fa کلون و بیان پروتئین نو ترکیب 28 کیلو دالتونی غشا خارجی بروسلا ملیتنسیس باکتری شناسی پزشکی Medical Bacteriology مقاله پژوهشی Original Research Article <div align="right" style="direction: rtl"> <b>زمینه و اهداف: </b>بروسلوز یک بیماری زئونوز بوده و در بسیاری از کشورهای جهان از جمله ایران بعنوان بیماری بومی محسوب می شود. کنترل این بیماری وابسته به پیشگیری از موارد جدید بیماری و تشخیص بیماری می باشد. بررسی آنتی ژن های مختلف و فاکتورهای بیماریزایی سلول بروسلا، در پیشبرد اهداف پیشگیری، تشخیص و ریشه کنی این بیماری دارای اهمیت بالایی می باشد. در این تحقیق، پروتئین نوترکیب 28 کیلودالتونی غشای خارجی (omp28) بروسلا ملی تنسیس مورد بررسی قرار گرفته است.<br><b>روش بررسی:</b> ابتدا ژن 28 کیلودالتونی نوترکیب (omp28) بروسلا ملی تنسیس با آنزیم پرایم استار 21 تکثیر و سپس درون وکتور pJET 1.2 کلون شده و تعیین توالی گردید. ژن پروتئین هدف (omp28) از وکتور پلاسمیدی که مورد تایید قرار گرفته و بوسیله آنزیم های محدودالاثر طراحی شده، از روی پرایمرها خارج و در وکتور بیانی (+)pET8a کلون شد. پلاسمید حاوی ژن پروتئین هدف، در سویه اشریشاکلی بی ال 21 _ (دی ای 3) ترانسفورم شد و تولید پروتئین نوترکیب با ای پی تی چی القا و با روش اس دی اس پیج تایید شد. <br><b>یافته ها:</b> پس از واکنش زنجیره ای پلیمراز، ژل الکتروفورز 1% تکثیر ژن پروتئین 28 کیلودالتونی غشای خارجی (omp28) را با سایز مناسب تایید نمود. ترانسفورماسیون وکتورهای کلون شده در دو میزبان اشریشیاکلی دی اچ پنج الفا و اشریشیاکلی بی ال 21 ( ای ای 3) نیز با استفاده از واکنش زنجیره ای پلی مراز از روی کلونی ها مورد تایید قرار گرفت. بیان پروتئین نوترکیب 28 کیلودالتونی غشای خارجی (omp28) بروسلا ملی تنسیس با وزن مولکولی صجیج در میزبان اشریشیاکلی بی ال 21 انجام گرفته است. این پروتئین می تواند یک آنتی ژن مناسب برای تحقیقات واکسن و تشخیص سرولوژیک باشد.<br><b>نتیجه گیری:</b> با تخلیص نوترکیب حاصله و ارزیابی ایمنی زایی آن می توان از آن به عنوان یک کاندید واکسن استفاده نمود. </div> بروسلا ملی تنسیس، پرونئین28 کیلودالتونی غشای خارچی، کلونینگ، بیان 7 11 http://ijmm.ir/browse.php?a_code=A-10-1-181&slc_lang=fa&sid=1 زهرا اذرنیاد 10031947532846001221 10031947532846001221 No گروه میکروبیولوژی دانشگاه ازاد اسلامی واحد کرج، البرز، ایران اشرف مجتبی مبارز mmmobarez@modares.ac.ir 10031947532846001222 10031947532846001222 Yes گروه باکتری شناسی ، دانشکده پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران بهمن تبرایی bahmantabaraie@yahoo.com 10031947532846001223 10031947532846001223 No بخش واکسن سازی انیستیتو پاستور ، تهران، ایران نیما خرم آبادی nima.khoramabadi@gmail.com 10031947532846001224 10031947532846001224 No گروه باکتری شناسی ، دانشکده پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران هانیه آقا بابا 10031947532846001225 10031947532846001225 No گروه باکتری شناسی ، دانشکده پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران امیر بختیاری bakhtiyariam@gmail.com 10031947532846001226 10031947532846001226 No گروه میکروبیولوژی دانشگاه ازاد اسلامی واحد کرج، البرز، ایران مهدی نجاتی 10031947532846001227 10031947532846001227 No گروه میکروبیولوژی دانشگاه ازاد اسلامی واحد کرج، البرز، ایران