Iranian Journal of Medical Microbiology

en تشخیص مولکولی جهش در ژن‌های gyrA، gyrB، parC و parE در ناحیه تعیین‌کننده مقاومت به کینولون ها در سودوموناس آئروژینوزا جدا شده از عفونت زخم سوختگی Molecular Detection of Mutations in gyrA, gyrB, parC, and parE Genes in the Quinolone Resistance Determining Region Among Pseudomonas aeruginosa Isolated From Burn Wound Infection باکتری شناسی پزشکی Medical Bacteriology مقاله پژوهشی Original Research Article زمینه و اهداف:  شیوع مقاومت به فلوروکینولون در جدایه های سودوموناس آئروژینوزا به ویژه در عفونت های زخم سوختگی رو به افزایش است. علت اصلی مقاومت به سیپروفلوکساسین به تغییرات ژنتیکی در ناحیه تعیین کننده مقاومت به کینولون (QRDR) نسبت داده می شود. در این مطالعه، ما مشخصات مقاومت ضد میکروبی و جهش‌های ژن QRDR را در هر دو سویه مقاوم و غیرمقاوم به سیپروفلوکساسین از سودوموناس آئروژینوزا جدا شده از بیماران زخم سوختگی ارزیابی کردیم. مواد و روش کار:  در مجموع ۳۰۰ نمونه از بیماران مبتلا به عفونت زخم سوختگی در گیلان جمع آوری شد. جدایه ها به عنوان سودوموناس آئروژینوزا شناسایی شدند و آزمایش های حساسیت دارویی با استفاده از روش دیسک دیفیوژن آگار انجام شد. استخراج DNA  و آنالیز واکنش زنجیره‌ای پلیمراز (PCR) برای تقویت و تعیین توالی ژن‌های gyrA، gyrB، parC و parE در ناحیه QRDR انجام شد. یافته ها:  مقاومت به توبرامایسین، جنتامایسین، پیپراسیلین، سیپروفلوکساسین، سفتازیدیم و آمیکاسین به ترتیب در ۵۹/۳۲، ۵۵/۰۸، ۵۱/۵۹، ۵۰/۸۴، ۳۰/۵۰ درصد و ۲۶/۲۷ درصد از ایزوله ها مشاهده شد. چهل و دو (۵۹/۳۵ %) ایزوله ها مقاوم به چند دارو (MDR) بودند. نتایج توالی یابی در ناحیه QRDR نشان داد که اکثر جهش ها در ژن gyrA اتفاق افتاده و ۸۵/۷۱ درصد از این جهش ها جایگزینی ترئونین با ایزولوسین (Thr-۸۳ Ile) در سویه های مقاوم به سیپروفلوکساسین بود. جایگزینی غیرمعمول اسید آمینه در کدون ۴۷۰ ژن parE کد کننده DNA توپوایزومراز IV (اسید آسپارتیک جایگزین شده با آسپاراژین) در سویه مقاوم به سیپروفلوکساسین مشاهده شد. هیچ جهشی در ژن  هایgyrB  (ژن آنزیم جیراز) و ژن parC کد کننده DNA توپوایزومراز IV یافت نشد. نتیجه‌گیری:  نتایج این مطالعه نشان می دهد که جهش در ژن gyrA (ژن جیراز) مکانیسم اصلی و مهم مقاومت به فلوروکینولون ها می باشد. شناسایی این جهش‌ها می‌تواند در شناسایی ایزوله‌های مقاوم به فلوروکینولون ، چالش‌های درمانی و انتخاب آنتی‌بیوتیک مناسب، موثر باشد. Background and Aim: The prevalence of fluoroquinolone resistance among Pseudomonas aeruginosa isolates, particularly in burn wound infections, has been increasing. The primary cause of ciprofloxacin resistance is attributed to genetic alterations in the quinolone resistance determinant region (QRDR). In this study, we evaluated the antimicrobial resistance profile and QRDR gene mutations in both ciprofloxacin-resistant and non-resistant strains of P. aeruginosa derived from burn wound patients. Materials and Methods: A total of 300 samples were collected from patients with burn wound infections in Guilan, Iran. The isolates were identified as P. aeruginosa, and drug susceptibility tests were conducted using the agar disk diffusion method. DNA extraction and polymerase chain reaction (PCR) analysis were performed for the amplification and sequencing of gyrA, gyrB, parC, and parE genes in the QRDR region. Results: Resistance to Tobramycin, Gentamicin, Piperacillin, Ciprofloxacin, Ceftazidime, and Amikacin was observed in 59.32%, 55.08%, 51.69%, 50.84%, 30.50%, and 26.27% of the isolates, respectively. Forty-two (35.59%) isolates were multi-drug-resistant (MDR). The sequencing results in the QRDR region showed that the majority of mutations were in the gyrA gene, with 85.71% of these mutations being the substitution of threonine with isoleucine (Thr-83 Ile) in ciprofloxacin-resistant strains. Conclusion: The results of this study indicate that mutations in the gyrA (gyrase gene) are a significant mechanism of resistance to fluoroquinolones. Identifying these mutations can aid in the detection of fluoroquinolone-resistant isolates and simplify treatment challenges by selecting the appropriate antibiotic. <div></div> مقاومت آنتی بیوتیکی, مقاوم به سیپروفلوکساسین, جهش QRDR, سودوموناس آئروژینوزا Antibiotic Resistance, Ciprofloxacin-Resistant, QRDR Mutation, Pseudomonas aeruginosa 89 96 http://ijmm.ir/browse.php?a_code=A-10-2444-1&slc_lang=en&sid=1 Fatemeh Akhlaghi فاطمه اخلاقی FatemehAkhlaghi.60@gmail.com 100319475328460030072 100319475328460030072 No Student Research Committee, School of Medicine, Guilan University of Medical Sciences, Rasht, Iran کمیته تحقیقات دانشجویی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی گیلان، رشت Iraj Nikokar ایرج نیکوکار nikokariraj@yahoo.com 100319475328460030073 100319475328460030073 Yes Department of Microbiology, School of Medicine, Guilan University of Medical Sciences, Rasht, Iran گروه میکروب شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی گیلان، رشت، ایران Ali Mojtahedi علی مجتهدی mojtahedi99.a@gmail.com 100319475328460030074 100319475328460030074 No Department of Microbiology, School of Medicine, Iran University of Medical Sciences, Tehran, Iran گروه میکروب شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی ایران، تهران، ایران Mohammadreza Mobin محمدرضا مبین Maziar.mobayen@gmail.com 100319475328460030075 100319475328460030075 No Department of Surgery, Guilan University of Medical Science, Rasht, Iran گروه جراحی، دانشگاه علوم پزشکی گیلان، رشت، ایران Zahra Atrkar Roshan زهرا عطرکار روشن atrkarroushan@gmail.com 100319475328460030076 100319475328460030076 No Student Research Committee, School of Medicine, Guilan University of Medical Sciences, Rasht, Iran کمیته تحقیقات دانشجویی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی گیلان، رشت Moslem Karampour مسلم کرم پور Moslem.Karampoor71@gmail.com 100319475328460030077 100319475328460030077 No Student Research Committee, School of Medicine, Guilan University of Medical Sciences, Rasht, Iran کمیته تحقیقات دانشجویی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی گیلان، رشت