[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: درباره نشريه :: آخرين شماره :: آرشیو مجله :: ارسال مقاله :: ثبت نام :: جستجو :: تماس با ما ::
:: سال 11، شماره 2 - ( خرداد - تیر 1396 ) ::
جلد 11 شماره 2 صفحات 26-33 برگشت به فهرست نسخه ها
طراحی سیستم الیزای غیرمستقیم با استفاده از پادگن‌های ترشحی مایکوباکتریوم آویوم زیرگونه پاراتوبرکلوزیس برای تشخیص پاراتوبرکلوزیس
مونا حاتمی فر1، نادر مصوری 2، جواد کاظمی1
1- مرکز تحقیقات زیست‌فناوری پزشکی، واحد اشکذر، دانشگاه آزاد اسلامی، اشکذر، یزد، ایران
2- آزمایشگاه رفرانس سل گاوی، موسسه تحقیقات واکسن و سرم‌سازی رازی، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی (تات)، تهران، ایران ، nmosavari@gmail.com
چکیده:   (527 مشاهده)

زمینه و اهداف: مایکوباکتریوم آویوم زیرگونه پاراتوبرکلوزیس (MAP)، عامل به وجود آورنده پاراتوبرکلوزیس است که به‌ عنوان بیماری یون نیز نامیده می‌شود و علت ضررهای اقتصادی جبران‌ناپذیر در صنعت دامپروری به‌حساب می‌آید. جهت تشخیص آلودگی به پاراتوبرکلوزیس، الیزای غیرمستقیم به‌عنوان یک روش ساده با حساسیت و ویژگی بالا بیشتر مورد توجه بوده است. از این‌رو هدف از این مطالعه طراحی یک سیستم الیزای غیرمستقیم جهت تشخیص بیماری پاراتوبرکلوزیس می‌باشد.

مواد و روش کار: تعداد 100 نمونه سرم از 10 گله در سال 1394 در استان های تهران و البرز که پاراتوبرکلوزیس توسط کشت در آن‌ها به اثبات رسیده با کیت استاندارد مورد مطالعه قرار گرفت و سیستم داخلی مطابق کیت استاندارد طراحی گردید. جهت طراحی سیستم الیزا با استفاده از پادگن‌های ترشحی، سرم مثبت و منفی واقعی پلیت متقاطع تیتراسیون انجام گرفت. جهت تعیین حد آستانه از نتایج کیت خارجی به ‌عنوان استاندارد طلایی استفاده شد.

یافته‌ها: با در نظر گرفتن نتایج (15 نمونه مثبت و 85 نمونه منفی) در ارزیابی‌های کیت تجاری، بهترین غلظت پادگن و رقت پادتن در سیستم طراحی‌شده به ترتیب 1/2 میکروگرم و 1/100 به ترتیب در هر چاهک ارزیابی شد. علاوه بر این، میزان حد آستانه برابر با 0/44 مشخص گردید. حساسیت و ویژگی به ترتیب 100 و 70 درصد ارزیابی شد.

نتیجه‌گیری: پادگن‌های ترشحی مایکوباکتریوم پاراتوبرکلوزیس حساسیت لازم را جهت تشخیص بیماری ایجاد می‌کنند، اما تشخیص باکتری از مدفوع در مراحل اولیه بیماری، مشکل است. بنابراین با استفاده از الیزای غیرمستقیم طراحی‌شده می‌توان پادتن را در مراحل اولیه بیماری ردیابی کرد.

واژه‌های کلیدی: مایکوباکتریوم آویوم، پاراتوبرکلوزیس، الیزای غیرمستقیم، پادگن‌های ترشحی
متن کامل [PDF 676 kb]   (116 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي | موضوع مقاله: بیماریهای مشترک انسان - دام
فهرست منابع
1. Ansari-Lari M, Haghkhah M, Bahramy A, Baheran AMN. Risk factors for Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis in Fars province (Southern Iran) dairy herds. Trop Anim Health Prod 2009;41(4):553-7. [PubMed]
2. Scanu MA, Bull TJ, Cannas S, Sanderson JD, Sechi LA, Dettori G, et al. Mycobacterium avium Subspecies paratuberculosis Infection in Cases of Irritable Bowel Syndrome and Comparison with Crohn’s Disease and Johne’s Disease: Common Neural and Immune Pathogenicities. J Clin Microbiol 2007;45(12):3883-90. [Article]
3. Sadati R, Jafarpour M, Mirinargesi M, Nazemi A, Barghi A. Prevalence of Mycobacterium avium subsp. Paratuberculosis in dairy cattle bred in northern Iran by nested PCR. Glob Vet 2012;8(3):259-63. [Article]
4. Seyyedin M, Salehi TZ, Tadjbakhsh H, Najafi MF, Rabbani M. Isolation and Identification of Mycobacterium avium ssp. Paratuberculosis from Milk, Manure and Fecal of Holstein- Friesian Dairy Cattle. Pak J Biol Sci 2008;11(24):2639-44. [Article]
5. Englund S, Bölske G, Johansson KE. An IS900-like sequence found in a Mycobacterium sp. other than Mycobacterium avium subsp. Paratuberculosis. FEMS Microbiol Lett 2002;209(2):267-71. [PubMed]
6. Crowther JR. The ELISA guide book. 2nd ed. New Jersey: Humana Publishers; 2001. [Article]
7. Trangoni MD, Gioffré AK, Cerón Cucchi ME, Caimi KC, Ruybal P, Zumárraga MJ, et al. LAMP technology: Rapid identification of Brucella and Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis. Braz J Microbiol 2015;46(2):1-6. [PubMed]
8. Köhler H, Burkert B, Pavlik I, Diller R, Geue L, Conraths FJ, et al. Evaluation of five ELISA test kits for the measurement of antibodies against Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis in bovine serum. Berl Munch Tierarztl Wochenschr 2008;121(56):203-10. [PubMed]
9. Steadham EM, Martin BM, Thoen CO. Production of a Mycobacterium avium ssp. paratuberculosis purified protein derivative (PPD) and evaluation of potency in guinea pigs. Biol J 2002;30(2):93-5. [PubMed]
10. Lowry OH, Rosebrough NJ, Farr AL, Randall RJ. Protein measurement with the Folin phenol reagent. J Biol Chem 1951;193:265-75. [PubMed]
11. Sadati R, Jafarpour M, Mirinargesi M, Nazemi A, Barghi A. Prevalence of Mycobacterium avium subsp. Paratuberculosis in Dairy Cattle Bred in Northern Iran by Nested-PCR. Glob Vet 2012;8(3):259-63. [Article]
12. Facciuolo A, Kelton DF, Mutharia L M. Novel Secreted Antigens of Mycobacterium paratuberculosis as Serodiagnostic Biomarkers for Johne’s Disease in Cattle. Clin Vaccine Immunol 2013;20(12):1783-91. [PubMed]
13. Marassi C, Fonseca L, Ristow P, Ferreira R, Walter L. Improvement of an in-house elisa for bovine paratuberculosis serology in brazil. Braz J Microbiol 2005;36(2):118-22. [Article]
14. Bech-Nielsen S, Jorgensen JB, Ahrens P, Fled NC. Diagnostic accuracy of a Mycobacterium phlei-absorbed serum enzyme-linked immunosorbent assay for diagnosis of bovine paratuberculosis in dairy cows. J Clin Microbiol 1992;30(3):613-8. [PubMed]
15. Collins MT, Sockett DC, Ridge S, Cox JC. Evaluation of a Commercial Enzyme-Linked Immunosorbent Assay for Johne's Disease. J Clin Microbiol 1991;29(2):272-6. [PubMed]
16. Todd JA. Etiology of type 1 diabetes. Immunity 2010;32(4):457-67. [PubMed]
17. Whittington RJ, Marsh IB, Saunders V, Grant IR, Juste R, Sevilla IA, et al. Culture phenotypes of genomically and geographically diverse Mycobacterium avium subsp. Paratuberculosis isolates from different hosts. J Clin Microbiol 2011;49(5):1822-30. [Article]
ارسال پیام به نویسنده مسئول

ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

کد امنیتی را در کادر بنویسید >



XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Hatamifar M, Mosavari N, Kazemi J. Designing of Indirect ELISA system using secreted antigens of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis for Diagnosis of paratuberculosis. Iran J Med Microbiol. 2017; 11 (2) :26-33
URL: http://ijmm.ir/article-1-671-fa.html
حاتمی فر مونا، مصوری نادر، کاظمی جواد. طراحی سیستم الیزای غیرمستقیم با استفاده از پادگن‌های ترشحی مایکوباکتریوم آویوم زیرگونه پاراتوبرکلوزیس برای تشخیص پاراتوبرکلوزیس. مجله میکروب شناسی پزشکی ایران. 1396; 11 (2) :26-33

URL: http://ijmm.ir/article-1-671-fa.html

سال 11، شماره 2 - ( خرداد - تیر 1396 ) برگشت به فهرست نسخه ها
مجله میکروب شناسی پزشکی ایران Iranian Journal of Medical Microbiology
Persian site map - English site map - Created in 0.05 seconds with 810 queries by yektaweb 3474