fa کلونینگ، بیان و ارزیابی عملکرد ژن PprI داینوکوکوس رادیودورانس در اشریشیا کلی بیوتکنولوژی میکروبی Microbial Biotechnology مقاله پژوهشی Original Research Article <div align="right" style="direction: rtl"> <b>زمینه و اهداف:</b> ژن PprI یکی از ژن‌های جدید شناخته‌شده در باکتری <i>داینوکوکوس رادیودورانس</i> می‌باشد که نقش اساسی در ترمیم DNA و مقاومت این باکتری نسبت به اشعه ماورای بنفش دارد. هدف این مطالعه کلون، بیان و بررسی خصوصیات ژن PprI در <i>اشریشیاکلی</i> می‌باشد. <br><b>مواد و روش کار:</b> ژن PprI باکتری <i>داینوکوکوس رادیودورانس</i> در حامل کلونینگ pGEM به‌صورت سنتتیک ساخته‌شده و در وکتور pET21a ساب کلون گردید. حامل پلاسمید بیانی pET21a حاوی ژن PprI در <i>اشریشیاکلی</i> سویه Origami ترانسفورم گردید و بیان پروتئین با استفاده از SDS-PAGE و وسترن بلات بررسی شد. هم چنین میزان مقاومت به اشعه UV-C در باکتری <i>اشریشیا کلی</i> نوترکیب تعیین شد. <br><b>یافته‌ها:</b> در این مطالعه وکتور pET21a حاوی ژن PprI به همراه دم انتهایی هیستیدینی ساخته شد و شرایط بهینه برای بیان پروتئین نوترکیب PprI تعیین گردید. همچنین <i>اشریشیا کلی</i> نوترکیب نسبت به سویه فاقد ژن PprI به اشعه UV-C مقاوم‌تر شده بود. <br><b>نتیجه‌گیری:</b> نتایج این مطالعه نشان می‌دهد که پروتئین نوترکیب PprI می‌تواند گزینه مناسبی به‌عنوان پروتئین مقاوم به پرتو باشد. همچنین می‌توان پروتئین تولیدشده را خالص‌سازی کرده و میزان مقاومت به اشعه UV-C را در سیستم‌های پروکاریوتی و یوکاریوتی نیز بررسی نمود. </div> <b>Background and Objectives:</b> PprI is one of newly gene identified in Deinococcus radiodurans and plays a critical role in DNA repair and protection against ultraviolet radiation stress. The aim of this study was to clone, express and characterize PprI gene in Escherichia coli.<br><b>Materials and Methods:</b> The PprI gene of D. radiodurans was constructed in pGEM-B1 vector and the cloned gene was subcloned into pET21a expression vector. The pET21a-PprI was expressed in E. coli (Origami strain). Expression of recombinant PprI was confirmed by SDS-PAGE gel electrophoresis and western blotting. In addition, the UV-C radiation resistance of recombinant E. coli was determined.<br><b>Results:</b> The chimeric pET21a plasmid containing the C -terminal fusion of His-tag with PprI gene was successfully constructed and the medium condition for the expression was optimized. In addition, transformed E. coli had higher resistance to radiation than the original strain. <br><b>Conclusion:</b> The results of this study indicated that PprI protein could be a potential candidate to be considered as a radioresistant protein. However, the UV-C radioresistance potency of recombinant PprI should be analyzed in prokaryotic and eukaryotic systems ژن PprI, مقاومت به اشعه, داینوکوکوس رادیودورانس PprI gene, Radiation resistant, Deinococcus radiodurans 24 29 http://ijmm.ir/browse.php?a_code=A-10-141-1&slc_lang=fa&sid=1 Amir Mirzaie امیر میرزایی Amir_mirzaie92@yahoo.com 10031947532846002164 10031947532846002164 No Department of Biology, Faculty of Basic Sciences, Science and Research branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran 1. گروه زیست‌شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات تهران، تهران ایران. Jalil Fallah Mehrabadi جلیل فلاح مهرآبادی jalil.fallah@gmail.com 10031947532846002165 10031947532846002165 Yes Department of Bioscience and Biotechnology-Maleke-Ashtar University of Technology-Tehran-Iran 2. گروه علوم زیستی و فن‌آوری تکنولوژی، دانشگاه صنعتی مالک اشتر، تهران، ایران. Noor Amirmozafari نور امیرمظفری Amirmozafari@yahoo.com 10031947532846002166 10031947532846002166 No Tehran University of Medical Sciences 3. گروه میکروب‌شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی ایران. Taher Nejadsattari طاهر نژادستاری Nejadsattari_t@yahoo.com 10031947532846002167 10031947532846002167 No Science and Research University 1. گروه زیست‌شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات تهران، تهران ایران.