fa القاء آپوپتوز در سلول‌های سرطان پروستات (PC-3) با استفاده از سوپرناتانت Bacillus licheniformis در شرایط آزمایشگاهی میکروب شناسی مولکولی Molecular Microbiology مقاله پژوهشی Original Research Article <div style="text-align: justify;"><span style="font-size:14px;"><span style="font-family:IRANsans;"><strong><span style="color:#ffffff;"><span style="background-color:#2980b9;">زمینه و اهداف:</span></span> </strong>سرطان از شایع<span dir="LTR">‌</span>ترین عوامل مرگ ‌و میر انسانی است. در نتیجه ضرورت یافتن ترکیبات جدید با منشا طبیعی از باکتری‌های بومی احساس می‌شود. این مطالعه با هدف بررسی تاثیر سیتوتوکسیک ترکیبات تولیدی باکتری‌ گرم‌مثبت خاکزی بر میزان آپوپتوز سلول‌های سرطان پروستات (<span dir="LTR">PC-۳</span>) انجام شد.<strong><span style="font-size:9.0pt;"></span></strong><br> <strong><span style="color:#ffffff;"><span style="background-color:#2980b9;">مواد و روش کار:</span></span> </strong>تعداد ۷۰ نمونه خاک از مناطق مختلف استان چهارمحال و بختیاری (ایران) &nbsp;در بهار سال ۱۳۹۸جمع‌آوری شدند و روی محیط‌های نوترینت‌آگار و تریپتی‌سوی‌آگار کشت داده شدند. به‌دنبال شناسایی سویه‌های گرم‌مثبت، بهترین سویه از لحاظ فعالیت ضدمیکروبی با استفاده از سکانس ژن &nbsp;<span dir="LTR">۱۶S rRNA</span>شناسایی شد. سپس برای بررسی فعالیت سیتوتوکسیک، رده سلولی <span dir="LTR">PC-۳</span> در غلظت‌های مختلف سوپرناتانت <a name="_Hlk49524974">سویه انتخا</a>بی در مدت زمان‌های انتخابی تیمار شد و سپس میزان توان زیستی و آپوپتوز توسط تست <span dir="LTR">MTS</span> و آنکسین بررسی شد.<span style="font-size:9.0pt;"></span><br> <span style="color:#ffffff;"><strong><span style="background-color:#2980b9;">یافته‌ها:</span></strong></span> از۷۰ نمونه خاک ۴۶۷ باکتری گرم‌مثبت جداسازی شد که ۹ سویه از آن‌ها توانایی تولید ترکیبات ضدمیکروبی را داشتند. از بین آن‌ها سویه &nbsp;<em><span dir="LTR">Bacillus licheniformi</span></em><em><span dir="LTR">s</span></em>که ترکیبات ضدمیکروبی بهتری تولید می‌کرد، برای بررسی میزان توان زیستی و آپوپتوزیس روی ردۀ سلول‌های <span dir="LTR">PC-۳</span> انتخاب شد. تست <span dir="LTR">MTS</span> با انکوباسیون ۲۴، ۴۸ و ۷۲ ساعته سلول‌ها با تیمار نشان داد که میزان توان زیستی وابسته به دوز است و با افزایش غلظت، میزان توان زیستی نسبت به گروه کنترل کاهش معنی‌دار نشان دادند (۰/۰۵<span dir="LTR"><</span><em><span dir="LTR">P</span></em>). میزان القاء آپوپتوز در سلول‌های <span dir="LTR">PC-۳</span> با افزایش غلظت سوپرناتانت به صورت وابسته به دوز و زمان به طور معنی‌داری افزایش می‌یابد (۰/۰۵<span dir="LTR"><</span><em><span dir="LTR">P</span></em><span dir="LTR"></span>)<em>. </em>بیشترین تأثیر سوپرناتانت مربوط به غلظت۲۰ میلی‌گرم/میلی‌لیتر در زمان ۷۲ ساعت پس از تیمار سلول‌ها بود<em>.</em><br> <span style="color:#ffffff;"><strong><span style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="background-color:#2980b9;">نتیجه‌گیری:</span></span></strong></span> <span style="letter-spacing:-.1pt;">با استفاده از ترکیبات به‌دست‌آمده از باکتری‌های گرم‌مثبت خاکزی می‌توان به درمان سلول‌های سرطان پروستات پرداخت.</span></span></span></div> <div style="direction: ltr; text-align: justify;"><span style="display: none;">&nbsp;</span><span style="display: none;">&nbsp;</span><span style="font-size:14px;"><span style="font-family:Times New Roman;">&nbsp;<strong><span style="background:#1F497D;"><span style="color:white;">Background:</span></span></strong> &nbsp;<span style="color: black;">Cancer is one of the most common causes of death in humans. Therefore, there is a need for new cytotoxic compounds from natural sources such as native bacteria. The current study aimed at investigating the cytotoxic effects of compounds obtained from gram-positive </span><span style="color: black;">terricolous bacteria on the apoptosis of cells in prostate cancer (PC-3).</span></span></span></div> <div style="direction: ltr; text-align: justify;"><span style="font-size:14px;"><span style="font-family:Times New Roman;">&nbsp;<strong><span style="letter-spacing:-.1pt;background:#1F497D;"><span style="color:white;">Materials & Methods:</span></span></strong>&nbsp; &nbsp;<span style="letter-spacing: -0.1pt;"><span style="color:black;">A total of 70 soil samples were obtained from various locations in Chaharmahal & Bakhtiari province (Iran,</span></span><span style="letter-spacing: -0.1pt;"><span style="color:black;"> Spring 2020</span></span><span style="letter-spacing: -0.1pt;"><span style="color:black;">) and were cultured on Nutrient agar and Trypticase </span></span><span style="letter-spacing: -0.1pt;"><span style="color:black;">soy agar. After identification of gram-positive species, the best species in regards to microbial activity was identified using 16S rRNA gene sequencing. Then, in order to investigate the cytotoxic activity, PC-3 cell line was treated in different concentrations of the </span></span><span style="letter-spacing: -0.1pt;"><span style="color:black;">supernatant from the selected species for different durations while viability and apoptosis were determined using MTS and Annexin tests.</span></span></span></span></div> <div style="text-align: justify;"></div> <div style="direction: ltr; text-align: justify;"><span style="font-family:Times New Roman;"><span style="font-size:14px;"><strong><strong><span style="letter-spacing:-.1pt;background:#1F497D;"><span style="color:white;">Results:&nbsp; </span></span></strong>&nbsp;</strong><span style="letter-spacing: -0.1pt;"><span style="color:black;">A total of 467 gram-positive bacteria were extracted from 70 soil samples, among which 9 species had antimicrobial capabilities. Among these selected species, </span></span><em><span style="letter-spacing:-.1pt;"><span style="color:black;">Bacillus licheniformis </span></span></em><span style="letter-spacing: -0.1pt;"><span style="color:black;">which had the best antimicrobial compounds, was selected for further investigation of its viability and apoptosis effects on PC-3 cell line. The MTS with incubation time of 24, 48 and 72 hours of the treated cells indicated that the viability is dependent on the dosage an increase in the concentration can result in significant decrease in the viability compared to the control group (<em>P</em><0.05). The amount of apoptosis induction in PC-3 cells also significantly increased with increase in </span></span><span style="letter-spacing: -0.1pt;"><span style="color:black;">supernatant </span></span><span style="letter-spacing: -0.1pt;"><span style="color:black;">concentration dependent on dosage and time (<em>P</em><0.05). The largest effect was observed at supernatant concentration of 20 mg/mL at 72 hours after cell treatment.</span></span></span></span></div> <div style="text-align: justify;"></div> <div style="direction: ltr; text-align: justify;"><span style="font-family:Times New Roman;"><span style="font-size:14px;"><strong><strong><span style="background:#1F497D;"><span style="color:white;">Conclusion: </span></span></strong>&nbsp;&nbsp;</strong><span style="display: none;">&nbsp;</span><span style="color: black;">Using compounds obtained from gram positive terricolous bacteria can help in treatment of prostate cancer cells.</span><span style="display: none;">&nbsp;</span></span></span></div> <div style="direction: ltr;"><span style="font-family:Times New Roman;"><strong><span style="display: none;">&nbsp;</span></strong></span></div> <div style="direction: ltr;"><strong><span style="display: none;">&nbsp;</span></strong></div> خاک, Bacillus licheniformis, سرطان پروستات, MTS, آپوپتوز Soil, Bacillus licheniformis, Prostate Cancer, MTS, Apoptosis 618 642 http://ijmm.ir/browse.php?a_code=A-10-1456-1&slc_lang=fa&sid=1 Ahmadreza Shahniani احمدرضا شهنیانی Arezashahneani@gmail.com 100319475328460015882 100319475328460015882 No Department of Microbiology, Faculty of Basic Sciences, Kazerun Branch, Islamic Azad University, Kazerun, Iran گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم پایه، واحد کازرون، دانشگاه آزاد اسلامی، کازرون، ایران Zahra Bamzadeh زهرا بم زاده bamzadehz@yahoo.com 100319475328460015883 100319475328460015883 Yes Department of Microbiology, Faculty of Basic Sciences, Shahrekord Branch, Islamic Azad University Shahrekord, Iran گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم پایه، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران Fahimeh Mahmoudnia فهیمه محمودنیا f.mahmoudnia@cfu.ac.ir 100319475328460015884 100319475328460015884 No Department of Biology, Faculty of Science, Farhangian University, Tehran, Iran. گروه زیست شناسی، دانشکده علوم، دانشگاه فرهنگیان، تهران، ایران Leila Rouhi لیلا روحی lrouhi59@gmail.com 100319475328460015885 100319475328460015885 No Cellular and Developmental Research Center, Faculty of Basic Sciences, Shahrekord Branch, Islamic Azad University, Shahrekord, Iran مرکز تحقیقات سلولی و تکوینی، دانشکده علوم پایه، واحد شهرکرد، دانشگاه آزاد اسلامی، شهرکرد، ایران