Iranian Journal of Medical Microbiology

en مقاومت آزولی و بیان ژن erg11 در سویه های کاندیدا غیر آلبیکنس جدا شده از نمونه های شیر خام و انسان: مطالعه مقطعی از 14 مزرعه و 2 بیمارستان، ایران، 2022-2021 Azole Resistance and erg11 Gene Expression in Non-albicans Candida Strains Isolated from Raw Milk and Human Samples: Cross-sectional Study from 14 Farms and 2 Hospitals, Iran, 2021-2022 میکروب شناسی مولکولی Molecular Microbiology مقاله پژوهشی Original Research Article زمینه و اهداف:  امروزه کاندیداهای غیر آلبیکنس در پاتوژن های انسانی شایع هستند و برخی از این موارد در شیر یافت می شود. عدم برآورد دقیق شیوع و شدت جهانی آن، سبب مطالعه حاضر با هدف ارزیابی ویژگی های جمعیت شناختی گونه های کاندیدا غیر آلبیکنس (NAC) و توزیع گونه ای NAC می باشد. همچنین ارزیابی حساسیت آزولی گونه های NAC در شرایط آزمایشگاهی و شناسایی ژن erg۱۱ و بیان erg۱۱ در جدایه های گونه های NAC مقاوم به فلوکونازول در ایران بود. مواد و روش کار:  در مطالعه حاضر، کاندیدا های غیر آلبیکنس شامل کاندیدا گلابراتا، کاندیا کروزئی، کاندیدا پاراپسیلوزیس و کاندیدا تروپیکالیس از ۱۴ مزرعه (شیر خام) و بیماران انسانی با استفاده از روش های کشت، و تعیین توالی جداسازی و شناسایی شدند . مقاومت و حساسیت نمونه ها به آزول ها  مورد بررسی قرار گرفت و بیان erg۱۱ توسطReal-Time PCR  وRT-qPCR  ارزیابی شد. نتایج برای مقایسه سطوح بیان ژن erg۱۱ در مقاومت دارویی NAC توسط نرم افزار REST مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت. یافته ها:  ۶۹ و ۴۸ سویه NAC در ۲۶۲ نمونه شیر و نمونه انسانی جدا شد. بر اساس توالی یابی  ITS، ۰.۷۶٪ به عنوان C. glabrata، ۲.۲۹٪ C. tropicalis، ۴.۱۹٪ C. parapsilosis، و ۱۹.۸٪ C. krusei شناسایی شدند. بیان ژن erg۱۱ در NAC در نمونه‌های جدا شده از انسان نسبت به نمونه‌های جدا شده از دام افزایش یافته بود (P>۰.۰۵) ، در حالی که در مورد کاندیدا گلابراتا جدا شده از هر دو منبع تفاوت معنی‌داری مشاهده نشد (P<۰.۰۵). تمام جدایه های NAC به فلوسیتوزین حساس بودند. نتیجه‌گیری:  جدایه‌های NAC از شیر گاو دارای ژن‌های مقاومت ضد قارچی هستند در حالی که هیچ داروی ضد قارچی مصرف نکرده بودند. ژن مقاومت از  طریق عوامل ضد قارچی در داروهای حفاظتی محصولات منتقل می شود. ایزوله های بالینی نیز مقاومت بیشتری نسبت به فعالیت ضد قارچی داشتند. همچنین استفاده از آنتی بیوتیک های آزول می تواند فعالیت سطح ژن مقاومت را افزایش دهد. این پدیده باید برای پروتکل های برنامه درمانی در نظر گرفته شود. Background and Aim: Nowadays, non-albicans Candida are common in human pathogens, and some of these cases were found in milk. Therefore, as well as the lack of accurate estimates of its global prevalence and severity, the present study aims to assess the demographic features of non-albicans Candida (NAC) spp. and determine the species distribution of NAC. It was also evaluating the in vitro Azole susceptibility of NAC species and identified the erg11 gene and erg11 expression in fluconazole-resistant isolates of NAC spp., in Iran. Materials and Methods: In the present study, non-albicans Candida, including Candida glabrata, Candia krusei, Candida parapsilosis, and Candida tropicalis, were isolated and identified from 14 farms (raw milk) and human patients using culture methods, Real-Time PCR and sequencing. The resistance and susceptibility of the samples to azole were examined and erg11 expression was evaluated by RT-qPCR. The results were analyzed by REST Software to compare the levels of erg11 gene expression involved in drug resistance of NAC. Results: 74 and 52 NAC strains were isolated in 262 collected milk samples and human samples. Based on ITS sequencing, 0.76% were identified as C. glabrata, 2.29% C. tropicalis, 4.19% C. parapsilosis, and 19.8% C. krusei. The expression of erg11 gene in the NAC was increased in samples isolated from humans compared to samples isolated from livestock (P>0.05), while no significant difference was found in the case of Candida glabrata isolated from both sources (P<0.05). All NAC isolates were sensitive to flucytosine. Conclusion: NAC isolates from cows' milk have antifungal resistance genes while they had not taken any antifungal drugs. The resistance gene is transferred from antifungal agents in crop protection medications. Clinical isolates also had increased resistance to antifungal activity. Also, using Azole antibiotics can increase resistance gene level activity. This phenomenon should be considered for treatment program protocols. <div></div> erg11, کاندیداهای غیر آلبیکنس, Real time PCR, آزول , بیان ژن erg11, non-albicans Candida, Real time PCR, genes Expression, Azole 447 456 http://ijmm.ir/browse.php?a_code=A-10-1516-5&slc_lang=en&sid=1 Zahra Namvar زهرا نامور zahranamvar@gmail.com 100319475328460026106 100319475328460026106 No Department of Microbiology, School of Biological Sciences, North Tehran Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran گروه میکروب شناسی، دانشکده علوم زیستی، واحد تهران شمال، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران Abbas Akhavan Sepahy عباس اخوان سپهی Akhavansepahy@gmail.com 100319475328460026107 100319475328460026107 No Department of Microbiology, School of Biological Sciences, North Tehran Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran گروه میکروب شناسی، دانشکده علوم زیستی، واحد تهران شمال، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران Robab Rafiei Tabatabaei رباب رفیعی طباطبایی rrtabatabaei@yaho.com 100319475328460026108 100319475328460026108 No Department of Microbiology, School of Biological Sciences, North Tehran Branch, Islamic Azad University, Tehran, Iran گروه میکروب شناسی، دانشکده علوم زیستی، واحد تهران شمال، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران Somayeh Sharifynia سمیه شریفی نیا sharifynias@gmail.com 100319475328460026109 100319475328460026109 No Clinical Tuberculosis and Epidemiology Research Center, National Research Institute of Tuberculosis and long Diseases (NRITLD), Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran مرکز تحقیقات بالینی سل و اپیدمیولوژی، پژوهشکده ملی سل و بیماریهای ریوی (NRITLD)، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران Sassan Rezaie ساسان رضایی srezaie@tums.ac.ir 100319475328460026110 100319475328460026110 Yes Department of Medical Mycology and Parasitology, Division of Molecular Biology, School of Public Health, Tehran University of Medical Sciences, Tehran, Iran گروه قارچ شناسی و انگل شناسی پزشکی، گروه بیولوژی مولکولی، دانشکده بهداشت، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران