Iranian Journal of Medical Microbiology

en اثر رمدسیویر به عنوان یک داروی ضد کووید-19 بر روی آنزیم های سلول های هپاتوسیتی جنین جوجه ؛ یک مطالعه آزمایشگاهی The Effect of Remdesivir as an anti-COVID-19 Drug on Chicken Hepatocyte Enzymes; an in vitro Study ویروس شناسی پزشکی Medical Virology مقاله پژوهشی Original Research Article زمینه و اهداف:  مطالعات محدودی بر روی سمیت بالقوه رمدسیویر (RDV) بر سلول های کبدی (هپاتوسیتی) در شرایط آزمایشگاهی وجود دارد. با توجه به نتایج موثر رمدسیویر در بیماران مبتلا به کووید-۱۹ (COVID-۱۹) و تأثیرات منفی آن بر عملکرد کبد، در مطالعه حاضر، اثرات رمدسیویر بر بیان و فعالیت آنزیم‌های کبدی در سلول‌های هپاتوسیتی مشتق از جنین جوجه بررسی گردید. مواد و روش کار:  تعداد ۲۰ تخم مرغ نطفه دار (در مرحله تکوینی(X  در دمای ۵/۳۷ درجه سانتی گراد و رطوبت ۶۵-۶۰% به مدت ۱۰ روز (در مرحله تکوینی(HH۳۵  انکوبه شدند. سلول های هپاتوسیتی در محیط کشت DMEM/F۱۲+۱۰% FBS  کشت داده شدند. پس از ۳ روز، چهار غلظت RDV (۲.۰۰، ۳.۰۰، ۴.۰۰ و ۵.۰۰ میکرومولار) به محیط کشت اضافه گردید. سپس عملکرد آنزیم های کبدی آمینوترانسفرازهای آلانین (ALT) و آسپارتات (AST) توسط الایزا و سطح بیان آن ها با روش کمی PCR (qPCR) اندازه‌گیری شد. یافته ها:  در مطالعه حاضر، سلول هپاتوسیتی دارای ساختار شش ضلعی با هسته بزرگ و هستک بودند. در رنگ‌آمیزی پریودیک اسید شیف  (PAS)سلول‌های PAS مثبت با رنگ صورتی، تایید کننده محتوای گلیکوژن سلول‌های هپاتوسیتی بودند. در حضور غلظت های ۴ و ۵ میکرومولار RDV، بیشتر از ۵۰% از سلول‌های هپاتوسیتی پس از ۴۸ ساعت، زنده مانی (Viability) خود را از دست دادند  (P<۰.۰۰۱). از طرفی، بیان هر دو آنزیم ALT و AST پس از دریافت RDV به طور معنا‌داری افزایش یافت (P<۰.۰۰۱) . همچنین، عملکرد این دو آنزیم در گروه +RDV به طور قابل توجهی افزایش یافت. نتیجه‌گیری:  نتایج این مطالعه نشان داد که بیان و عملکرد آنزیم های کبدی پس از تیمار با RDV افزایش می یابد. Background and Aim: There is little in vitro evidence of potential hepatotoxicity of Remdesivir (RDV). Regarding the effective results of RDV in patients with COVID-19 and the impact of COVID-19 on liver function, we investigated the effects of RDV on the expression and activity of liver enzymes in chicken embryo-derived hepatocytes. Materials and Methods: In this in vitro study, 20 embryonated chicken eggs (stage X) were incubated (37.5 °C, 60-65% humidity) for 10 days (stage HH35). The hepatocytes were cultured in DMEM/F12+10% FBS medium and treated with four concentrations of RDV (2.00, 3.00, 4.00, and 5.00 µM). Serum levels of alanine (ALT) and aspartate (AST) aminotransferases were measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), and gene expression was measured by quantitative real-time PCR (qPCR). Results: Each hepatocyte had a hexagonal structure with a large nucleus and nucleolus. In the PAS-positive cells with a pink color confirmed the glycogen content of hepatocytes. In the presence of 4 and 5 μM RDV resulted in a significant decrease in hepatocyte viability, up to 50% increase in the proportion of non-viable hepatocytes after 48 hr (P<0.001). Besides, the expression of both ALT and AST significantly increased after treatment with RDV (P<0.001). Our data demonstrated a significant increase in the function of both ALT and AST in the RDV+ group. Conclusion: We concluded that treatment with RDV led to increased expression and function of hepatocyte enzymes in vitro. <div></div> کووید-19, رمدسیویر, آمینوترانسفرازها, سلول های هپاتوسیتی COVID-19, Remdesivir, Aminotransferases, Hepatocytes 309 317 http://ijmm.ir/browse.php?a_code=A-10-2089-2&slc_lang=en&sid=1 Roya Mahdavi رویا مهدوی mahdavi.r@ajums.ac.ir 100319475328460025568 100319475328460025568 No Student Research Committee, Ahvaz Jundishapur University of Medical Sciences, Ahvaz, Iran کمیته تحقیقات دانشجویی، دانشگاه علوم پزشکی جندی شاپور اهواز، اهواز، ایران Zahra Akbari Jonoush زهرا اکبری جونوش yasmina.akbari@gmail.com 100319475328460025569 100319475328460025569 No Department of Immunology, School of Medicine, Ahvaz Jundishapur University of Medical Sciences, Ahvaz, Iran گروه ایمنی شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی جندی شاپور اهواز، اهواز، ایران Mehri Ghafourian مهری غفوریان ghafourianbnm@gmail.com 100319475328460025570 100319475328460025570 No Department of Immunology, School of Medicine, Ahvaz Jundishapur University of Medical Sciences, Ahvaz, Iran گروه ایمنی شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی جندی شاپور اهواز، اهواز، ایران Seyed Esmaeil Khoshnam سید اسماعیل خوشنام esmaeil.khoshnam1392@gmail.com 100319475328460025571 100319475328460025571 No Persian Gulf Physiology Research Center, Medical Basic Sciences Research Institute, Ahvaz Jundishapur University of Medical Sciences, Ahvaz, Iran مرکز تحقیقات فیزیولوژی خلیج فارس، پژوهشکده علوم پایه پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی جندی شاپور اهواز، اهواز، ایران Fereshteh Nezhad Dehbashi فرشته نژاد دهباشی nezhad.dehbashi23@yahoo.com 100319475328460025572 0009-0004-6465-3201 No Cellular and Molecular Research Center, Medical Basic Science Research Institute, Ahvaz Jundishapur University of Medical Sciences, Ahvaz, Iran مرکز تحقیقات سلولی و مولکولی، پژوهشکده علوم پایه پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی جندی شاپور اهواز، اهواز، ایران Maryam Farzaneh مریم فرزانه maryamfarzaneh2013@yahoo.com 100319475328460025573 100319475328460025573 Yes Cellular and Molecular Research Center, Medical Basic Science Research Institute, Ahvaz Jundishapur University of Medical Sciences, Ahvaz, Iran مرکز تحقیقات باروری، ناباروری و سلامت جنین، دانشگاه علوم پزشکی جندی شاپور اهواز، اهواز، ایران