The specificity of some immunological parameters such as HBeAg positive or negative, Anti-HBe positive or negative and simultaneous Anti-HBeAg and HBeAg negative in CHB patients can affect the mean HBV DNA copy number. This together with other parameters put the patients in different phases of the disease. Therefore, quantitative molecular methods performed on biological fluids like cerumen together with immunological parameters can help to manage the disease in CHB patients. هپاتیت B مزمن, HBsAg, حاملین هپاتیت B, سرومن گوش, ایلام. Chronic Hepatitis B, Hepatitis B carriers, Ear cerumen, Ilam. 48 54 http://ijmm.ir/browse.php?a_code=A-10-1-194&slc_lang=fa&sid=1 Elahe Gholami Parizad الهه غلامی پریزاد 10031947532846001943 10031947532846001943 No Microbiology DeP, Ilam University of Medical Sciences, Iran گروه میکروب شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی ایلام Afra Khosravi افرا خسروی afrakhosravi@yahoo.co.uk 10031947532846001944 10031947532846001944 Yes Immunology Dep, Ilam University of Medical Sciences, Iran گروه ایمنی شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی ایلام Eskandar Gholami Parizad اسکندر غلامی پریزاد 10031947532846001945 10031947532846001945 No Public Health dep, Ilam University of Medical Sciences, Iran گروه بهداشت عمومی، دانشکده بهداشت، دانشگاه علوم پزشکی ایلام Nourkhoda Sadeghifard نورخدا صادقی فرد 10031947532846001946 10031947532846001946 No Microbiology DeP, Ilam University of Medical Sciences, Iran گروه میکروب شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی ایلام Sobhan Ghafoorian سبحان غفوریان 10031947532846001947 10031947532846001947 No Molecular Biology Research Center, Ilam University of Medical Sciences, Iran مرکز تحقیقات میکروب شناسی، گروه ایمنی شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی ایلام