fa بررسی وجود ژن blaZ و تولید بتالاکتاماز در ایزوله های بالینی استافیلوکوکوس اپیدرمیدیس میکروب شناسی مولکولی Molecular Microbiology مقاله پژوهشی Original Research Article <div align="right" style="direction: rtl"> <b>مقدمه و اهداف:</b> <i>استافیلوکوکوس اپیدرمیدیس</i> به عنوان مهم ترین عضو گروه استافیلوکوک های کوآگولاز منفی، در دهه اخیر سومین عامل عفونت بیمارستانی و یکی از متداول ترین عوامل عفونت خون مطرح گردیده است. برای درمان اغلب عفونت های ناشی از این باکتری از داروهای بتالاکتام استفاده می شود. ترشح آنزیم بتالاکتاماز نه تنها باعث ایجاد مقاومت به داروهای بتالاکتام می شود بلکه ترشح زیاد آن در برخی سویه های فاقد ژن مقاومت به متی سیلین، موجب مقاومت کاذب به متی سیلین می شود. هدف از این پژوهش، تعیین الگوی حساسیت آنتی بیوتیکی نسبت به داروهای بتالاکتام، بررسی فنوتیپی حضور آنزیم بتالاکتاماز و در نهایت حضور ژن بتالاکتاماز (balZ) در نمونه های بالینی <i>استافیلوکوکوس اپیدرمیدیس</i> بود. <br><b>روش بررسی:</b> تعداد 69 سویه استافیلوکوک کوآگولاز منفی از 3 بیمارستان در شهر تهران جمع آوری شدند که از میان آنها 55 ایزوله بالینی <i>استافیلوکوکوس اپیدرمیدیس</i> شناسایی شدند. حساسیت آنها نسبت به 8 آنتی بیوتیک بتالاکتام با روش Disc diffusion تعیین شد. تولید آنزیم بتالاکتاماز توسط کلنی با تست یدومتری انجام شد و در نهایت حضور ژن blaZ با استفاده از یک جفت پرایمر اختصاصی و روش PCR مطالعه شد. <br><b>یافته ها:</b> نتایج مقاومت آنتی بیوتیکی حاصل از آزمایش آنتی بیوگرام نشان داد که 54 ایزوله (%98.1) به پنی سیلین، 50 ایزوله (%90.9) به متی سیلین، 29 ایزوله (%52.7) به سفتریاکسون، 27 ایزوله (%49.1) به سفتی زوکسیم، 20 ایزوله (%36.3) به سفوتاکسیم، 19 ایزوله (%34.5) به آموکسی سیلین، 17 ایزوله (%30.9) به سفازولین و 13 ایزوله (%23.6) به سفالکسین مقاوم بودند. تست های یدومتری کلنی حضور بتالاکتاماز و نتایج حاصل از PCR نیز حضور ژن blaZ را در کلیه ایزوله ها تایید کرد. <br><b>نتیجه گیری:</b> روش آنتی بیوگرام نشان داد که %24 تا %53 از ایزوله ها به انواع بتالاکتام های نسل سوم مقاوم هستند. حال آنکه روش یدومتری کلنی، تولید آنزیم بتالاکتاماز را در کلیه ایزوله ها و روش PCR حضور ژن blaZ را در همه ایزوله ها نشان می دهد. اما میزان بیان آن متفاوت است. نتیجه گیری می شود که روش آنتی بیوگرام به تنهایی برای تعیین استراتژی درمانی عفونت های ناشی از این ارگانیسم مناسب نیست. </div> <b>Background and Objectives: </b><i>Staphylococcus epidermidis</i> is the most important member of coagulase negative staphylococci. This organism has been reported as the third cause of nosocomial infections in the last decade and one of the most important causes of bacterimia. New generation β-lactam antibiotics are commonly used to cure these infections. Overproduction of β-lactamases not only results in bacterial resistance against β-lactams, but also causes false methicillin resistance in some strains lacking methicillin resistance gene. The aims of this study was to determine the susceptibility of clinical isolates of <i> Staphylococcus epidermid</i>i s to some β-lactam antibiotics, to screen the isolates for β-lactamase production and detect the presence of the β-lactamase gene (blaZ). <br> <b>Materials and Methods</b>: Sixty-nine clinical isolates of coagulase negative staphylococci were collected from three hospitals in Tehran. Susceptibility to 8 β–lactam antibiotics was determined using disc diffusion. β-lactamase production was screened by the iodometric colony test and presence of the blaZ gene was detected using specific primers and PCR. <br><b>Results: </b>The antibiotic sensitivity results showed that 54 isolates (98.1%) were resistant to penicillin, 50 isolates (90.9%) to methicillin, 29 isolates (52.7%) to ceftriaxon, 27 isolates (49.09%) to ceftizoxime, 20 isolates (36.3%) to cefotaxim, 19 isolates (34.5%) toamoxicillin, 17 isolates (30.9%) to cefazolin and 13 isolates (23.6%) to cefalexin. The iodometric assay showed that all the isolates were β-lactamase producers and the PCR results confirmed the presence ofblaZgene in all isolates <br><b>Conclusion:</b> Overall, 24-53 % of the clinical isolates of <i>S. epidermidis</i> were resistant to the third generation β-lactam antibioticas by disc diffusion. On the other hand,iodometric colony tests showed that all isolates produced β-lactamase and the presence of the <i>blaZ</i> gene was confirmed in all by PCR. The results obtained in this study suggest that despite the presence of the β-lactamase gene, enzyme expression is variable in different isolates and disc susceptibility test alone isnot often suitable for determining the course of antibiotic therapy. بتالاکتاماز، استافیلوکوکوس اپیدرمیدیس،‌ ژن blaZ β-lactamase, Staphylococcus epidermidis,blaZgene 35 41 http://ijmm.ir/browse.php?a_code=A-10-1-94&slc_lang=fa&sid=1 Fereshteh Raei فرشته راعی 1003194753284600512 1003194753284600512 No Department of Microbiology , Faculty of Biological Sciences, Shahid Beheshti University, GC گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه شهید بهشتی Fereshteh Eftekhar فرشته افتخار f_eftekhar@cc.sbu.ac.ir 1003194753284600513 1003194753284600513 Yes Department of Microbiology , Faculty of Biological Sciences, Shahid Beheshti University, GC گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه شهید بهشتی