Iranian Journal of Medical Microbiology

en ارزیابی اثرXylitol بر بیان ژن‌های cpsB، cpsD و psaA استرپتوکوکوس پنومونیه با استفاده از Real-time RT PCR Real-time RT PCR Evaluation of the Xylitol Effect on the Expression of Streptococcus pneumoniae cpsB,cpsD and psaA Genes میکروب شناسی مولکولی Molecular Microbiology مقاله پژوهشی Original Research Article زمینه و اهداف :  کپسول پلی‌ساکاریدی یکی از فاکتور مهم بیماری‌زایی پنوموکک‌ها است. تولید این کپسول توسط ژن‌های cpsB و cpsD تنظیم می‌گردد. بنابراین، هر عاملی که القاکنندۀ بیان و یا مهار این ژن‌ها باشد، احتمالا بقای درون‌سلولی، افزایش بیماری‌زایی و یا کاهش بیماری‌زایی باکتری را افزایش دهد. هدف این مطالعه بررسی اثر گزایلیتول بر بیان ژن‌های cpsB، cpsD، psaA و aroE با روش Real Time RT-PCR بود. مواد و روش کار :  این تحقیق در سال ۲۰۱۹ میلادی در مجموعه آزمایشگاه‌های دانشگاه بقیه الله انجام شده است. ۲۰ ایزوله بالینی و یک سویه رفرانس (ATCC ۶۳۰۵) استرپتوکوکوس پنومونیه استفاده شد. به منظور بررسی اثر گزایلیتول و فروکتوز، محیط کشتBHI  براث با غلظت های مختلف این قندها تهیه گردید. سپس سوسپانسیونی از باکتری به محیط‌های حاول ۵ درصد گزایلیتول و ۵ درصد گزایلیتول به همراه ۵ درصد فرکتوز و نیز محیط کنترل به مدت سه ساعت قرار داده شد. بعد از زمان انکوباسیون RNA استخراج و cDNA ساخته شد. سپس سطح بیان ژن‌های cpsB، cpsD و psaA  انداره‌گیری شد. یافته ها :  میزان بیان ژن cpsB در محیط حاوی ۵ درصد گزایلیتول در مقایسه با میزان بیان این ژن در محیط حاوی ۵ درصد گزایلیتول به همراه ۵ درصد فروکتوز به ترتیب عبارت بود از ۰/۰۲۲ و ۰/۰۲۷. در حالی که متوسط میزان بیان ژن‌های psaA و cpsD  در محیط حاوی ۵ درصد گزایلیتول در مقایسه با محیط حاوی ۵ درصد گزایلیتول به‌ همراه ۵ درصد فروکتوز و نیز کنترل به ترتیب عبارت از ۱/۶۵۹ و ۰/۰۵۶ در مقایسه با ۰/۶۳۳ و ۳/۲۹۴ بود. نتیجه‌گیری :  یافته این تحقیق حکایت از آن داشت که ۵ درصد گزایلیتول قادر به مهار بیان ژن cpsB در حد مطلوب است. بنابراین، استفاده از این قند به‌عنوان کاهنده بیان ژن cpsB به‌منظور کنترل عفونت‌های سطحی پنوموککی احتمالاً مفید باشد. Background and Objective: The major pneumococcal pathogenesis factor is the capsular polysaccharide. the production of polysaccharide is regulated by cpsB and cpsD genes. Thus, every agent that induce or inhibition of expression of these genes probably increased pathogenesis of bacteria, intracellular survival and vis versa. The aim of this study was to assay the effect of Xylitol on Streptococcus pneumoniae cpsB, cpsD, psaA and aroE genes expression by Real Time RT-PCR. Materials and Methods: During 2019 in Baqiyatallah university laboratories, 20 clinical isolates and a reference strain Streptococcus pneumoniae (ATCC 6305) were studied. To assay the effect of Xylitol and fructose، different concentration of these sugars were exposed to BHI Broth media. Thereafter, the bacterial suspension was added to 5% Xylitol, 5%Xylitol + 5% fructose and control medium for 3hours. RNA was extracted and cDNA synthesis was carried out. Then, the cpsB, cpsD and psaA genes expression levels were measured. Results: The mean of cpsB gene expression ratio in presence of the % 5 Xylitol treated media compared with those in the control media and % 5 Xylitol + 5% fructose were 0.022 and 0.027 respectively. The means of the cpsD and psaA genes expression ratio in the % 5 Xylitol treated media compared with those in the control media and % 5 Xylitol + 5% fructose were 1.659 and 0.056, and 0.633 and 3.294 respectively. Conclusion: Our finding revealed that, the 5% Xylitol inhibit the cpsB gene expression properly. Therefore, it is possible to use of Xylitol for reductive on cpsB gene expression and superficial pneumococcal infections control. <div><div></div></div> استرپتوکوکوس پنومونیه, گزایلیتول, بیان, cpsB, cpsD, psaA و aroE و RT Real- Time PCR Streptococcus pneumoniae, Xylitol, expression, cpsB, cpsD, psaA, aroE, RT Real- Time PCR 392 399 http://ijmm.ir/browse.php?a_code=A-10-69-3&slc_lang=en&sid=1 Ali Asgari علی عسکری sky.asgari@gmail.com 100319475328460017555 0000000227172254 No MS.c of Medical Microbiology, Faculty of Medicine, Baqiyatallah University of Medical Sciences, Tehran, Iran کارشناس ارشد میکروبیولوژی پزشکی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله، تهران، ایران RamezanAli Ataee رمضانعلی عطائی ataee216@gmail.com 100319475328460017556 0000000171256140 Yes Professor of Department of Medical Microbiology, Faculty of Medicine, and Applied Microbiology Research Center, System Biology and Poisonings Institute, Baqiyatallah University of Medical Sciences, Tehran, Iran استاد گروه میکروب شناسی پزشکی، دانشکده پزشکی، و مرکز تحقیقات میکروب شناسی کاربردی، انستیتوی سم‌شناسی و سیستم بیولوژی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله، تهران، ایران Ali Mehrabi Tavana علی مهرابی توانا mehrab@bmsu.ac.ir 100319475328460017557 0000000288543143 No Professor of Medical Microbiology, Faculty of Medicine and Health Management Research Center, Baqiyatallah University of Medical Sciences, Tehran, Iran استاد میکروب شناسی پزشکی، دانشکده پزشکی، و مرکز تحقیقات مدیریت بهداشت سلامت، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله، تهران، ایران Reza Mirnejad رضا میرنژاد rmirnejad@yahoo.com 100319475328460017558 100319475328460017558 No Professor of Medical Microbiology, Applied Microbiology Research Center, System Biology and Poisonings Institute, Baqiyatallah University of Medical Sciences, Tehran, Iran استاد گروه میکروب شناسی پزشکی، مرکز تحقیقات میکروب شناسی کاربردی، انستیتوی سم‌شناسی و سیستم بیولوژی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله، تهران، ایران Mahdi Ghorbanalizdgan مهدی قربانعلی زادگان Gh_mahdi52@yahoo.com 100319475328460017559 100319475328460017559 No Assistant professor of Medical Microbiology, Faculty of Medicine, and Applied Microbiology Research Center, System Biology and Poisonings Institute, Baqiyatallah University of Medical Sciences, Tehran, Iran استادیار گروه میکروب شناسی پزشکی، دانشکده پزشکی، و مرکز تحقیقات میکروب شناسی کاربردی، انستیتوی سم‌شناسی و سیستم بیولوژی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله، تهران، ایران