fa بکارگیری تکنیک Multiplex PCR جهت جداسازی همزمان ژنهای ctxA ، ctxB و zot در ویبریو کلرا ایزوله شده از بیماران میکروب شناسی مولکولی Molecular Microbiology مقاله پژوهشی Original Research Article <p align="justify"><strong>زمینه و اهداف:</strong> سویه‌های سم‌زای(Toxogenic) <em>ویبریوکلرا </em>که واجد ژن‌های ctxA،ctxB و zot هستند، نسبت به سویه‌های غیرسم‌زابیماری شدیدتری ایجاد می‌کنند، بنابراین شناسائی دقیق و سریع سویه‌های سم‌زا بسیار حائز اهمیت است. این مطالعه با هدف به‌کارگیری روش Multiplex PCR برای جداسازی هم‌زمان ژن‌های ctxA ، ctxB و zot در <em>ویبریو کلرا</em> ایزوله‌شده از بیماران طراحی گردید.</p> <p align="justify">مواد و روش کار: در این مطالعه 73 سویه بالینی جمع‌آوری و با آزمایش‌های سرم‌شناختی و زیست‌شیمیایی به‌عنوان ویبریوکلرای O1 تشخیص داده شدند. در نهایت به‌منظور شناسایی ژن های ctxA ، ctxB وzot از روش Multiplex PCR استفاده شد و سپس نتایج حاصل با نرم‌افزار آماری SPSS16 مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند.</p> <p align="justify"><strong>یافته‌ها:</strong> برطبق نتایج حاصل از Multiplex PCR، فراوانی ctxA ، ctxB و zot به ترتیب (66 نمونه) 90.4 %، (66 نمونه) 90.4 % و(67 نمونه) 91.7 % بود. نتایج ما نشان داد که Multiplex PCR روشی سریع و دقیق برای جداسازی <em>ویبریوکلرا</em> سم‌زا در نمونه‌های بالینی است. هم‌چنین حساسیت این روش برای جداسازی سویه‌های <em>ویبریوکلرا</em> که واجد ژن‌های ctxA ، ctxB وzot هستند، کمتر از 10 کپی ژن مورد نظر در نمونه است.</p> <p align="justify"><strong>نتیجه‌گیری:</strong> در صورتی‌که پرایمرهای اختصاصی ( ژن‌های هدف ctxA ، ctxB وzot ) برای تشخیص<em> ویبریوکلرا</em> سم‌زا به‌کار برده شود، روش Multiplex PCR یک روش ساده، راحت و نسبتاً ارزان برای جداسازی سریع و دقیق <em>ویبریوکلرا </em>سم‌زا در نمونه‌های کلینیکی است.</p> <b>Background and objectives: </b>Toxigenic Vibrio cholerae contains ctxA, ctxB and zot genes and comparing to non-toxigenic strains causes severe disease in human. Therefore accurate identification of toxigenic strains is very important. This study the usage of a Multiplex PCR assay for simultaneous detection of the ctxA,ctxB and zot genes of V. cholerae isolated from patients was investigated.<br><b>Material and Methods:</b> In this study, 73 stool samples were collected and were determined as V. choleraeO1 by serological and biochemical tests. Finally, all of strains. Finally the results were analyzed statistically by SPSS 16 software. <br><b>Results: </b>According to the results of the Multiplex PCR, the incidences of ctxA , ctxB and zot genes in clinical isolates were obtained as 90.4% (66 samples), 90.4% (66 samples), and 91.7% (67 samples), respectively. All of the strains were belonged to O1serogroup. The results showed that Multiplex PCR is a method for the rapid and accurate detection for toxigenic V. cholerae in clinical isolates. Also, this assay is specific for the detection of Vibrio strains that possess the ctxA, ctxB and zot genes with sensitivity up to 1/100 dilution of the genome per reaction. <br><b>Conclusion:</b> In case where specific primers were utilized (target genes of ctxA, ctxB and zot ), Multiplex PCR has proved to be a simple, fast, and relatively inexpensive method for the rapid and accurate detection of toxigenic V. cholerae strains in the clinical samples. ویبریو کلرا ، Multiplex PCR ، ژنهای ctxA ، ctxB وzot Vibrio cholerae, Multiplex PCR, ctxA, ctxB ,zot 22 27 http://ijmm.ir/browse.php?a_code=A-10-1-3&slc_lang=fa&sid=1 Reza Mirnejad رضا میرنژاد rmirnejad@yahoo.com 10031947532846001086 10031947532846001086 No Molecular Biology Research Center, Baqiyatallah University of Medical Sciences,Tehran,Iran. 1. مرکز تحقیقات بیولوژی مولکولی دانشگاه علوم پزشکی بقیه ا...(عج)- تهران- ایران Shahram Shoja شهرام شجاع 10031947532846001087 10031947532846001087 No Applied Microbiology Research Center, Baqiyatallah University of Medical Sciences,Tehran, Iran 2. مرکز تحقیقات میکروبیولوژی کاربردی دانشگاه علوم پزشکی بقیه ا...(عج)- تهران- ایران Abbasali Imani Fooladi عباسعلی ایمانی فولادی imanifouladi.a@gmail.com 10031947532846001088 10031947532846001088 Yes Molecular Biology Research Center, Baqiyatallah University of Medical Sciences,Tehran,Iran. 2. مرکز تحقیقات میکروبیولوژی کاربردی دانشگاه علوم پزشکی بقیه ا...(عج)- تهران- ایران