Iranian Journal of Medical Microbiology

en تکنیک مولکولی سریع برای تشخیص پاتوژن باسیلوس سرئوس مواد غذایی Rapid Molecular Technique for Detection of Food Borne Bacillus cereus Pathogen میکروب شناسی مواد غذایی Food Microbiology مقاله پژوهشی Original Research Article زمینه و اهداف:  باسیلوس سرئوس مسئول شیوع چندین بیماری است که از طریق غذا منتشر می شود. بنابراین، این مطالعه با هدف استفاده از روش‌های کشت معمول و PCR مستقیم برای شناسایی پاتوژن باکتریایی منتقله از غذا و انتروتوکسین‌های آن انجام شد. مواد و روش کار:  در مطالعه حاضر، مجموعاً ۷۵ ساندویچ کیبدا، ساندویچ سوسیس، ناهار مرغ، ناهار گوشت گاو و شاورما مرغ (پانزده نمونه از هر کدام) از نقاط مختلف استان کفر الشیخ مصر جمع‌آوری شد. ژوئیه تا سپتامبر ۲۰۲۲. جداسازی، شناسایی و تجزیه و تحلیل سریع توسط PCR برای یافتن پاتوژن های باکتریایی Foodborne در نمونه ها انجام شد. یافته ها:  جداسازی باکتریایی ۱۷ نمونه مثبت از انواع مختلف غذایی را نشان داد. از ۱۷ نمونه آلوده، ۴۰ درصد کیبدا، ۲۶/۶ درصد سوسیس، ۲۰ درصد ناهار مرغ و ۱۳/۳ درصد ساندویچ ناهار گوشت و شاورما مرغ مثبت بودند. با استفاده از PCR برای شناسایی B. cereus از ایزوله های مثبت (گروه A)، ۸ ایزوله با ژن های groEL، nhe و cytK به ترتیب در ۵۳۳، ۷۶۶ و ۴۲۱ جفت باز شناسایی شد. همچنین PCR که برای تشخیص مستقیم باسیلوس سرئوس در نمونه‌های مثبت (گروه B) استفاده شد و نشان داد که ۸ باسیلوس سرئوس در نمونه‌ها با ژن‌های انتروتوکسین‌های آن nhe و cytK، در حالی که گروه C نشان‌دهنده برخی از نمونه‌های غذایی تصادفی با جداسازی منفی است. نتایج نشان داد که ۳ نمونه آلوده به باسیلوس سرئوس بودند. نتیجه‌گیری:  آزمایش PCR یک ابزار تشخیصی حساس و اختصاصی در تشخیص باسیلوس سرئوس با ژن‌های انتروتوکسین آن مستقیماً از نمونه‌های غذا بود، حتی در حضور تعداد کم باکتری B. Cereus که روش‌های سنتی جداسازی و شناسایی نمی‌توانند آن‌ها را شناسایی کنند. Background and Aim: Bacillus cereus is accountable for several outbreaks of diseases spread by food. Therefore, the study aimed to use routine culture methods and direct PCR to detect the foodborne bacterial pathogen and its enterotoxins. Materials and Methods: In the present study, a total of 75 Kibda sandwiches, Sausage sandwiches, Chicken Luncheons, Beef Meat luncheons, and Chicken shawarma (Fifteen samples of each) were collected from different places in Kafr El-Sheikh governorate, Egypt, from July to September 2022. isolation, identification, and rapid analysis by PCR were done to find Foodborne bacterial pathogens in samples. Results: Bacterial isolation revealed 17 positive samples from different food types. From 17 infected samples, 40% were Kibda, 26.6% were Sausage, 20% were Chicken luncheon, and 13.3% were positive for Meat luncheon and Chicken shawarma sandwiches. Using PCR to identify B. cereus from positive isolates (group A), 8 isolates were detected having groEL, nhe & cytK genes amplified at 533, 766, and 421 bp respectively. Also, the PCR, which was used to detection of Bacillus cereus directly in positive samples (group B) and revealed that 8 B. cereus in samples with its enterotoxins genes nhe & cytK, while group C which represents some random food samples of negative isolation results revealed that 3 samples were infected by Bacillus cereus. Conclusion: PCR assay was a sensitive & specific diagnostic tool in detecting Bacillus cereus with its enterotoxins genes directly from food samples, even in the presence of low numbers of B. cereus bacteria that traditional isolation and identification methods cannot detect. <div></div> PCR, B. cereus, groEL, nhe, cytK PCR, B. cereus, groEL, nhe, cytK 346 353 http://ijmm.ir/browse.php?a_code=A-10-2131-1&slc_lang=en&sid=1 Mayada A.M. Abou Zeid مائده عبد حمید محمود ابو زیاد Kindmemo@yahoo.com 100319475328460025585 0000000257338606 Yes Department of Bacteriology, Animal Health Research Institute, Agricultural Research Center (ARC), Kafr El-Sheikh Regional Laboratory, Kafr El-Sheikh, Egypt گروه باکتری شناسی، موسسه تحقیقات بهداشت حیوانات، مرکز تحقیقات کشاورزی (ARC)، آزمایشگاه منطقه ای کفر الشیخ، کفر الشیخ، مصر AbdElhafez Samir سمیر عبدالحافظ AbdelhafezSamir@yahoo.com 100319475328460025586 100319475328460025586 No Department of Biotechnology, Animal Health Research Institute, Agricultural Research Center (ARC), Reference Laboratory for Veterinary Quality Control on Poultry Production, Giza, Egypt گروه بیوتکنولوژی، موسسه تحقیقات بهداشت حیوانات، مرکز تحقیقات کشاورزی (ARC)، آزمایشگاه مرجع کنترل کیفیت دامپزشکی در تولید طیور، جیزه، مصر Asmaa Ezzat Hassan اسما عزت حسن Asmaahassan@gmail.com 100319475328460025587 100319475328460025587 No Department of Food Hygiene, Animal Health Research Institute, Agricultural Research Center (ARC), Giza, Egypt گروه بهداشت مواد غذایی، موسسه تحقیقات بهداشت حیوانات، مرکز تحقیقات کشاورزی (ARC)، جیزه، مصر