Iranian Journal of Medical Microbiology

en پیدایش جدید مولکولی در تولید بیوفیلم و مکانیسم ‌مقاومت به کارباپنم در جدایه‌های بالینی سودوموناس آئروژینوزا A molecular New Update on the Biofilm Production and Carbapenem Resistance Mechanisms in Clinical Pseudomonas aeruginosa Isolates باکتری شناسی پزشکی Medical Bacteriology مقاله پژوهشی Original Research Article زمینه و اهداف:  سودوموناس آئروژینوزا مقاوم به کارباپنم (CRPA) یکی از مهم ترین علل عفونت های شدید و پایدار است. مشارکت مکانیسم ‌های مختلف مقاومت به کارباپنم ‌ها و تشکیل بیوفیلم در میان مجموعه‌ای از جدایه ‌های حساس و غیر حساس به ایمی پنم سودوموناس آئروژینوزا مورد بررسی قرار گرفت. مواد و روش کار:  در این مطالعه مقطعی، در مجموع ۱۱۷ جدایه سودوموناس آئروژینورا جمع آوری شد. حساسیت جدایه ها به انواع ترکیبات ضد میکروبی با روش دیسک دیفیوژن ارزیابی شد. برای شناسایی تولید کنندگان آلژینات از روش کاربازول استفاده شد. مالتی پلکس PCR برای تشخیص ژن های مقاومت و بیوفیلم انجام شد. سطح بیان mRNA افلاکس پمپ‌ ها با روش‌ های فنوتیپی و ژنوتیپی (Real-time PCR کمی) ارزیابی شد. یافته ها:  بیشترین میزان مقاومت مربوط به سفتازیدیم، کلرامفنیکل، سفتریاکسون، تتراسایکلین و لووفلوکساسین بود. فنوتیپ MDR در ۸/۴% سویه ها مشاهده شد. فراوانی مقاومت به کارباپنم نیز ۲۴/۷% بود. تست کاربازول در ۵۳/۸% مثبت بود. به طور کلی ۶۲/۴% از جدایه ها قادر به تشکیل بیوفیلم بودند که ۲۸/۸% آن ها به کارباپنم مقاوم بودند. توزیع ژن algD و algU به ترتیب ۴۱/۸% و ۲۶/۵% بود. فراوانی ژن های کدگذاری شده باMBL  به شرح زیر بود: bla IMP (۶۲/۱%)، bla VIM (۳۱/۰%)، bla NDM (۶/۸%). سطوح نسبی mRNA، MexX، MexC، MexB و MexA در سویه ‌های  CRPAبا افلاکس پمپ فعال به ترتیب ۸۱/۸%، ۶۳/۶%، ۵۴/۴%، ۳۶/۴% بود.  نتیجه‌گیری:  وجود مکانیسم ‌های مختلف مقاوم در سودوموناس آئروژینوزا می‌تواند باعث ایجاد مقاومت متقاطع آنتی ‌بیوتیکی شده، منجر به ظهور سویه‌ های مقاوم شود و درمان را دشوار کند. تولید بیوفیلم ارتباط مستقیمی با مقاومت آنتی بیوتیکی دارد. پمپ های افلاکس به طور فعال در سویه های مقاوم به کارباپنم بیان می شوند. Background and Aim: Carbapenem resistant- Pseudomonas aeruginosa (CRPA) is one of the most important causes of severe and persistent infections. The contributions of different resistance mechanisms to Carbapenems and biofilm formation among a collection of imipenem susceptible and non-susceptible P. aeruginosa isolates were investigated. Materials and Methods: In this cross-sectional study, a total of 117 P. aeruginosa isolates were collected. The disc diffusion method assessed the susceptibility of isolates to various antimicrobials. The Carbazole method was used for the detection of alginate producers. Multiplex-PCRs were performed for the detection of biofilm and resistance genes. The expression mRNA levels of efflux pumps were assessed by phenotypic and genotypic (Quantitative Real-time PCR) approaches. Results: The highest resistance rate was related to ceftazidime, chloramphenicol, ceftriaxone, tetracycline, and levofloxacin. MDR phenotype was observed in 8.4% of strains. The frequency of carbapenem resistance was also 24.7%. The Carbazole test was positive at 53.8%. In general, 62.4% of isolates were able to form a biofilm, 28.8% of which were resistant to carbapenem. The distribution of algD and algU genes were 41.8% and 26.5%, respectively. The frequency of MBL-encoded genes was as follows; blaIMP (62.1%), blaVIM (31.0%), and blaNDM (6.8%). The relative levels of MexX, MexC, MexB and MexA mRNA in CRPA strains with active efflux pump were 81.8%, 63.6%, 54.5%, and 36.4%, respectively. Conclusion: The existence of different resistant mechanisms in P. aeruginosa can cause cross antibiotic resistance, lead to the appearance of resistant strains, and make the treatment difficult. Biofilm production is directly related to antibiotic resistance. Efflux pumps are actively expressed in carbapenem-resistant strains. <div style="text-align: justify;"><div></div></div> کارباپنم, افلاکس پمپ ها, بیوفیلم, سودوموناس آئروژینوزا Carbapenem, efflux pumps, biofilm, Pseudomonas aeruginosa 557 565 http://ijmm.ir/browse.php?a_code=A-10-1943-1&slc_lang=en&sid=1 Raziyeh Ramazani راضیه رمضانی ramzaniraziye@gmail.com 100319475328460022219 100319475328460022219 No Department of Microbiology, Ayatollah Amoli Branch, Islamic Azad University, Amol, Iran گروه میکروب شناسی، واحد آیت الله آملی، دانشگاه آزاد اسلامی، آمل، ایران Rabeeh Izadi Amoli رابعه ایزدی آملی rabi-izadiamoli@yahoo.com 100319475328460022220 100319475328460022220 Yes Department of Microbiology, Ayatollah Amoli Branch, Islamic Azad University, Amol, Iran گروه میکروب شناسی، واحد آیت الله آملی، دانشگاه آزاد اسلامی، آمل، ایران Mojtaba Taghizadeh Armaki مجتبی تقی زاده ارمکی mojtabataghizade@yahoo.com 100319475328460022221 100319475328460022221 No Infectious Disease and Tropical Medicine Research Center, Health Research Institute, Babol University of Medical Sciences, Babol, Iran مرکز تحقیقات بیماری‌های عفونی و گرمسیری، پژوهشکده بهداشت، دانشگاه علوم پزشکی بابل، بابل، ایران Abazar Pournajaf اباذر پورنجف abazar_pournajaf@yahoo.com 100319475328460022222 100319475328460022222 No Infectious Disease and Tropical Medicine Research Center, Health Research Institute, Babol University of Medical Sciences, Babol, Iran مرکز تحقیقات بیماری‌های عفونی و گرمسیری، پژوهشکده بهداشت، دانشگاه علوم پزشکی بابل، بابل، ایران Hami Kaboosi حامی کابوسی hkaboosi@gmail.com 100319475328460022223 100319475328460022223 No Department of Microbiology, Ayatollah Amoli Branch, Islamic Azad University, Amol, Iran گروه میکروب شناسی، واحد آیت الله آملی، دانشگاه آزاد اسلامی، آمل، ایران