سال 7، شماره 4 - ( زمستان 1392 )                   جلد 7 شماره 4 صفحات 35-30 | برگشت به فهرست نسخه ها

XML English Abstract Print


1- دانشگاه اصفهان ، Z.hojati@sci.ui.ac.ir
2- دانشگاه اصفهان
چکیده:   (12229 مشاهده)
زمینه و اهداف: استرپتومایسس کلاولی‌جروس تولیدکننده‌ی پادزیست‌ کلاولانیک اسید است که به‌طور گسترده‌ای همراه با سایر پادزیست‌های قوی و حساس به β لاکتاماز استفاده می‌گردد. ژن cas2 در دسته ژنی کلاولانیک اسید قرارگرفته و در تنظیم بیوسنتز کلاولانیک اسید نقش دارد.
مواد و روش کار: سازه (کانسترکت) نوترکیب pMTcas2 حاوی ژن cas2 از دانشگاه اصفهان تهیه گردید. با استفاده از روش لیز قلیایی پلاسمید نوترکیب از سویه‌ی استرپتومایسس لیویدنس استخراج گردید. کانسترکت نوترکیب با استفاده از روش پلی‌اتیلن گلیکول به پروتوپلاست‌های تهیه‌شده از باکتری استرپتومایسس کلاولی‌جروس ترانسفورم گردید. به‌منظور تأیید ترانسفورماسیون از روش‌های استخراج پلاسمید و PCR با استفاده از پرایمر های اختصاصی cas2 استفاده شد. درنهایت به‌منظور بررسی نحوه‌ی تأثیر ژن cas2 اضافه‌شده در تولید پادزیست از روش بیواسی استفاده گردید.
یافته‌ها: ساختار پلاسمید نوترکیب پس از استخراج با روش هضم آنزیمی تأیید شد. پس از ترانسفورماسیون کلنی‌های تک بر روی محیط بازیابی پروتوپلاست حاوی پادزیست اسپورهای خاکستری‌رنگ بر روی آن شکل گرفت. استخراج پلاسمید از سویه‌ی ترانسفورم شده انجام‌شده و ترانسفورماسیون با انجام PCR تأیید گردید. مطالعات بایواسی نشان داد که حضور پلاسمید نوترکیب سبب افزایش 1/4 برابری تولید کلاولانیک اسید در سویه‌ی استرپتومایسس کلاولی‌جروس گردیده است.
نتیجه‌گیری: با انجام روش بیواسی و تجزیه‌وتحلیل یافته‌ها مشخص شد که حضور پلاسمید نوترکیب واجد ژن cas2 سبب افزایش تولید کلاولانیک اسید در سویه‌ی استرپتومایسس کلاولی‌جروس گردیده است. افزایش تولید کلاولانیک اسید می‌تواند گامی مؤثر در روند کاهش هزینه‌های تولید داروهای پرمصرف وابسته به آن گردد.
متن کامل [PDF 710 kb]   (2310 دریافت)    
نوع مطالعه: مقاله پژوهشی | موضوع مقاله: بیوتکنولوژی میکروبی
دریافت: 1392/10/6 | پذیرش: 1392/12/13 | انتشار الکترونیک: 1393/3/6

بازنشر اطلاعات
Creative Commons License این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است.