fa تشخیص مولکولی جدایه های گاوی مایکوباکتریوم بویس از جدایه های انسانی مایکوباکتریوم توبرکلوزیس در ایران به روش PCR-RFLP و مقایسه با 5 سویه استاندارد میکروب شناسی مولکولی Molecular Microbiology مقاله پژوهشی Original Research Article <div align="right" style="direction: rtl"><b>زمینه و اهداف:</b> کمپلکس مایکوباکتریوم توبرکلوزیس از مجموعه مایکوباکتریوم های با شباهت ژنتیکی زیاد تشکیل شده که با توجه به طولانی بودن زمان انکوباسیون، تعیین هویت این باکتری ها بسیار مشکل است. به دلایل بهداشتی، تمایز بین مایکوباکتریوم بویس از سایر مایکوباکتری های کمپلکس توبرکلوزیس از اهمیت ویژه ای برخوردار است. هدف این تحقیق ارزیابی یک روش جهت افتراق<i> مایکوباکتریوم بویس</i> از <i>مایکوباکتریوم توبرکلوزیس</i> می باشد. <br><b>روش بررسی:</b> یک قطعه از شبه ژن oxyR به طول 548 جفت باز هدف آزمایش PCR-RFLP قرار گرفت. نوکلئوتید 285 از قطعه هدف مذکور در ژنوم <i>مایکوباکتریوم بویس</i> و <i>مایکوباکتریوم بویس</i> BCG، حاوی باز آدنین، در حالی که در تمامی دیگر اعضا کمپلکس توبرکلوزیس حاوی باز گوانین می باشد که باعث از بین رفتن یک سایت عملکرد آنزیم AluI می شود. لذا در قطعه مذکور، در <i>مایکوباکتریوم بویس</i> و <i>مایکوباکتریوم بویس</i> BCG چهار سایت برش، در حالی که در سایر مایکوباکتری های کمپلکس، سه سایت برش توسط این آنزیم وجود دارد. در 6 جدایه بالینی مایکوباکتریوم جدا شده از انسان و 50 جدایه گاوی و 5 سویه استاندارد، قطعه مورد نظر از شبه ژن oxyR توسط PCR تکثیر و سپس با استفاده از آنزیم AluI برش داده شد و الگوهای برش با یکدیگر مقایسه شد. <b>یافته ها:</b> در تمامی موارد مربوط به <i>مایکوباکتریوم بویس</i> و <i>مایکوباکتریوم بویس</i> BCG سه قطعه ناشی از برش، در حالی که در تمامی موارد مربوط به سایر مایکوباکتری ها، یک قطعه ناشی از برش مشاهده شد.<br><b>نتیجه گیری:</b> روش PCR-RFLP بر روی شبه ژن oxyR روشی سریع و دقیق جهت افتراق <i>مایکوباکتریوم بویس</i> از سایر مایکوباکتری های کمپلکس توبرکلوزیس می باشد.</div> <b>Background and Objectives:</b> <i>Mycobacterium tuberculosis</i> complex is consisted of homogenous organisms. They are slowly growing mycobacteria and their isolation and identification are difficult and time consuming. Differentiation of <i>Mycobacterium bovis</i>, causative mammalian tuberculosis, from other members of <i>Mycobacterium tuberculosis</i> complex is very important in epidemiology and control of disease in humans and animals. The aim of this study was to evaluate a molecular method to differentiate <i>Mycobacteriom bovis </i>from Mycobacterium tuberculosis. <br><b>Material and Methods:</b> DNA human isolates of <i>Mycobacterium tuberculosis</i> (n=6) and <i>Mycobacterium bovis is</i>olates (50) were extracted and used as template in PCR. A 548bp fragment of oxyR pseudogene was amplified and digested with AluI endo nuclease. The nucleotide 285 could be adenine (<i>M. bovis</i>) or guanine (<i>M. tuberculosis</i>). Such variation produces different restriction site for AluI. <br> <b>Results</b>:There were three incisive fragments in all <i>Mycobacterium bovis</i> and <i>Mycobacterium bovis</i> BCG strains and one incisive fragment in other members of <i>Mycobacterium tuberculosis</i> complex. <br> <b>Conclusion: </b>PCR-RFLP method on 548bp fragment of oxyR gene is a rapid and accurate method to differentiate <i>Mycobacterium bovis </i>and <i>Mycobacterium bovis</i> BCG from other members of <i>Mycobacterium tuberculosis</i> complex. E. coli,Haemolytic activity, Ampicillin, Ciprofloxacin, Mycobacterium bovis, Mycobacterium tuberculosiscomplex, oxyRpseudogene, PCR-RFLP, AluI 1 7 http://ijmm.ir/browse.php?a_code=A-10-1-80&slc_lang=fa&sid=1 Mosavari نادر مصوری 1003194753284600456 1003194753284600456 No Department of Microbiology , Isfahan University of Medical Sciences. بخش تولید PPD، موسسه واکسن و سرم سازی رازی Salehi میترا صالحی 1003194753284600457 1003194753284600457 No Tehran North Branch, Islamic Azad University, Tehra گروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد تهران شمال Tadayon کیوان تدین 1003194753284600458 1003194753284600458 No PPD Production Department, Razi Institute, Karaj بخش تولید PPD، موسسه واکسن و سرم سازی رازی Mohammad Taheri محمد محمدطاهری 1003194753284600459 1003194753284600459 No PPD Production Department, Razi Institute, Karaj بخش تولید PPD، موسسه واکسن و سرم سازی رازی Soaimani کیومرث سلیمانی 1003194753284600460 1003194753284600460 No PPD Production Department, Razi Institute, Karaj بخش تولید PPD، موسسه واکسن و سرم سازی رازی Aref Pajouhi رضا عارف پژوهی 1003194753284600461 1003194753284600461 No PPD Production Department, Razi Institute, Karaj PPD Production Department, Razi Instiبخش تولید PPD، موسسه واکسن و سرم سازی رازی t‏ute, Karaj Sepehriseresht سعید سپهری سرشت 1003194753284600462 1003194753284600462 No Faculty of Veterinary Medicine, Tehran University, Tehran بخش تولید PPD، موسسه واکسن و سرم سازی رازی Alavi مرضیه علوی 1003194753284600463 1003194753284600463 Yes گروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد تهران شمال