en تشخیص و تعیین ژنوتیپ سویه های آناپلاسما فاگوسایتوفیلوم دارای اهمیت زئونوتیک در سگ های پناهگاه های مشهد، خراسان رضوی بیماری های مشترک انسان - دام Zoonoses Research مقاله پژوهشی Original Research Article <p style="font-style: normal; text-align: justify;"><span style="font-size:14px;"><span style="font-family:IRANsans;"><span style="color:#ffffff;"><strong><span style="background-color:#16a085;">زمینه و اهداف:&nbsp;</span></strong></span>&nbsp;بیماری آناپلاسموز ناشی از گونه های جنس آناپلاسما و یک بیماری مهم منتقله توسط بندپایان در مهره داران مختلف بوده و اهمیت بهداشتی فراوانی برای انسان دارد. مطالعه حاضر با هدف بررسی حضور و تعیین ژنوتیپ <em>آناپلاسما فاگوسیتوفیلوم</em> با استفاده از روش های بررسی میکروسکوپی، تکنیک <span dir="LTR">Realtime-PCR</span> و آنالیزهای فیلوژنتیکی در سگ‌های پناهگاه‌های مشهد در استان خراسان رضوی انجام شد.<br> <strong><span style="color:#ffffff;"><span style="background-color:#16a085;">مواد و روش کار:&nbsp;</span></span>&nbsp;</strong>برای این منظور، در سال ۲۰۲۰، تعداد ۲۵۰ نمونه خون طی معاینات معمول بهداشتی از سگ‌ها در پناهگاه‌های مختلف واقع در شهر جمع‌آوری شد. ابتدا از نمونه‌های خون، گسترش تهیه شده و با گیمسا رنگ‌آمیزی شد و زیر میکروسکوپ نوری از نظر وجود آناپلاسما بررسی شد. سپس <span dir="LTR">DNA</span> ژنومی از بخش بافی کوت نمونه‌های خون استخراج شده و با تکثیر یک قطعه توالی با اندازه ۱۴۰۰ جفت باز از &nbsp;۱۶<span dir="LTR">S rRNA</span> متعلق به جنس آناپلاسما، از نظر وجود عفونت آناپلاسما با استفاده از روش <span dir="LTR">realtime-PCR</span> بررسی شدند. در نهایت، تعیین توالی و تجزیه و تحلیل بر روی قطعات تکثیر شده برای ارزیابی فیلوژنتیک سویه ها با استفاده از نرم افزار <span dir="LTR">BLAST</span> در نمونه های مثبت انجام شد.<br> <span style="color:#ffffff;"><strong><span style="background-color:#16a085;">یافته ها:&nbsp;</span></strong></span>&nbsp;در مجموع تعداد ۹ سگ (۳/۶۰ %) شامل ۵ ماده (۳/۴۰ %) و ۴ نر (۳/۸۸ %) از نظر عفونت آناپلاسما در تست <span dir="LTR">Realtime-PCR</span> مثبت بودند. همچنین مورولای <em>آناپلاسما فاگوسایتوفیلوم</em> در نوتروفیل های ۳ حیوان که در تست <span dir="LTR">PCR</span> مثبت تشخیص داده شده بودند در گسترش خون آنها شناسایی شد.<br> <strong><span style="color:#ffffff;"><span style="background-color:#16a085;">نتیجه‌گیری:&nbsp;</span></span>&nbsp;</strong>این مطالعه یافته های مهمی را در رابطه با حضور <em>آناپلاسما فاگوسایتوفیلوم</em> در سگ و میزان تشابه یا ناهمگونی ژنتیکی این سویه های بیماری زا تشخیص داده شده از سگ و انسان در ایران و سایر کشورها ارائه می دهد. با توجه به یافته ها، مطالعه حاضر اولین شواهد مولکولی در مورد عفونت <em>آناپلاسما فاگوسیتوفیلوم</em> در سگ های پناهگاه ها در منطقه را نشان می دهد.</span></span></p> <p style="text-align: justify;"><span style="font-family:Times New Roman;"><span style="font-size:16px;"><span style="color:#ffffff;"><strong><span style="background-color:#16a085;">Background and Objective:</span></strong></span>&nbsp;Anaplasmosis caused by <em>Anaplasma</em> spp. is an important arthropod-borne disease of various vertebrates with health concerns to humans. The present study aimed to investigate the detection and genotype of <em>Anaplasma phagocytophilum </em>using microscopic examination, real-time PCR technique, and phylogenetic analysis in dogs from Mashhad shelters, Khorasan-Razavi province.<br> <strong><span style="color:#ffffff;"><span style="background-color:#16a085;">Methods:</span></span></strong>&nbsp;For this purpose, 250 blood specimens were collected during routine health checkups from dogs in different shelters in Mashhad, Iran, in 2020. First, smears were prepared from the blood specimens, stained with Giemsa, and examined under the light microscope for <em>Anaplasma </em>inclusions. Then, the genomic DNAs were extracted from buffy coats of blood specimens and screened by real-time PCR for the presence of <em>Anaplasma</em> infection by amplifying a 1400 bp sequence of <em>16S rRNA</em> belonging to the <em>Anaplasma </em>genus. Finally, sequencing and BLAST analyses were carried out on the amplified fragments for the phylogenetic assessments in positive specimens.<br> <strong><span style="color:#ffffff;"><span style="background-color:#16a085;">Results:</span></span></strong> A total of 9 dogs (3.60%), including 5 females (3.40%) and 4 males (3.88%) were found to be positive for <em>Anaplasma </em>infection in real-time PCR. Moreover, in blood smear observation,<em> A. phagocytophilum </em>morulae were detected in the neutrophils of 3 PCR positive animals.<br> <strong><span style="color:#ffffff;"><span style="background-color:#16a085;">Conclusion:</span></span></strong> This study provides important data regarding <em>A.</em> <em>phagocytophilum</em> in dogs and the degree of genetic homology/heterogeneities among these pathogen strains from dogs and humans in Iran and other countries. To our knowledge, this is the first molecular evidence on the infection of <em>A. phagocytophilum </em>in sheltered dogs of the region.</span></span></p> <div><div></div></div> تشخیص مولکولی, آناپلاسما فاگوسایتوفیلوم, بررسی فایلوژنتیک, سگ ها, ایران Anaplasma phagocytophilum, Dogs, Iran, Molecular identification, Phylogenetic analysis 244 250 http://ijmm.ir/browse.php?a_code=A-10-544-1&slc_lang=en&sid=1 Naghmeh Mehrabifar نغمه محرابی فر naghmemehrabi570@gmail.com 100319475328460019590 100319475328460019590 No Departement of Pathobiology, Faculty of Veterinary Medicine, Semnan University, Semnan, Iran گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه سمنان، سمنان، ایران Hamid Staji حمید استاجی hstaji@semnan.ac.ir 100319475328460019591 0000000334067361 Yes Departement of Pathobiology, Faculty of Veterinary Medicine, Semnan University, Semnan, Iran گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه سمنان، سمنان، ایران Morteza Keywanlou مرتضی کیوانلو mkeywanloo@semnan.ac.ir 100319475328460019592 100319475328460019592 No Department of Clinical Sciences, Faculty of Veterinary Medicine, Semnan University, Semnan, Iran گروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه سمنان، سمنان، ایران Mohammadreza Salimi Bejestani محمدرضا سلیمی بجستانی m.salimi@semnan.ac.ir 100319475328460019593 100319475328460019593 No Departement of Pathobiology, Faculty of Veterinary Medicine, Semnan University, Semnan, Iran گروه پاتوبیولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه سمنان، سمنان، ایران Ehsan Gallehdar Kakhki احسان گله دار کاخکی hstaji78@yahoo.com 100319475328460019594 100319475328460019594 No Small Animal Veterinary Clinician, Mashhad, Iran دامپزشک بخش خصوصی حیوانات خانگی، مشهد، ایران