en بررسی اثر آپوپتوز فیوژن پروتئین انتروسین A، پیوسین R، لاکتوسین ، باکتریوسین ها و لیگاند اختصاصی بر رده سلولی سرطان معده (AGS) باکتری شناسی پزشکی Medical Bacteriology مقاله پژوهشی Original Research Article <p style="font-style: normal; text-align: justify;"><span class="sanspYW"><span style="font-size:14px;"><span style="font-family:IRANsans;"><span style="color:#ffffff;"><strong><span style="background-color:#16a085;">زمینه و اهداف:&nbsp;</span></strong></span>&nbsp;</span></span></span><span style="font-size:14px;"><span style="font-family:IRANsans;"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span style="line-height:115%"><span lang="AR-SA"><span style="line-height:115%">درمان های مرسوم ضد سرطان مانند جراحی، شیمی درمانی، پرتودرمانی و غیره با مقاومت ضد میکروبی (</span></span><span dir="LTR"><span style="line-height:115%">AMR</span></span><span lang="AR-SA"><span style="line-height:115%">) مرتبط هستند و اثرات منفی بر بافت های سالم دارند.&nbsp;</span></span></span></span></span><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span style="line-height:115%"><span lang="AR-SA"><span style="line-height:115%">در این مطالعه از تکنیک فلوسایتومتری برای ارزیابی اثربخشی یک پپتید ضد سرطانی اصلاح شده در درمان رده سلولی سرطان معده </span></span><span dir="LTR"><span style="line-height:115%">AGS</span></span><span lang="AR-SA"><span style="line-height:115%"> استفاده شد.</span></span></span></span></span></span></span><br> <span class="sanspYW"><span style="font-size:14px;"><span style="font-family:IRANsans;"><strong><span style="color:#ffffff;"><span style="background-color:#16a085;">مواد و روش کار:&nbsp;</span></span>&nbsp;</strong></span></span></span><span style="font-size:14px;"><span style="font-family:IRANsans;"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span style="line-height:115%"><span lang="AR-SA"><span style="line-height:115%">در این مطالعه از نرم افزار بیوانفورماتیک برای تعیین توالی ژن </span></span><span dir="LTR"><span style="line-height:115%">EntA-PynR-Lac</span></span><span lang="AR-SA"><span style="line-height:115%"> استفاده شد. باکتری </span></span><i><span dir="LTR"><span style="line-height:115%">E. coli</span></span></i><span dir="LTR"><span style="line-height:115%"> <i>BL۲۱</i></span></span><span lang="AR-SA"><span style="line-height:115%"> مهندسی شده برای بیان پروتئین های نوترکیب مشتق شده از ژن فیوژن سنتز شده در ناقل بیانی </span></span><span dir="LTR"><span style="line-height:115%">pET۲۲b</span></span><span lang="AR-SA"><span style="line-height:115%"> استفاده شد. یک پروتئین نوترکیب طراحی شد و ساختار سه بعدی و پایداری آن مورد ارزیابی قرار گرفت. با استفاده از وسترن بلات و کروماتوگرافی ستون نیکل، پروتئین نوترکیب تایید و خالص شد. علاوه بر این، از تکنیک </span></span><span dir="LTR"><span style="line-height:115%">MTT</span></span><span lang="AR-SA"><span style="line-height:115%"> برای تعیین کشندگی سلولی غلظت‌های مختلف پروتئین نوترکیب در سلول‌های </span></span><span dir="LTR"><span style="line-height:115%">AGS</span></span><span lang="AR-SA"><span style="line-height:115%"> استفاده شد. فلوسایتومتری برای تعیین سطح آپوپتوز در سلول های </span></span><span dir="LTR"><span style="line-height:115%">AGS</span></span><span lang="AR-SA"><span style="line-height:115%"> تیمار شده با غلظت پروتئین مورد نظر استفاده شد.</span></span></span></span></span></span></span><br> <span class="sanspYW"><span style="font-size:14px;"><span style="font-family:IRANsans;"><span style="color:#ffffff;"><strong><span style="background-color:#16a085;">یافته ها:&nbsp;</span></strong></span>&nbsp;</span></span></span><span style="font-size:14px;"><span style="font-family:IRANsans;"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span style="line-height:115%"><span lang="AR-SA"><span style="line-height:115%">با توجه به نتایج آزمون </span></span><span dir="LTR"><span style="line-height:115%">MTT</span></span><span lang="AR-SA"><span style="line-height:115%">، غلظت ۸۰ میکروگرم بر میلی‌لیتر پروتئین نوترکیب، اثرات سایتوتوکسیک معنی‌داری را بر روی رده سلولی </span></span><span dir="LTR"><span style="line-height:115%">AGS</span></span><span lang="AR-SA"><span style="line-height:115%"> نشان داد. علاوه بر این، با استفاده از فلوسایتومتری، مشخص شد که سلول‌های سرطانی تیمار شده با این غلظت از پروتئین نوترکیب، نسبت به سلول‌های سرطانی تیمار نشده، درصد مجموع آپوپتوز بیشتری را نشان می‌دهند.</span></span></span></span></span></span></span><br> <span class="sanspYW"><span style="font-size:14px;"><span style="font-family:IRANsans;"><strong><span style="color:#ffffff;"><span style="background-color:#16a085;">نتیجه‌گیری:&nbsp;</span></span>&nbsp;</strong></span></span></span><span style="font-size:14px;"><span style="font-family:IRANsans;"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span style="line-height:115%"><span lang="AR-SA"><span style="line-height:115%">مهار تکثیر و رشد سلول‌های سرطانی معده توسط این پروتئین نوترکیب مؤثر بوده است. ویژگی های ضد آپوپتوز پروتئین فیوژن، آن را برای اهداف درمانی و پیشگیرانه هنگام درمان سلول های سرطانی مفید می کند.</span></span></span></span></span></span></span></p> <p style="text-align: justify;"><span style="font-family:Times New Roman;"><span style="font-size:16px;"><span style="color:#ffffff;"><strong><span style="background-color:#16a085;">Background and Aim:</span></strong></span>&nbsp;</span></span><span style="font-size:16px;"><span style="font-family:Times New Roman;"><span style="line-height:2;"><span lang="EN">Conventional anti-cancer treatments, such as surgery, chemotherapy, radiation therapy, etc., are linked to antimicrobial resistance (AMR) and have negative effects on healthy tissues.</span><b> </b>The flow cytometry technique was used in this study to evaluate the effectiveness of a modified anti-cancer peptide in treating the AGS gastric cancer cell line.</span></span></span><br> <span style="font-family:Times New Roman;"><span style="font-size:16px;"><strong><span style="color:#ffffff;"><span style="background-color:#16a085;">Materials and Methods:</span></span></strong>&nbsp;</span></span><span style="font-size:16px;"><span style="font-family:Times New Roman;"><span style="line-height:2;"><span lang="EN">This study used bioinformatics software to determine the EntA-PynR-Lac gene sequence. The engineered <i>E. coli</i> BL21 bacterium was used to express recombinant proteins derived from the synthesized fusion gene cloned into the pET22b expression vector. A recombinant protein was designed, and its three-dimensional structure and stability were evaluated. Using Western blotting and nickel column chromatography, the recombinant protein was confirmed and purified. In addition, the MTT technique was used to determine the cell lethality of various concentrations of the recombinant protein in AGS cells.</span> Flow cytometry was used to determine the level of apoptosis in AGS cells treated with the desired protein concentrations.</span></span></span><br> <span style="font-family:Times New Roman;"><span style="font-size:16px;"><strong><span style="color:#ffffff;"><span style="background-color:#16a085;">Results:</span></span></strong> </span></span><span style="font-size:16px;"><span style="font-family:Times New Roman;"><span style="line-height:2;">According to the results of the MTT test, the 80&micro;g/mL concentration of recombinant protein showed significant cytotoxic effects on the AGS cell line. Furthermore, using flow cytometry, it was found that cancer cells treated with this concentration of recombinant protein exhibited higher rates of total apoptosis than untreated cancer cells.</span></span></span><br> <span style="font-family:Times New Roman;"><span style="font-size:16px;"><strong><span style="color:#ffffff;"><span style="background-color:#16a085;">Conclusion:</span></span></strong>&nbsp;</span></span><span style="font-size:16px;"><span style="font-family:Times New Roman;"><span style="line-height:2;"><span lang="EN">Inhibition of proliferation and growth of gastric cancer cells by this recombinant protein has been shown to be effective.</span> The anti-apoptotic characteristics of the fusion protein make it useful for both therapeutic and preventative purposes when treating cancer cells.</span></span></span></p> <p style="text-align: justify;"><p style="text-align: justify;"></p></p> <p style="text-align: justify;"><div></div></p> آپوپتوز, فیوژن پروتئین, انتروسین A, پیوسین  R, لاکتوسین, باکتریوسین ها Apoptosis, Protein Fusion, Enterocin A, Pyocin R, Lactocin, Bacteriocins 176 185 http://ijmm.ir/browse.php?a_code=A-10-116-8&slc_lang=en&sid=1 Neda Jalalvand ندا جلالوند nedajalalvand@gmail.com 100319475328460024432 0009-0008-0113-3821 No Department of Genetics, Faculty of Basic Sciences, Kazerun Branch, Islamic Azad University, Kazerun, Iran گروه ژنتیک، دانشکده علوم پایه، واحد کازرون، دانشگاه آزاد اسلامی، کازرون، ایران Davoud Esmaeili داود اسماعیلی esm114@gmail.com 100319475328460024433 100319475328460024433 Yes Department of Microbiology and Applied Virology Research Center, Baqiyatallah University of Medical Sciences, Tehran, Iran گروه میکروب شناسی و مرکز تحقیقات ویروس شناسی کاربردی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله، تهران، ایران Mohammad Mehdi Moghani Bashi محمد مهدی مغنی باشی mehdimoghani@yahoo.com 100319475328460024434 100319475328460024434 No Department of Genetics, Faculty of Basic Sciences, Kazerun Branch, Islamic Azad University, Kazerun, Iran گروه ژنتیک، دانشکده علوم پایه، واحد کازرون، دانشگاه آزاد اسلامی، کازرون، ایران Mohamad Reiszadeh محمد رئیس زاده esmaeili14@yahoo.com 100319475328460024435 100319475328460024435 No Associate Professor of Surgery, School of Medicine, Trauma Research Center, Bqiyatallah al-Azam Hospital, Baqiyatallah University of Medical sciences, Tehran, Iran دانشیار جراحی، دانشکده پزشکی، مرکز تحقیقات تروما، بیمارستان بقیه الله الاعظم، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (عج)، تهران، ایران Sirous Naeimi سیروس نعیمی naeimis@kau.ac.ir 100319475328460024436 100319475328460024436 No Department of Genetics, Faculty of Basic Sciences, Kazerun Branch, Islamic Azad University, Kazerun, Iran گروه ژنتیک، دانشکده علوم پایه، واحد کازرون، دانشگاه آزاد اسلامی، کازرون، ایران