TY - JOUR T1 - Cloning, Expression and Characterization of PprI gene in Escherichia coli TT - کلونینگ، بیان و ارزیابی عملکرد ژن PprI داینوکوکوس رادیودورانس در اشریشیا کلی JF - Iran-J-Med-Microbiol JO - Iran-J-Med-Microbiol VL - 7 IS - 4 UR - http://ijmm.ir/article-1-248-fa.html Y1 - 2014 SP - 24 EP - 29 KW - PprI gene KW - Radiation resistant KW - Deinococcus radiodurans N2 - زمینه و اهداف: ژن PprI یکی از ژن‌های جدید شناخته‌شده در باکتری داینوکوکوس رادیودورانس می‌باشد که نقش اساسی در ترمیم DNA و مقاومت این باکتری نسبت به اشعه ماورای بنفش دارد. هدف این مطالعه کلون، بیان و بررسی خصوصیات ژن PprI در اشریشیاکلی می‌باشد. مواد و روش کار: ژن PprI باکتری داینوکوکوس رادیودورانس در حامل کلونینگ pGEM به‌صورت سنتتیک ساخته‌شده و در وکتور pET21a ساب کلون گردید. حامل پلاسمید بیانی pET21a حاوی ژن PprI در اشریشیاکلی سویه Origami ترانسفورم گردید و بیان پروتئین با استفاده از SDS-PAGE و وسترن بلات بررسی شد. هم چنین میزان مقاومت به اشعه UV-C در باکتری اشریشیا کلی نوترکیب تعیین شد. یافته‌ها: در این مطالعه وکتور pET21a حاوی ژن PprI به همراه دم انتهایی هیستیدینی ساخته شد و شرایط بهینه برای بیان پروتئین نوترکیب PprI تعیین گردید. همچنین اشریشیا کلی نوترکیب نسبت به سویه فاقد ژن PprI به اشعه UV-C مقاوم‌تر شده بود. نتیجه‌گیری: نتایج این مطالعه نشان می‌دهد که پروتئین نوترکیب PprI می‌تواند گزینه مناسبی به‌عنوان پروتئین مقاوم به پرتو باشد. همچنین می‌توان پروتئین تولیدشده را خالص‌سازی کرده و میزان مقاومت به اشعه UV-C را در سیستم‌های پروکاریوتی و یوکاریوتی نیز بررسی نمود. M3 ER -