fa بررسی سطح سرمی و پلی مورفیسم TNF-α و IFN-γ به روش های ELISA و PCR-RFLP در بیماران مبتلا به سل ریوی و مقایسه آن با افراد سالم میکروب شناسی مولکولی Molecular Microbiology مقاله پژوهشی Original Research Article <div align="right" style="direction: rtl"> <b>زمینه و اهداف:</b> مقاومت یا ایمنی سلولی در برابر عفونت توبرکولوز، بستگی به عملکرد لمفوسیت های T، که فعال کننده ماکروفاژهای از بین برنده مایکوباکتریوم های داخل سلولی اند، دارد. لمفوسیت های T از طریق ترشح شبکه ای از فاکتورهای محلول سایتوکاین ها، مسوول این روابط سلولی اند و طی سه دهه اخیر به طور گسترده مورد مطالعه قرار گرفته اند. اولین رخداد عفونت در میزبان با یک پاتوژن، پاسخ ایمنی ذاتی است که شامل عملکرد سایتوکاین هایی همچون TNF-γ و IFN-α می باشد. هدف از این مطالعه، تعیین فراوانی موتاسیون های ژن TNF-γ و IFN-α به روش PCR-RFLP و اندازه گیری سطح سرمی این دو سایتوکاین در دو گروه شاهد و بیمار به روش ELISA و ارتباط آنها با بیماری سل ریوی بود. <br><b>روش بررسی:</b> در این مطالعه مورد - شاهدی case-control) 93) بیمار مبتلا به سل ریوی با اسمیر مثبت از بیمارستان مسیح دانشوری انتخاب شدند. گرده شاهد شامل 103 فرد سالم، بدون هیچ سابقه به توبرکولوز بود. ژنوتیپ پنج ناحیه از TNF-a و یک ناحیه از IFN-γ با استفاده از روش PCR-RFLP شناسایی شد. میزان سطح سرمی این دو سایتوکاین با استفاده از روش ELISA بررسی شد. اطلاعات روش ELISA با آزمون Mann-Withney U بدست آمد. برای یافتن نقطه حد نصاب (cut off)از ROC curve استفاده شد. داده های روش PCR-RFLP با آزمون دقیق فیشر، تجزیه و تحلیل شد. <br><b>یافته ها:</b> با روش PCR-RFLP، تفاوت معنی داری در دو منطقه TNF-308 و TNF-857از نظر فراوانی موتاسیون میان دو گروه شاهد و مورد مشاهده شد .(P<0.05) در روش ELISA تفاوت معنی داری میان دو گروه شاهد و مورد درباره IFN- g وجود داشت (P<0.05). یک نقطه حد نصاب (cut off) به عنوان مارکر سرولوژیک برای بررسی سریع تر توبرکولوز میان نقاط OD مثبت و منفی به دست آمد. این نقطه cut off برایIFN- g ، 0.19mg/dl بود. <br><b>نتیجه گیری:</b> موتاسیون در دو نقطه -857 و FNF-a -308 به طور معنی دار دیده شد. این تفاوت در هیچ یک از نقاط دیگر TNF-a و IFN-γمشاهده نشد. نتایج روش ELISA نشان داد پاتوژن های مایکوباکتریایی به تولید سایتوکاین -هایی نظیر IFN-γ به طور فراوان وابسته هستند. تست های سرولوژیک، با توجه به نقطه حد نصاب IFN- γ) ctu off)، به بیماران کمک می کند تا در افراد توبرکولوز مثبت، نتایج سریع تر مورد شناسایی قرار گیرند. </div> <b>Background & Objectives:</b> Cellular resistance to tuberculosis (TB) infection depends on signals from mycobacterium tuberculosis specific T lymphocytes activating mycobacterial killing mechanisms in infected macrophages. The network of soluble factors, or cytokines, responsible for these cellular communications has been progressively unraveled over the last 3 decades however, new regulatory and effectors cytokines continue to be discovered. Infection of a host with a pathogen first result inactivation of cells of the innate immune response including effectors molecules including cytokines such as TNF-α and IFN-γ. The aim of this study was to investigate the frequency of TNF-α, IFN-γ alleles , evaluating serum concentration of TNF-α and IFN-γ and relationship of between susceptibility to TB and TNF-α and IFN-γ gene variations. <br><b>Material & Methods:</b> In this prospective case-control study, 93 patients with smear positive tuberculosis selected from Masih Daneshvari Hospital, Tehran, Iran. They were matched with 103 controls without any history TB. Genotype of 5 regions of TNF-α and 1 region of IFN-γ were distinguished by PCR-RFLP method, and level of serum concentration between case & control groups were evaluated by ELISA method. Data were analyzed with Mann-Whitney U & earning the cut off analyzed with ROC curve for ELISA method and the results of PCR-RFLP method were analyzed by SPSS, Fisher exact and X2. <br><b>Results:</b> In PCR-RFLP method, the results showed a significant difference at TNF-308 and TNF-857 between two groups of control and patient (P< 0.05). In ELISA method, a significant difference in IFN-γ was observed between the groups of control and patient (P <0.05). Also a cut off point as a serologic marker between the positive and negative states, for rapid TB examination about IFN-γwas found the cut off for IFN-γ was 0.19. <br><b>Conclusion: </b>Mutation in TNF-308 and TNF-857 regions were identified significantly, but it was not observed in other TNF-α and IFN-γ regions. In this study, ELISA method suggest that mycobacterial pathogens are frequently associated with production of cytokines such as IFN-γ and serologic tests considering the cut off patients, help us to detect TB in cases that we want to earn results rapidly. توبرکولوز، IFN-γ؛ TNF-α؛ PCR-RFLP؛ ELISA Cytokine, Tuberculosis, IFN-γ, TNF-α, PCR-RFLP, ELISA test 15 23 http://ijmm.ir/browse.php?a_code=A-10-1-137&slc_lang=fa&sid=1 Mahdiye Bayat مهدیه بیات kavoshgroup597@yahoo.com 1003194753284600721 1003194753284600721 Yes Department of Microbiology ,Islamic Azad University, Tehran North Branch گروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد تهران شمال Jamileh Nowroozi جمیله نوروزی 1003194753284600722 1003194753284600722 No Mycobacterium Research Center (MRC), National Research Institute Of Tuberculosis and Lung Diasease (NRITLD), Darabad, Tehran Parviz Pakzad پرویز پاک زاد 1003194753284600723 1003194753284600723 No Mycobacterium Research Center (MRC), National Research Institute Of Tuberculosis and Lung Diasease (NRITLD), Darabad, Tehran Parisa Farnia پریسا فرنیا 1003194753284600724 1003194753284600724 No Department of Microbiology ,Islamic Azad University, Tehran North Branch گروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد تهران شمال Saber Anoosheh صابر انوشه 1003194753284600725 1003194753284600725 No Department of Microbiology ,Islamic Azad University, Tehran North Branch گروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد تهران شمال Seyed Mehran Marashian سیدمهران مرعشیان 1003194753284600726 1003194753284600726 No Department of Microbiology ,Islamic Azad University, Tehran North Branch گروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد تهران شمال Mohhamad Varahram محمد ورهرام 1003194753284600727 1003194753284600727 No Department of Microbiology ,Islamic Azad University, Tehran North Branch گروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد تهران شمال Mahdi Kazempour مهدی کاظم پور 1003194753284600728 1003194753284600728 No Department of Microbiology ,Islamic Azad University, Tehran North Branch گروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد تهران شمال Mohammad Reza Masjedi محمدرضا مسجدی 1003194753284600729 1003194753284600729 No Department of Microbiology ,Islamic Azad University, Tehran North Branch گروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد تهران شمال AliAkbar Velayati علی اکبر ولایتی 1003194753284600730 1003194753284600730 No Department of Microbiology ,Islamic Azad University, Tehran North Branch گروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد تهران شمال