Iranian Journal of Medical Microbiology

en طراحی کیت تشخیص Coxiella burneiti از بیماران مبتلا به اندوکاردیت عفونی با استفاده از PCR Molecular Detection of Infectious Endocarditis (Coxiella burnetii) Bacteria from Selected Military Hospitals باکتری شناسی پزشکی Medical Bacteriology مقاله پژوهشی Original Research Article زمینه و اهداف:  Coxiella burnetii عامل بیماری Query Fever است. Query Fever یک بیماری زئونوز و اندمیک با گسترش جهانی است. Query Fever در می‌تواند به عنوان یک پنومونی یا اندوکاردیت ظاهر گردد. با توجه به فقدان آمار از درصد آلودگی به C. burnetii در بیمارستان‌های ایران و همچنین مقاومت بسیار زیاد این باکتری، بررسی وجود آلودگی‌های بیمارستانی به این باکتری حائز اهمیت می‌گردد. هدف از این مطالعه تشخیص مولکولی باکتری‌های C. burnetii ایجادکننده اندوکاردیت عفونی از بیمارستان‌های ارتش بود. مواد و روش کار:  نمونه‌های اندوکاردیت کشت منفی از بیماران جمع‌‌آوری شد. PCR، انجام گرفت و ژنIs۱۱۱۱  تکثیر و جداسازی شد. نمونه‌هایی اندوکاردیت تعیین توالی شدند. نمونه کنترل مثبت سنتز شد و درون وکتور PUC ۱۸ آماده گردید. تعیین ویژگی برای باکتری‌ها انجام گرفت و ژن کلون گردید. جهت تایید کلونینگ، کلنی PCR انجام گرفت. پلاسمیدها، استخراج شدند و در نهایت حساسیت و حد تشخیص تعیین گردید. یافته ها:  تعیین توالی نشان داد که نمونه‌ها مربوط به باکتری‌های کلبیسلا پنومونیه بودند. به منظور بررسی ویژگی، هیچ باندی روی ژل آگارز مشاهده نگردید. این موضوع نشان‌داد که پرایمرهای طراحی شده فقط به باکتری مورد نظر متصل می‌شود. آخرین رقت پلاسمید با غلظت  ng/µl۷۰۰ که باند قابل تشخیصی را در روی ژل ایجاد نمود، ۷-۱۰ و کمترین تعداد کپی قابل تشخیص در PCR  برابر ۲۲ کپی محاسبه گردید. نتیجه‌گیری:  در سال‌های اخیر تلاش زیادی برای توسعه روش‌های مولکولی سریع و خاص برای تشخیص C. burnetii انجام شده است. به نظر می‌رسد روش PCR ابزار مفیدی است که ممکن است زمان تشخیص C. burnetii را در طول عفونت‌های سیستمیک، مانند اندوکاریت کاهش دهد. Background and Aim: Coxiella burnetii is a mandatory gram-negative and intracellular bacterium. The most common pathogens are Query Fever in humans and Coxiellosis in animals. Due to the variety of ways of infection and the lack of accurate, comprehensive, and reliable research, and the lack of statistics on the percentage of infection with C. burnetiii and the high resistance of this bacterium in the environment, it is important to investigate the presence of nosocomial infections with this bacterium. Therefore, this study aimed to molecularly detect C. burnetiii bacteria that cause infective endocarditis in military hospitals. Materials and Methods: 100 negatively cultured endocarditis specimens were collected for this purpose, and DNA was extracted from C. burnetii with an extraction kit. Also, a PCR reaction was performed on the genome of negative control samples to evaluate the specificity of primers and determine the method's specificity. After ligation steps, JM107 E. coli susceptible to calcium chloride was used to accept the plasmid containing the gene. Results: In quantitative DNA analysis, its amount was calculated between 1.69 and 1.8. The last dilution of the PUC18 plasmid for C. burnetii with an initial concentration of 700 ng / µl, which formed a detectable band on the gel, was calculated to be 7-10, and the minimum number of detectable copies in a 25 μL PCR reaction equal to 22 copies. Conclusion: Although C. burnetii was not detected in any of the blood samples in this study. However, C. burnetii has a broad and varied host spectrum in the Epizootic and Enzootic foci. <div style="text-align: justify;"><div></div></div> کوکسیلا بورنتی, PCR, تب کوئری Coxiella burnetii, PCR, Query fever 594 600 http://ijmm.ir/browse.php?a_code=A-10-1936-2&slc_lang=en&sid=1 Ashkan Dirbazian اشکان دیربازیان ghadir02017@gmail.com 100319475328460022494 100319475328460022494 No Infectious Diseases Research Center, AJA University of Medical Sciences, Tehran, Iran مرکز تحقیقات بیماری‌های عفونی، دانشگاه علوم پزشکی آجا، تهران، ایران Mohammad Soleimani محمد سلیمانی Soleimanidor@yahoo.com 100319475328460022495 0000000282709499 Yes Department of Microbiology, Faculty of Medicine, AJA University of Medical Sciences, Tehran, Iran گروه میکروب شناسی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی آجا، تهران، ایران Seyyed Hossein Mousavi سید حسین موسوی dr.shmusavi@yahoo.com 100319475328460022496 100319475328460022496 No Department of Cardiology, School of Medicine, AJA University of Medical Sciences, Tehran, Iran گروه قلب و عروق، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی آجا، تهران، ایران Mohammad Aminianfar محمد امینیان فر m.b9854@yahoo.com 100319475328460022497 100319475328460022497 No Department of Infectious Disease, School of Aerospace and Subaquatic Medicine, Beasat Hospital, AJA University of Medical Sciences, Tehran, Iran گروه بیماری‌های عفونی، دانشکده هوافضا و پزشکی زیر سطحی، بیمارستان بعثت، دانشگاه علوم پزشکی آجا، تهران، ایران Rohollah Mirjani روح اله میرجانی mirjani.r@gmail.com 100319475328460022498 100319475328460022498 No Department of Genetics and Advanced Medical Technology, Faculty of Medicine, AJA University of Medical Sciences, Tehran, Iran گروه ژنتیک و فناوری پیشرفته پزشکی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی آجا، تهران، ایران Mehran Khoshfetrat مهران خوش فطرت mhrn.khoshfetrat@gmail.com 100319475328460022499 100319475328460022499 No Department of Cardiology, School of Medicine, AJA University of Medical Sciences, Tehran, Iran گروه قلب و عروق، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی آجا، تهران، ایران Monireh Kamali منیره کمالی mklk59@gmail.com 100319475328460022500 100319475328460022500 No Cardiovascular Medical and Research Center, Iran University of Medical Sciences, Tehran, Iran مرکز تحقیقات پزشکی و قلب و عروق، دانشگاه علوم پزشکی ایران، تهران، ایران