Iranian Journal of Medical Microbiology

en جداسازی و شناسایی لاکتوباسیلوس برویس از پنیرمحلی شهرستان بازفت، ایران و ارزیابی فعالیت ضد میکروبی آن در برابر برخی میکروارگانیسم‌های بیماریزا Isolation and Identification of Lactobacillus brevis from Cottage Cheese of Bazoft City, Iran and Evaluation of Its Antimicrobial Activity Against Some Pathogenic Microorganisms میکروب شناسی مواد غذایی Food Microbiology مقاله پژوهشی Original Research Article زمینه و اهداف:  در ایران فراورده‌های لبنی محلی زیادی وجود دارد که حاوی باکتری‌های اسیدلاکتیک هستند. هدف از این مطالعه، جداسازی و شناسایی باکتری لاکتوباسیلوس برویس از پنیر محلی شهرستان بازفت با استفاده از روش‌های بیوشیمیایی و مولکولی و بررسی ویژگی‌های ضدمیکروبی آن در شرایط آزمایشگاهی است. مواد و روش کار:  در این مطالعه از ۱۰ نمونه پنیر محلی بازفت، چهارمحال بختیاری نمونه‌برداری انجام شد. پس از انتقال به آزمایشگاه رقت سازی تا ۶-۱۰ انجام و در محیط MRS کشت انجام شد. سپس باکتری‌های باسیلی شکل و گرم‌ مثبت جداسازی شدند و به کمک روش‌های بیوشیمیایی شناسایی شدند. سپس به‌ منظور تایید سویه جداسازی شده، استخراج ژنوم لاکتوباسیلوس برویس شناسایی شده انجام و تکثیر با استفاده از روش واکنش زنجیره‌ای پلیمراز (PCR) انجام گرفت. در نهایت محصول PCR برای تعیین توالی به شرکت سیناکلون ارسال گردید. خاصیت ضد میکروبی مایع رویی کشت لاکتوباسیلوس برویس علیه عوامل بیماری زای اشرشیا کلی، استافیلوکوکوس اورئوس، سالمونلا تیفی موریوم، سودوموناس آئروژینوزا و انتروکوکوس فکالیس به کمک روش دیسک و چاهک مورد بررسی قرار گرفت. همچنین حساسیت آنتی‌بیوتیکی به روش استاندارد CLSI ارزیابی شد. یافته ها:  از نمونه‌های پنیرمحلی شش گونه لاکتوباسیلوس شناسایی شد. لاکتوباسیلوس برویس منتخب توان ضد میکروبی مناسبی در مقابل پنج باکتری بیماری زا از خود نشان دادند، بیشترین اثر مهار کنندگی بر علیه سالمونلا تیفی موریوم طی روش چاهک با میانگین قطر هاله عدم رشد ۱۵/۳ میلی‌متر و کمترین اثر مهارکنندگی بر علیه انتروکوکوس فکالیس در روش دیسک با قطر هاله عدم رشد ۸/۶ میلی‌متر از خود نشان داد. همچنین نسبت به آنتی‌بیوتیک‌های ونکومایسین و جنتامایسین مقاوم، نسبت به کانامایسین و نالیدیکسیک اسید نیمه حساس و نسبت به اریترومایسین، تتراسایکیلین، آمپی‌سیلین و کلرامفنیکل حساس بود. نتیجه‌گیری:  سویه لاکتوباسیلوس برویس جدا شده از پنیر محلی بازفت توانایی ضدمیکروبی مناسبی دارد و با انجام آزمون‌های in vitro و in vivo بیشتر می‌توان از این سویه بومی در داروها و مواد غذایی استفاده کرد. Background and Objective: Many local dairy products in Iran contain lactic acid bacteria. The aim of this study was to isolate and identify Lactobacillus brevis from the cottage cheese made in Bazoft city using biochemical and molecular methods and investigate its antimicrobial properties in vitro. Materials and Methods: In this study, ten local Bazoft city cheese samples were collected. After transferring to the Lab, serial dilution was obtained at 10-6 CFU/mL and cultured in MRS medium. Then bacilli and gram-positive bacteria were isolated and identified by biochemical methods. The identified Lactobacillus brevis genome was extracted and then amplified using polymerase chain reaction (PCR) to confirm the isolated strain. Finally, the PCR product was sent to Sinaclon for sequencing. The antimicrobial properties of Lactobacillus brevis supernatant were evaluated using the disk and well diffusion method against Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Salmonella Typhimurium , Pseudomonas aeruginosa, and Enterococcus faecalis. Antibiotic susceptibility was also assessed by the CLSI standard method. Results: Six species of Lactobacillus were identified from cottage cheese samples. Selected Lactobacillus brevis showed good antimicrobial potency against five pathogenic bacteria. It showed the highest inhibitory effect against Salmonella Typhimurium during the well diffusion method with a mean diameter of growth inhibition zone of 19 mm and the least inhibitory effect against Enterococcus faecalis during the disc method with a growth inhibition zone diameter of 9 mm. It was also resistant to the antibiotics Vancomycin and Gentamicin, intermediate susceptible to Kanamycin and Nalidixic acid, and susceptible to Erythromycin, Tetracycline, Ampicillin, and Chloramphenicol. Conclusion: Isolated Lactobacillus brevis strain from the local Bazoft cheese has a good antimicrobial ability. By performing extra in vitro and in vivo tests, this native strain can be used more in medicines and the food industry. <div><div></div></div> لاکتوباسیلوس برویس, باکتری‌های بیماری زا, مقاومت آنتی‌بیوتیکی, پنیر محلی Antibiotic resistance, Cottage cheese, Lactobacillus brevis, Pathogenic bacteria 17 34 http://ijmm.ir/browse.php?a_code=A-10-770-1&slc_lang=en&sid=1 Iman Dehghani Champiri ایمان دهقانی چم پیری imandehghanichampiri@gmail.com 100319475328460018947 100319475328460018947 No Department of Microbiology, Faculty of Basic Sciences, Shahrekord Branch, Islamic Azad University Shahrekord, Shahrekord, Iran گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم پایه، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران Zahra Bamzadeh زهرا بم زاده Bamzadehz@yahoo.com 100319475328460018948 100319475328460018948 Yes Department of Microbiology, Faculty of Basic Sciences, Shahrekord Branch, Islamic Azad University Shahrekord, Shahrekord, Iran گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم پایه، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران Ebrahim Rahimi ابراهیم رحیمی ebrahimrahimi55@yahoo.com 100319475328460018949 100319475328460018949 No Department of Food Hygiene and Public Health, Faculty of Veterinary Medicine, Shahrekord Branch, Islamic Azad University, Shahrekord, Iran گروه بهداشت مواد غذایی، دانشکده دامپزشکی، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران Leila Rouhi لیلا روحی lrouhi59@gmail.com 100319475328460018950 100319475328460018950 No Cellular and Developmental Research Center, Faculty of Basic Sciences, Shahrekord Branch, Islamic Azad University, Shahrekord, Iran مرکز تحقیقات سلولی و تکوینی، دانشکده علوم پایه، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران