سال 4، شماره 3 - ( پاییز 1389 )
جلد 4 شماره 3 صفحات 44-36 |
برگشت به فهرست نسخه ها
Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
Ghaderi H, Rezaie S, Noorbakhsh F, Vafaie M, Motavaze K, Emamy M et al . Cloning of G subunit’s of V-ATPase gene from Trychophyton rubrum for use the proteins. Iran J Med Microbiol 2010; 4 (3) :36-44
URL: http://ijmm.ir/article-1-38-fa.html
URL: http://ijmm.ir/article-1-38-fa.html
قادری هاجرالسادات، رضایی ساسان، نوربخش فاطمه، وفایی مهتاب، متواضع کامیار، امامی مسعود و همکاران.. جدا سازی ژن زیر واحد G آنزیم V-ATPase از قارچ Trichophyton rubrum و کلونینگ آن در E.coli . مجله میکروب شناسی پزشکی ایران. 1389; 4 (3) :36-44
هاجرالسادات قادری 
1، ساسان رضایی2 ، فاطمه نوربخش3 ، مهتاب وفایی1 ، کامیار متواضع1 ، مسعود امامی1 ، محمدرضا صفری4
1، ساسان رضایی2 ، فاطمه نوربخش3 ، مهتاب وفایی1 ، کامیار متواضع1 ، مسعود امامی1 ، محمدرضا صفری4
1- گروه میکرب شناسی،دانشکده علوم پایه، دانشگاه آزاداسلامی،واحد تهران شمال
2- بخش بیولوژی مولکولی،گروه قارچ شناسی وانگل شناسی،دانشکده بهداشت، دانشگاه علوم پزشکی تهران
3- گروه میکرب شناسی ،دانشکده علوم پایه ، دانشگاه آزاد اسلامی،واحدورامین-پیشوا
4- گروه قارچ شناسی و انگل شناسی،دانشکده بهداشت، دانشگاه علوم پزشکی تهران
2- بخش بیولوژی مولکولی،گروه قارچ شناسی وانگل شناسی،دانشکده بهداشت، دانشگاه علوم پزشکی تهران
3- گروه میکرب شناسی ،دانشکده علوم پایه ، دانشگاه آزاد اسلامی،واحدورامین-پیشوا
4- گروه قارچ شناسی و انگل شناسی،دانشکده بهداشت، دانشگاه علوم پزشکی تهران
چکیده: (14860 مشاهده)
زمینه و اهداف: T.rubrum) Trichophyton rubrum) شایع ترین عامل کچلی انسان در سراسر دنیا می باشد. درمان این بیماری کامل نیست و پس از قطع دارو عود کننده است. اخیراً زیرواحد G از آنزیم V-ATPase به-عنوان هدف برای داروها مورد توجه قرار گرفته. هدف مطالعه کلون کردن ژن کدکننده زیرواحد G آنزیم V-ATPase قارچ T.rubrum در باکتری E.coli به منظور نگهداری و مطالعه بر روی پروتئین حاصل از آن بود.
روش بررسی: DNA و RNA از قارچ درماتوفیت T.rubrum جدا شد، سپس توسط PCR و RT-PCR تکثیر یافت و محصول RT-PCR در پلاسمید T–pTG19 الحاق شد. پلاسمید نوترکیب با روش شوک حرارتی به داخل E.coli وارد شد. باکتری کشت داده شد و کلنی های مشکوک جدا شدند و مجداداً کشت داده شدند .سپس PCR طبق روش قبل انجام شد.
یافته ها: وزن مولکولی DNA استخراج شده حدود 750bp و cDNA تقریبا 700bp بود. با کشت E.coli بر روی (Luria agar (LB Agar کلنی های آبی و سفید دیده شد. PCR کردن DNA حاصل از کلنی های مشکوک نشان داد 5 کلون از 8 کلون دارای ژن مورد نظر بود.
نتیجه گیری: به نظر می رسد که این ژن دارای اینترون است. کلنی های سفید رنگ به احتمال زیاد دارای ژن مورد نظر می باشد. نتایج حاصل از PCR در آخرین مرحله نشان دهنده کلون شدن ژن مورد نظر است.
روش بررسی: DNA و RNA از قارچ درماتوفیت T.rubrum جدا شد، سپس توسط PCR و RT-PCR تکثیر یافت و محصول RT-PCR در پلاسمید T–pTG19 الحاق شد. پلاسمید نوترکیب با روش شوک حرارتی به داخل E.coli وارد شد. باکتری کشت داده شد و کلنی های مشکوک جدا شدند و مجداداً کشت داده شدند .سپس PCR طبق روش قبل انجام شد.
یافته ها: وزن مولکولی DNA استخراج شده حدود 750bp و cDNA تقریبا 700bp بود. با کشت E.coli بر روی (Luria agar (LB Agar کلنی های آبی و سفید دیده شد. PCR کردن DNA حاصل از کلنی های مشکوک نشان داد 5 کلون از 8 کلون دارای ژن مورد نظر بود.
نتیجه گیری: به نظر می رسد که این ژن دارای اینترون است. کلنی های سفید رنگ به احتمال زیاد دارای ژن مورد نظر می باشد. نتایج حاصل از PCR در آخرین مرحله نشان دهنده کلون شدن ژن مورد نظر است.
نوع مطالعه: مقاله پژوهشی |
موضوع مقاله:
باکتری شناسی پزشکی
دریافت: 1392/8/6 | پذیرش: 1392/8/19 | انتشار الکترونیک: 1392/8/19
دریافت: 1392/8/6 | پذیرش: 1392/8/19 | انتشار الکترونیک: 1392/8/19
| بازنشر اطلاعات | |
 |
این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است. |
